CA1333602C - Derives de metalloporphyrines, leur preparation, leur application en therapeutique et leur utilisation pour la preparation de molecules hybrides - Google Patents

Abstract

Les nouveaux dérivés de métalloporphyrines selon l'invention répondent à la formule générale <IMG> dans laquelle A et B représentent chacun <IMG> ou <IMG> et Z+ représente N+-R1 ou C-N+R1R2R3, R1, étant un groupe aliphatique droit ou ramifié en C1 à C10, et R2 et R3 étant chacun un atome d'hydrogène ou un groupe aliphatique droit ou ramifié en C1, à C10, R réprésente un groupe NH2,OH,COOH ou -N(R1)3 ou un atome d'halogène, n est O ou un entier de 1 à 10, le groupe alkylène correspondant pouvant être droit ou ramifié, M représente un métal de transition, X- représente l'anion d'un acide carboxylique pharmaceutiquement acceptable m étant un entier de 1 à 5 et Y représente une liaison ou un radical -O-, -CO- ou -CO-NH-. Médicaments, notamment antitumoraux et anti-viraux.

Description

~,A ~ 333632 La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés de métalloporphyrines, leur préparation, leur application en thérapeutique, et leurutilisation pour la préparation de molécules hybrides à usage thérapeutique.
L'utilisation de certains dérivés hématoporphyriniques dans le traitement des 5 cancers par photothérapie a été décrite par exemple par J. Moan (Photobiol.
Photochem. 43, 681 (1986). Ces molécules présentent la particularité de s'accumuler au niveau des tumeurs, ce qui permet de les utiliser comme marqueurs biologiques ou agents thérapeutiques. Toutefois, la préparation de cesdérivés conduit souvent à un mélange de produits pas toujours bien définis et de10 composition variable. Cet état de fait justifie le développement de dérivés porphyriniques obtenus par synthèse totale et pouvant se substituer aux hématoporphyrines dans le traitement de cancers par photothérapie.
Par ailleurs, des travaux récents ont montré que des dérivés métallés de porphyrines synthétiques sont capables de couper les acides nucléiques (ADN) in 15 vitro selon un processus d'oxydation (EP-A-1 18 913; E. Fouquet, G. Pratviel, J.
Bernadou et B. Meunier, J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1169 (1987). Cette activité nucléase de métalloporphyrines hydrosolubles est d'autant plus intéressante qu'elle est observable pour des concentrations très faibles de réactifs (de l'ordre de 10-6 à 10-8 M), inférieures à celles de la bléomycine (un antibiotique 20 antitumoral possédant une forte activité nucléase en présence d'ions ferriques, d'oxygène moléculaire et de réducteurs). Les nombreuses études menées ces dernières années sur la pharmacologie moléculaire de ce médicament majeur de la chimiothérapie anticancéreuse indiquent que son activité cytotoxique ,,A I 333602 et antitumorale peut être due à sa capacité à dégrader l'ADN de cellules tumorales.
Selon la présente invention on a effectué la synthèse de métalloporphyrines (dont la sphère de coordination autour d'ions fer ou manganèse modélise l'arrangement des ligands peptidiques de la bléomycine) ayant les deux propriétés 5 suivantes:
- activité nucléase sur l'ADN in vitro, et - activité cytotoxique sur cellules entières.
qui, à la connaissance des inventeurs, n'ont pas encore été décrites pour des métalloporphyrines. L'invention concerne donc de nouveaux dérivés 10 porphyriniques possédant cette double propriété. Par ailleurs, on montre également que cette double propriété est conservée dans des molécules hybrides lorsque le squelette porphyrinique est relié à une entité possédant une affinité pour les acides nucléiques et capable aussi de moduler l'activité biologique de ces métalloporphyrines cytotoxiques (polyamines, polylysine, oligonucléotides...).
15Les nouveaux dérivés de métalloporphyrines selon l'invention répondent à la formule générale 204~ ~ ~ X~
dans laquelle A et B représentent chacun R (C~2)nY~ ~ZJ X et 3 13336o2 Z représente N+-Rl ou C-N+RlR2R3; Rl étant un groupe aliphatique droit ou ramifié en Cl à C10, et R2 et R3 étant chacun un atome d'hydrogène ou un groupe alipha-tique droit ou ramifié en Cl à C10, R représente un groupe NH2,OH,COOH ou -N+(Rl)3, ou un atome d'halogène, n est 0 ou un entier de 1 à 10, le groupe alkylène correspondant pouvant être droit ou ramifié, M représente un métal de transition, X représente l'anion d'un acide carboxylique pharma-ceutiquement acceptable, m étant un entier de 1 à 5, et Y représente une liaison, ou un radical -O-, -CO-ou -CONH-.
De préférence, Rl représente un groupe alkyle, en particulier méthyle ou éthyle, et R2 et R3 représentent chacun un atome d'hydrogène ou méthyle, M représente notamment Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn ou Ru, de préférence Mn ou Fe.
X est choisi notamment parmi les anions des acides carboxyliques solubles couramment utilisés en pharma-cie, en particulier : acétate, propionate, butyrate, ascorbate, benzoate, cinnamate, citrate, fumarate, glycolate, malonate, tartrate, malate, maléate et mandélate.
De préférence encore Z+ représente le groupe N+-Rl .
Les composés de formule I peuvent être pré-parés par a) condensation d'un phényl-carboxaldéhyde de formule 4 ~ r CHO II
R'-(CH2)nY
X,~
7, 1 ~!A i 333602 dans laquelle n et Y ont la même signification que dans la formule I et R' est le groupe R éventuellement protégé de la formule 1.
et d'un aldéhyde de formule ~ I I ~
dans laquelle Z' représente N ou3C-NR2R3, R2 et R3 ont la même signification que10 dans la formule 1, avec le pyrrole en milieu acide, de façon à obtenir une porphyrine (PP) tétrasubstituée en positions 5, 10, 15, 20 de formule générale l'P ( ~ ) i~_Y'(CH2 ) n~R'l ~V
dans laquelle R', n Y et Z' ont les mêmes significations que dans les formules ll et lll respectivement, et n, et n2 sont des entiers de 1 à 3, avec n, + n2 = 4, b) le cas échéant le composé IV est soumis à une déprotection du radical R' pour obtenir une porphyrine tétrasubstituée en 5, 10, 15, 20 de formule générale PP 1~ Y-~H2)n-E~) V
dans laquelle Z' a la même signification que dans la formule lll, PP, n, et n2 sont comme dans la formule IV et n, R, et Y ont la même signification que dans la formule 1, c) le composé de formule V, après protection éventuelle de la fonction R, est soumis à une ~,A, ~33602 réaction d'alkylation à l'aide d'un halogènure R1-hal, R1 ayant la même signification que dans la formule I et hal désignant le brome ou d'iode, de manière à obtenir une porphyrine tétrasubstituée en 5, 10, 15, 10 de formule générale PP I ~~) ~~~Y (~)~2 ) r~-R) ~al~
et d) ce composé est métallée à l'aide d'un sel MXp, M et X ayant la même signification que dans la formule I et p correspondant à la valence du métal M.
L'étape a) est effectuée en milieu acide, notamment acide propionique au reflux, en présence d'anhydride acétique.
Selon la signification du radical R, une protection peut être nécessaire. Si R
15 = NH2, on choisira R' = NO2 et alors l'étape b) consistera à réduire NO2 en NH2, notamment par le chlorure stanneux en milieu acide fort. Si R = COOH, on choisira pour R' un ester d'alkyle correspondant et l'étape b) consistera à
hydrolyser cet ester.
L'étape c) d'alkylation est effectuée de manière classique, dans un solvant 20 polaire neutre tel que le diméthylformamide (DMF) au reflux.
L'étape d) de métallation, peut aussi être effectuée dans le DMF au reflux, notamment en présence de 2,4,6-collidine.
Selon une variante, les étapes c) et d) peuvent être inversées.
L'invention concerne aussi l'utilisation des composés (I) pour la préparation 25 de molécules hybrides ~A~33~D2 à usage thérapeutique, comprenant, par exemple une métalloporphyrine (I) reliée à
un intercalant tel que la 9-méthoxy-ellipticine, ce qui permet de disposer de molécules ayant l'activité biologique de chacun des deux composants.
Les exemples suivants illustrent l'invention.
Les spectres de résonance magnétique nucléaire ont été obtenus sur un appareil Bruker 250 WMFT. Les spectres de masse ont été obtenus soit sur un appareil Ribermag R1010 pour les spectres en DCI (NH3), Varian Mat 311A en désorption de champ ou ZAB pour les spectres en FAB et les spectres UV-visible sur un appareil Varian-Cary 2300.
EXEMPLE 1: Pentaacétate de 5-(4-aminophényl)-10, 15, 20-tris(N-rnéthyl-4-pyridyl)-porphyrine de manganèse (Ill) et dérivés apparentés.
a) 5-(4-nitro-phényl)-10, 15, 20-tris(4-pyridyl)-porphyrine Un mélange de 3 g (0,020 mole, 1,75 eq.) de nitro-4-phényl carboxaldéhyde dans 158 ml d'acide propionique et 8 ml d'anhydride acétique est chauffé à
110~C sous agitation. A cette solution, on ajoute lentement 3,2 ml (0,034 mole, 3 eq.) de pyridine-4-carboxaldéhyde puis 3,1 ml (0,045 mole, 4 eq.) de pyrrole et on porte le mélange au reflux pendant 1 h 30. Revenu à la température ambiante, le mélange est évaporé à sec neutralisé avec une solution aqueuse d'ammoniaque.
Après filtration, le précipité est lavé plusieurs fois avec du dichlorométhane. La 20 phase organique est ensuite concentrée puis purifiée sur une colonne de silice sèche (éluant: dichlorométhane puis dichlorométhane/éthanol: 95/5). Produit isolé = 0,526 9; Rdt = 7,1 %.
CCM: Rf = 0,51 (éluant: CH2CI2/EtOH 95/5).
.,A i ~33632 UV-visible (CHCI3) ~ 640 (1.1 x 103); 586 (2.0 x 103); 546 (2.8 x 103); 512 (6,7 x 103); 418 (1.6 x 105) (bande de Soret).
RMN 1 H (CDCI3); ~: 9,06 (d, 6H, J = 5,9 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,87 (m, 6H,,~-pyrrole); 8,81 (d, 2H, J = 4,9 Hz, ,~-pyrrole);;8,66 (d, 2H, J = 8,60 Hz, 5 protons 2,6-nitro-4-phényl); 8,38 (d, 2H, J = 8,60 Hz, protons 3,5-nitro-4-phényl); 8,15 (d, 6H, J = 5,9 Hz protons 3,5-pyridine); -2,89 (s, 2H, NH pyrrole).
Analyse: (dans les calculs, on a considéré qu'il y avait une molécule d'eau de solvatation), C4,H26NgO2~ H20-C H N
Calculé % 72,34 4,15 16,46 Trouvé % 72,87 4,06 16,93 b) 5-(4-amino-phényl)- 10,1 5 , 20-tris(4-pyridyl)-porphyrine A 0,252 9 (0,38 mmole) de la porphyrine (a) dans 18 ml d'acide 15 chlorhydrique 6N, on ajoute 0,672 9 (3 mmoles, 8 eq.) de chlorure stanneux dihydraté et on laisse le mélange sous agitation à température ambiante pendant 15 h. Le mélange est ensuite neutralisé avec de la soude 1 N puis extrait au dichlorométhane. La phase organique est lavée à l'eau puis séchée sur sulfate demagnésium. Le solvant est évaporé à sec. Le résidu repris dans du 20 dichlorométhane est précipité par l'addition de l'hexane (CH2CI2/hexane: 1/10) puis filtré et séché sous vide.
Produit isolé = 0,21 9: Rdt = 87 %.
CCM: Rf = 0,23 (éluant :CH2CI2/EtOH 95/5) UV-visible (CHCI3) ~ ): 652 (3,0 x 103); 590 (3,2 x 103); 554 (4,5 x 103); 516 25 (7,8 x 103); 420 (8,8 x 104) (bande de Soret).
Masse (DCI): M+ = 633 et (FD): M+-H =632 RMN 'H (DMSOd6 à 303 K) ~: 9,15 (d, 6H, J = 5,50 Hz, p-2,6 pyridine); 8,98 (m, 8H, ,~-pyrrole); 8,36 (d, 6H, ~,A i 33360~
J = 5,50 Hz, p-3,5-pyridine); 7,99 (d, 2H, J = 8,20 Hz, p-2,6-amino-4- phényl);
7,14 (d, 2H, J = 8,20 Hz, p-3,5-amino-4-phényl); 5,87 (s, 2H, NH2);-2,80 (s, 2H, NH pyrrole).
c) 5-(4-benzoyl-amino-phényl)-10,15,20-tris-(4-pyridyl)-porphyrine 5 0,010 ml (0,086 mmole, 1,8 eq.) de chlorure de benzoyle est ajouté goutte à
goutte à une solution de 0,030 g (0,047 mmole) de la porphyrine (b) dans 3 ml depyridine anhydre maintenue dans un bain de glace. Le mélange est agité pendant 1 h à 0~C. Au bout de ce temps, le solvant est évaporé à sec et le résidu est repris dans du dichlorométhane. Cette solution est lavée à l'eau distillée, avec de 10 la soude à 5% puis à l'eau distillée. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium puis évaporée à sec. Le résidu est séché sous vide.
Produit isolé = 0,025 9; Rdt=71 %.
RMN 'H (DMSOd6 à 297 K) ~ 10,72 (s, 1H, NH); 8,96 (d,6H, J = 5,3 Hz, protons

2,6 pyridine); 8,93 (d, 2H, J = 4,7 Hz"B-pyrrole); 8,83 (s, 4H, ,~-pyrrole); 8,82 (d, 2H, J = 4,7 Hz, ,~-pyrrole); 8,22 (m, 10H, protons 3,5 pyridine et phényl); 8,11(d, 2H, J = 8,0 Hz, protons 2,6 amino-4-phényl); 7,65 (m, 3H, protons 3,5 amino-4-phényl et phényl-para); -2,85 (s, 2H, NH pyrrole).
d) Pentaacétate de 5-~4-amino-phényl)-10, 15, 20-tris(N-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine de manganèse(lll).
A 0,030 9 (0,05 mmole de porphyrine (c) dans 3 ml de DMF, on ajoute 0,062 ml (0,047 mmole, 10 eq.) de 2,4,6 collidine puis 0,047 mmole (10 eq.) de sel de manganèse, de fer, de zinc ou de nickel. Le mélange est porté au reflux pendant 3 heures puis on le laisse sous agitation à température ambiante pendant15 heures. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est lavé à l'eau puis, purifié
25 sur une colonne sèche d'alumine neutre (éluant: dichlorométhane puis dichlorométhane/éthanol). A la métalloporphyrine ainsi obtenue dans 3 ml de DMF, on ajoute l'iodure de méthyle (10 eq.) et le mélange est agité à la température ambiante pendant 15 heures. Le mélange est ensuite évaporé à sec.
La déprotection du groupement amine se fait par addition d'une solution 30 d'ammoniaque 9 M. Le mélange est alors agité à 70~C pendant 3h puis 15h à
température ambiante. Au bout de ce temps, le mélange est évaporé à sec puis traité à l'acide chlorhydrique 6M, évaporé à sec et repris dans du méthanol.
vA, ~33~02 L'addition de résine essorée d'échangeurs d'ions de type Amberlite IRN 78 sous forme acétate (4 eq.) à cette solution suivie d'une agitation de 3 heures à la température ambiante permet, après filtration puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate du titre. Le produit est ensuite purifié par trituration avec de 5 I'éther.
On a obtenu de la même manière le dérivé de fer, de zinc et de nickel correspondant en remplaçant l'acétate de manganèse (Mn(CH3CO0)2,4H20) respectivement par FeCI2, 4H20; Zn(CH3CO0)2, 2H20 ou NiCI2, 6H20 (10 eq.
chaque fois). Rendements de 60 à 70%.
Dérivé du manganèse: UV-visible (H20 à 7,73 x 10-6M) ,1 (~) 596 (3,9 x 103);
554 (8,6 x 103); 464 (7,5 x 103).
Dérivé du zinc: UV-visible (H20 à 23,9 x 10-6 M) ~ ) 606 (2,5 x 103) 562 (5,0 x 103) 432 (5,8 x 104).
Dérivé du nickel: UV-visible (H20 à 14,3 x 10-6 M) ,1 (~) 568 (4,9 x 103) 530 15 (1,0 x 104) 417 (1,1 x 105).
e) Variante de préparation du triacétate de 5-~4-amino-phénylJ- 10, 15,20-trisrN-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine par méthylation de la porphyrine ~a) suivie d'une réduction de la fonction nitro.
A 0,016 9 (0,024 mmole) de porphyrine (a) dans 20 ml de DMF, on ajoute un 20 large excès d'iodure de méthyle (1 ml). Le mélange est agité à 40~C pendant 2 h puis le solvant est évaporé à sec. Le résidu est repris dans 3 ml d'acide chlorhydrique 6N. Après addition du chlorure stanneux dihydraté, l'agitation estmaintenue à température ambiante pendante 15 h. Le solvant est ensuite évaporé
à sec. Le résidu est repris dans du méthanol.
L'addition de résine essorée d'échangeurs d'ions de type AmberliteTM IRN 78, sous forme acétate (4 eq.) à cette solution, suivie d'une agitation de 3 h à la température ambiante, permet, après filtration puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate correspondant. Le résidu est repris dans de l'eau et après un passage sur une colonne LH20, la porphyrine est purifiée.
30 Rdt = 83%.
RMN 'H(CD3COOD) ~ 9,51 (m, 6H, protons 2,6 pyridine); 9,04 (m large, 14H,13-pyrrole et protons 3,5 pyridine); 8,35 (m, 2H, protons 2,6 amino-4-phényl); 7,80 (m, 2H, protons 3,5 amino-4-phényl); 4,92 (m, 9H, N-méthyl-4-pyridyl) .
Sa formule développée (M = Mn, X = CH3COO) est représentée sur la figure annexée.
"h i 333602 f) lodure de 5-(4-triméthyl-amino-phényl)- -10, 15, 20-tris(N-méthyl-4-pyridyl) porphyrine A 0,014 g (0,02 mmole) de porphyrine (b) dans 4 ml de DMF, on ajoute goutte à goutte 0,014 ml (0,2 mmole, 10 eq.) d'iodure de méthyle et on porte le 5 mélange au reflux pendant 3 heures. La solution est ensuite agitée à la température ambiante pendant 15 heures puis le solvant est évaporé à sec. Le résidu est trituré avec du dichlorométhane, du méthanol puis de l'acétone. Aprèsfiltration, le produit est séché sous vide. Produitisolé = 0,019 g; Rdt = 83%.
UV-visible (MeOH/AcOH): 99/1) ~ ): 655 (1,3 x 103); 590 (4 x 103); 560 (4 x 1 0 1 03) ; 5 1 5 ( 1 , 3 x 1 o4) ; 42 1 (7 ,0 x 1 o4) (bande de Soret) .
Masse (FD): m/e = 660 RMN'H (DMSO-d6 à 303 K) ~: 9,60 (d, 6H, J = 5,9 Hz, p-2,6-pyridine); 9,27 (m, 8H, 13-pyrrole); 9,13 (d, 6H, J = 5,9 Hz, p-3,5-pyridine); 8,18 (d, 2H, J = 8,6 Hz, p-2,6-amino-4-phényl); 7,34 (d, 2H, J = 8,6 Hz, p-3,5-amino-4-phényl); 4,86 15 (s large, 9H, N-méthyl-4-pyridyl), 3,46 (s large, 9H, N(CH3)3; -2,73 (s. NH pyrrole).
g) Pentaacétate de 5-(4-trimethyl-amino-phényl)-10, 15, 20-tris (N-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine de manganèse (Ill) A 0,053 g (0,05 mmole) de iodure de porphyrine (f) dans 4 ml de DMF, on ajoute 0,062 ml (0,047 mmole, 10 eq.) de 2,4,6-collidine puis 0,047 mmole (10 20 eq.) d'acétate de manganèse, Mn (CH3CO0)2,4H20. Le mélange est porté au reflux pendant 3 heures puis on le laisse sous agitation à température ambiante pendant 15 heures. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est lavé à l'eau puis repris dans du méthanol. L'ad-~A i ~33602 dition de résine essorée d'échangeurs d'ions de type Amberlite IRN 78 sous formeacétate (4 eq.) à cette solution suivie d'une agitation de 3 heures à la température ambiante permet, après filtration puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate du titre. Le produit est ensuite purifié par précipitation dans un mélange 5 méthanol/acétone. Rdt = 80%. P.F. supérieure à 240~C.
h) Variante de préparation par inversion des étapes f) et g) précédentes.
A 0,030 9 (0,05 mmole de porphyrine (c) déprotégée dans 3 ml de DMF, on ajoute 0,062 ml (0,047 mmole, 10 eq.) de 2, 4, 6 collidine puis 0,047 mmole (10 10 eq.) de sel de manganèse, (Mn CH3C00)2,4H20, de fer ou de zinc. Le mélange est porté au reflux pendant 3 heures puis on le laisse sous agitation à température ambiante pendant 15 heures. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est lavé àl'eau puis, purifié sur une colonne sèche d'alumineneutre (éluant:
dichlorométhane puis dichlorométhane/éthanol). A la métalloporphyrine ainsi 15 obtenue dans 3 ml de DMF, on ajoute l'iodure de méthyle (10 eq) et on porte le mélange au reflux pendant 4 heures puis, on le laisse agiter à la température ambiante pendant 15 heures. Le mélange est ensuite évaporé à sec puis repris dans du méthanol. L'addition de résine essorée d'échangeurs d'ions de type Amberlite IRN 78 sous forme acétate (4 eq) à cette solution suivie d'une agitation 20 de 3 heures à la température ambiante permet, après filtration puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate du titre. Le produit est ensuite purifié par précipitation dans un mélange méthanol/acétone. Rdt = 82 %.
~h i ~33602 On a obtenu de la même manière le dérivé de fer et de zinc correspondant en remplaçant l'acétate de manganèse respectivement par FeCI2 ~ 4H20 ou Zn(CH3CO0)2 ~ 2H20 (10 éq. chaque fois).
EXEMPLE 2: Dérivés hydroxyphényliques de porphyrine.
i) 5-~4-hydroxyphényl)-10,15,20-tris(4-pyridyl)-porphyrine Un mélange de 3,19 9 (0,026 mole; 1,75 eq) de hydroxy-4-phenylcarboxaldéhyde dans 205 ml d'acide propionique et 10 ml d'anhydride acétique est chauffé à 1 1 0~C sous agitation. A cette solution, on ajoute lentement 4,27 ml (0,045 mole; 3 eq) de pyridine-4-carboxaldéhyde, puis 4,13 ml (0,06 mole; 4 eq) de pyrrole et on porte le mélange au reflux pendant 1 h 30.
Revenu à la température ambiante, le mélange est évaporé à sec et neutralisé avec une solution aqueuse d'ammoniaque. Après filtration, le précipité est lavé
plusieurs fois avec du dichlorométhane. La phase organique est ensuite concentrée puis purifiée sur une colonne de silice sèche (éluant:
dichlorométhane/éthanol 95/5). Produit isolé = 0,52 9; Rdt = 5,5%; ccm:
Rf=0,14 (éluant: CH2CI2/éthanol,95/5).
UV-visible (CHCI3 à 7,2 x 10-6M) ~ ) 642 (3,2 x 103); 587 (7,9 x 103); 545 (9,4 x 103); 511 (2,8 x 104); 416 (5,1 x 105) (bande de Soret).
RMN1H(CDCI3 à 294 K) ~ 9,04 (D, 6h, J = 5,2 Hz, protons 2,6-pyridine);
8,95 (d, 2H, J = 4,8 Hz, 13-pyrrole); 8,86 (m, 6H, 13-pyrrole); 8,20 (d, 2H, J =8,3 Hz, protons 2,6-phénoxy-4); 8,16 (d, 6H, J = 5,5 Hz, protons 3,5- pyridine);
7,52 (d, 2H, J = 8,3 Hz, protons 3,5-phénoxy-4); 2,80 (q , 2H, J = 7,5 Hz, CH2CH3); 2,50 (m, 2H, OH); 1,42 (t, 3H, J = 7,5 Hz, CH3CH2); -2,89 (s, 2H, NH
pyrrole) .
Analyse: dans les calculs, on a considéré également une molécule d'éthanol de solvatation, C4,H27N70, EtOH.
Calculé %: C, 75,96; H, 4,97; N, 14,43.
Trouvé %: C, 76,08; H, 4,77; N, 13,09.
j) Cis- 5, 1 0-bis ~4-h ydrox y-phén yl) - 15, 20-bis ~4-p yrid yl) -porph yrineLors de la purification sur colonne de silice sèchedu mélange réactionnel du paragraphe précédent nous obtenons également la cis-5,10-bis(4-hydroxy-phenyl)-1 5, 20-bis(4-pyridyl)-porphyrine (éluant: CH2CI2/EtOH, 97, 5/2, 5) : produit isolé
0,74 9; Rdt = 7,7 %; ccm: Rf = 0,21 (éluant: CH2CI2/EtOH, 95/5).
UV-visible (dans CHCI3 à 7,2 x 10-6M) ~ ) 642 (2,1 x 103); 586 (4,4 x 103);
546 (5,8 x 103); 512 (1,5 x 104); 415 (3 x 105) (bande de Soret).
RMN1H(CDCI3) ~ 9,03 (d, 4H, J = 5,8 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,94 (d, 2H, J = 4,9 Hz, 13-pyrrole); 8,91 (s, 2H, 13-pyrrole); 8,84 (s, 2H, 13- pyrrole); 8,81 (d, 2H, J = 4,9 Hz, 13-pyrrole); 8,20 (d, 4H, J = 8,5 Hz, protons 2,6-phénoxy- 4);
8,17 (d, 4H, J = 5,8 Hz, protons, v~ 1 ~33602

3,5-pyridine); 7,51 (d, 4H, J = 8,5 Hz, protons 3,5-phénoxy-4); 2,80 (q, 2H, J =7,5 Hz,CH2CH3); 1,42 (t, 3H, J = 7,5 Hz, CH3CH2); -2,88 (s, 2H, NH pyrrole).
Analyse: dans les calculs, on a considéré qu'il y avait 1,75 molécules d'éthanol de solvatation, C42H28N602,1,75 EtOH.
Calculé %: C, 74,95; H, 5,28; N, 11,53.
Trouvé %: C, 74,33; H, 4,99; N, 11,23.
k) 5-r4-pyridyl)- 10,15,20-trisr4-hydroxy-phényl)-porphyrine De la même manière que précédemment, nous obtenons la 5-(4-pyridyl)-10,15,20-tris(4-hydroxy-phényl)-porphyrine(éluant: dichlorométhane). Produit isolé = 0,62 9; Rdt = 6,3 %; ccm: Rf = 0,31 (éluant: CH2CI2/EtOH 95/5).
UV-visible (dans CHCI3 à 1,2 x 10-5M) ~ ) 642 (2,6 x 103); 587 (4,4 x 103);
548 (5,5 x 103); 512 (1,3 x 104); 416 (3,3 x 105) (bande de Soret).
RMN'H(CDCI3) ~ 9,02 (d, 2H, J = 5,9 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,91 (d, 2H, J = 4,9 Hz, 13-pyrrole); 8,89 (s, 4H, 13-pyrrole); 8,79 (d, 2H, J = 4,9 Hz, 13-pyrrole); 8,20 (d, 6H, J = 8,4 Hz, protons 2,6-phénoxy-4); 8,16 (d, 2H, J =
5,9 Hz, protons 3,5-pyridine); 7,51 (d, 6H, J = 8,4 Hz, protons 3,5-phénoxy-4);
2,79 (q, 2H, J = 7,5 Hz CH2CH3); 1,58 (m, 6H, OH); 1,42 (t, 3H, J = 7,5 Hz, CH3CH2); -2,86 (s, 2H, NH pyrrole).
Analyse: dans les calculs, on a considéré qu'il y avait deux molécules d'éthanol de solvatation, C43H29N503, 2EtOH.
Calculé %: C, 74,67; H, 5,47; N, 9,27.
Trouvé %: C, 74,49; H, 5,06; N, 8,45.
I) Acétate de 5-r4-hydroxyphényl)- 10, 15,20-trisf4-pyridyl)-porphyrine de manganèse.
La réaction de métallation s'effectue selon le même mode opératoire décrit pour la porphyrine (g) de l'exemple 1.
Masse (FAB+): m/e 687(M+) m) Triacétate de 5-r4-hydroxyphényl)- 10, 15,20-trisrN-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine.
La méthylation de la porphyrine de l'exemple (i) par l'iodure de méthyle dans du DMF suivie d'une réaction d'échange d'ions iodure en acétate se fait selon la35 méthode décrite dans l'exemple (f), (Rdt = 88 %).RMN1H(CD3COOD) ~ 9,46 (m, 6H, protons 2,6-pyridine); 9,35 (m, 2H 13-pyrrole); 9,14 (m, 4H, R-pyrrole); 8,99 (m, 6H, protons 3,5-pyridine); 8,71 (m, 2H, 13-pyrrole); 8,15 (d, 2H, J = 7,6 Hz, protons 2,6-phénoxy-4); 7,56 (d, 2H, J =
7,6 Hz, protons 3,5-phénoxy-4); 4,91 (s large, 9H, N-Me).
u A l 3 3 3 602 n) Tétraacétate de 5-(4-hydroxyphénylJ- 10, 15,20-tris(N-méthyl-4-pyridylJ-porphyrine de manganèse (IIIJ.
La métallation de la porphyrine (i) avec de l'acétate de manganèse suivie d'une réaction de méthylation par l'iodure de méthyle se font dans les mêmes 5 conditions que pour l'exemple' (h) et aprés l'échange des contre-ions iodure en acétate sur une résine échangeuse d'ions, on obtient le produit attendu.
Produit isolé = 0,018 9; Rdt = 76%.
UV-visible (dans H20 à 6,1 x 10-6M) ~ ) 600(2,9 x 103); 560 (6,6 x 103);
464 (7,3 x 104) (bande de Soret).
10 EXEMPLE 3: Dérivés amino-propyloxyphényliques de porphyrine.
oJ 5-[4-(3-amino-propyloxyJ-phénylJ- 10, 15,20-tris(4-pyridylJ-porphyrine.
A une solution de 0,051 9 (0,8 mmole) de la porphyrine de l'exemple (i) dans 3 ml de DMF sont ajoutés à température ambiante 0,65 9 (16,4 mmole; 20,5 eq.) de soude pilée. La couleur de la solution passe de violet au vert et le mélange est 15 agité pendant 15 minutes. 0,017 9 (0,88 mmole; 1,1 eq) de bromohydrate de bromo-3-propylamine sont ajoutés à cette solution et l'agitation est maintenue pendant 3 h. L'avancement de la réaction est suivie par ccm (plaque de silice;
éluant: CH2CI2/EtOH, 50/50). Au bout de ce temps, 0,017 9 de bromohydrate de bromo-3-propylamine sont rajoutés et le mélange est encore agité pendant 2 h.
20 On ajoute alors 2 ml de méthanol et 5 ml d'eau distillée au mélange réactionnel.
La solution obtenue est extraite au dichlorométhane. La phase organique est lavée à l'eau distillée (2 fois), séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec. Le produit est purifié par chromatographie sur colonne sèche d'alumine basique (éluant: méthanol/acide acétique 80/20); produit isolé = 0,095 9; Rdt = 85 %.
25 ccm: Rf=0,29 (éluant: CH2CI2/EtOH, 80/20 avec 1 % de NH40H).
UV-visible (dans MeOH à 1,33 x 10-5M) ~ ) 642 (1,6 x 103); 583 (3,1 x 103); 544 (3,8 x 103); 510 (9,8 x 103); 412 (1,8 x 105) (bande de Soret).
RMN'H(MeOHd4 à 294 K) ~ 8,98 (d, 6H, J = 5,5 Hz, protons 2,6-pyridine);
8,97 (m, 8H, I~-pyrrole); 8,25 (d, 6H, J = 5,5 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,18 (d, 30 2H, J = 8,5 Hz, protons 2,6-phenoxy-4); 7,47 (d, 2H, J = 8,5 Hz, protons 3,5-phenoxy-4); 5.0 (m, 2H, NH2); 4,53 (t, 2H, J = 5,6 Hz, OCH2); 3,4 (m, 2H, CH2N); 2,45 (quintuplet, 2H, J = 5,5 Hz, CH2).
Masse (DCI/NH3): m/e = 692 (M+ + H); fragments: 634 (M+ - (CH2)3NH2).
pJ Cis-5, 10-bis[4-(3-amino-propyloxy)-phenyl~- 15,20-bis(4-pyridyl)-35 porphyrine.
En poursuivant le même mode opératoire que celui décrit dans l'exemple (o)mais à partir de la porphyrine (j), nous obtenons la porphyrine dipyridyle porteuse de 2 bras en position cis.
Produit isolé = 0,066 9; Rdt = 79 %; ccm: Rf = O (éluant: CH2CI2/EtOH, 40 80/20).
UV-visible (dans MeOH/CHCI3,95/5 à 9,2 x 10-6M) ~ ) 644 (2,2 x 103); 588 (3,3 x 103); 548 (4,9 x 103); 512 (9,2 x 103); 414 (1,8 x 107) (bande de Soret).

RMN 1H (CDC13) ~ 9,01 (d, 4H, J = 5,8 Hz, protons 2,6-pyridine) 8,92 (d, 2H, J = 4,9 Hz, ~-pyrrole);
8,89 (s, 2H, ~-pyrrole); 8,81 (s, 2H, ~-pyrrole); 8,77 (d, 2H, J = 4,g Hz, ~-pyrrole); 8,14 (d, 4H, J = 5,8 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,08 (d, 4H, J = 8,4 Hz, protons 2,6-phenoxy-4); 7,27 (d, 4H, J = 8,4 Hz, protons 3,5-phenoxy-4); 4,32 (t, 4H, J = 5,9 Hz, OCH2); 3,08 (t, 4H, J = 6,0 Hz, CH2N); 2,32 (m, 4H, CH2); -2,84 (s, 2H, NH pyrrole).
Masse (DCI) : m/e 765 (M++2); fragments à 707 et 649.
Analyse : dans les calculs, on a considéré qu'il y avait 3 molécules d'éthanol de solvatation, C48H42N8~2~ 2,5 EtOH-Calculé % : C, 72,48; H, 6,55; N, 12,76.
Trouvé % : C, 72,00; H, 6,67; N, 12,44.
q) Tétraacétate de 5-[4-(N-triméthyl-3-aminopropyloxy)phényl]-10,15,20-tris(N-méthyl-4-pyri-dyl)-porphyrine.
La méthylation de la porphyrine (i) par la méthode déjà décrite dans l'exemple (lf) suivie d'un échange des contre-ions iodure en acétate conduit au produit correspondant; Rdt = 85%.
W -visible (dans H2O à 4,4 x 10 6M) ~ (~) 640 (1,8 x 103); 580 (6,4 x 103); 556 (6,6 x 103); 518 (1,3 x 104); 422 (1,9 x 105) (bande de Soret).
RMN 1H (CD3COOD) ~ 9,48 (d, 6H, J = 5,8 Hz, protons 2,6-pyridine); 9,17 (s large, 6H, ~-pyrrole);
9,08 (d, 2H, J = 4,8 Hz, ~-pyrrole); 9,00 (d, 6H, J =
5,8 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,27 (d, 2H, J = 8,3 Hz, protons 2,6-phényl); 7,51 (d, 2H, J = 8,3 Hz, protons 3,5-phényl); 4,91 (s large, 9H, N-Me-4-pyri-dyl); 4,53 (m, 2H, OCH2); 3,87 (m, 2H, NCH2); 3,41 (s, 9H, -NMe3); 2,63 (m, 2H, -CH2-).
X
15a 13336~
r) Pentaacétate de cis-5,10-bis[4-N-tri-méthyl-3-aminopropyloxy)phényl]-15,20-bis(N-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine de manganèse (III).
En suivant le même mode opératoire que pour l'exemple (lh), nous obtenons à partir du composé (j) la porphyrine métallée avec le manganèse et méthylée sur les noyaux pyridiniques et portant deux bras 3-triméthylaminopropyloxy- en para des noyaux phényle.
Produit isolé = 0,015 g; Rdt = 65~.
W-visible (dans H2O à 9,3 x 10 6M) ~ (~) 600 (6,9 x 103); 564 (1,1 x 104); 467 (8,7 x 104) (bande de Soret).
EXEMPLE 4 : Dérivés (amino-butyryl)aminophénylique de porphyrine.
s) 5-[4-(N-Boc-aminobutyryl)aminophényl]-10,15,20-tris(4-pyridyl)-porphyrine.
Afin de synthétiser ce dérivé, un amino-acide du type N-Boc-(CH2)n-COOH est à préparer selon la méthode décrite dans le paragraphe suivant, ici n = 3.
X.-16 v 1~ 1 ~3 3632 -- Acide N-Boc-4-aminobutyrique:
A une suspension de 0,4 g (0,004 mole) d'acide 4-amino-butyrique, de 0,155 9 (0,004 mole, 1 eq.) d'oxyde de magnésium et de 4 ml de soude 1 M dans un mélange dioxane/eau (611), sont ajoutés lentement 0,96 9 (0,0044 mole,1,1 eq.) 5 de dicarbonate de di-tert-butyle. Le mélange est agité pendant 20 h à température ambiante. Après filtration, le résidu est lavé à l'eau. Le filtrat est concentré, puis on ajoute l'eau. Après un lavage à l'éther, la phase aqueuse est acidifiée jusqu'à
pH = 2-3 avec de l'acide acétique à 10 % puis extraite à l'acétate d'éthyle. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec. L'huile 10 orange obtenue est triturée avec l'hexane puis séchée sous vide à 60~C. Le produit obtenue est sous forme de solide blanc.
Produit isolé = 0,716 9; Rdt = 90 %.
IR (pastille KBr) v (cm~1) 3343(NH et COOH); 1689 (large; COOH et COOtBu).
Masse (DCI): m/e = 204 (M+ + 1); 221 (M+ + 18).
RMN'H(CDC13) ~ 11,34 (m, 1 H, COOH); 3,14 (t dédoublé, 2H, J = 6,75 Hz, CH2N); 2,36 (t, 2H, J = 6,8 Hz, CH2CO); 1,79 (quintuplet, 2H, J = 6,8 Hz,-CH2-); 1,41 (s, 9H, tBu).
A l'aide de ce dérivé, la porphyrine (s) peut se préparer de la facon suivante:
A 0,063 9 (0,31 mmole, 3,1 eq.) d'acide N-Boc-4-aminobutyrique dans 6 ml 20 de dichlorométhane anhydre, maintenue dans un bain de glace, on ajoute 0,050 ml (0,36 mmole; 4 eq.) de triéthylamine, puis 0,029 ml (0,3 mmole; 3,3 eq.) de chloroformiate d'éthyle et on laisse le mélange agiter à 0~C pendant 30 mn. Le mélange est ensuite évaporé à sec, puis repris dans 6 ml de dichlorométhane sec et refroidi dans un bain de glace. On ajoute 0,050 ml (0,36 mmole) de 25 triéthylamine, puis 0,066 9 (0,1 mmole) de la porphyrine de l'exemple (1 b).
Le mélange est agité à 0~C pendant 1h, puis 2 h à température ambiante. Le solvant est ensuite évaporé à sec et le résidu est lavé abondamment à l'eau distillée.
Le résidu est repris dans du dichlorométhane. Cette solution est lavée avec 30 du bicarbonate de sodium à 5 % (2 fois), puis à l'eau distillée (3 fois). La phase organique est séchée sur sulfate de sodium puis évaporée à sec. Le produit obtenu est presque pur, cependant, une purification sur une colonne sèche d'alumine permet l'obtention d'un produit très pur (éluant: CH2CI2/EtOH, 99,5/0,5). Produit isolé = 0,066 g; Rdt = 77%.
Masse (FAB+): m/e = 819 (M++1); fragments: 763 (M-tBu); 719 (M-COOtBu); 633 (M-C(CH2)3NHCOOtBu).
UV-visible (dans CHCI3 à 2,04 x 10-6M) ,1 (~) 642 (2,9 x 104); 586 (5,2 x 104); 548 (6,8 x 104); 512 (1,6 x 105); 418 (1,6 x 106) (bande de Soret).
IR (pastille KBr)v(cm~1): 3319(NH); 1689(C =0); 1593(Ar).
RMN1H(CDCI3) ~ 9,04 (m, 6H, protons 2,6-pyridine); 8,97 (d, 2H, J = 4,9 Hz,13-pyrrole); 8,84 (s, 4H,13-pyrrole); 8,81 (d, 2H, J = 4,9 Hz,13-pyrrole); 8,16 (d, 6H, J = 5,9 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,08 (m, 4H, protons phenoxy)4); 4,27(m, 2H, CH2N); 2,57 (t, 2H, J = 6,5 Hz, CH2C=O); 2,02 (m, 2H, -CH2-); 1,53 (s, 9H, tBu); -2,90 (s, 2H, NH pyrrole).
Jk i ~33602 t) Acétate de 5-[4-(N-Boc-aminobutyryl)aminophenyll- 10, 15,20-tris-~4-pyridyl)-porphyrine de manganèse (Ill).
La métallation de la porphyrine de l'exemple (s) avec de l'acétate de manganèse dans du DMF selon la méthode déjà décrite dans l'exemple (19) permet 5 d'obtenir la porphyrine de manganèse attendue.
Produit isolé: m = 0,024 9; Rdt = 70 %.
UV-visible (dans CHCI3 à 2,15 x 10-6) ~ ) 613 (6,7 x 104); 578 (7,4 x 104);
475 (8,9 x 105) (bande de Soret).
u) 5-[4-~aminobutyry)aminophenyl~- 10, 15,20-tris~4-pyridyl)-porphyrine Une solution de 0,027 g (0,03 mmole) de la porphyrine (s) dans 14 ml d'une solution à 25 % d'acide trifluoroacétique dans le dichlorométhane est agitée pendant 1 h à température ambiante. Le solvant est ensuite évaporé à sec. Au résidu obtenu est ajouté un large excès d'éther anhydre et une forte agitation est maintenue jusqu'à formation d'une précipité abondant. Après filtration, le précipité
15 est dissous dans l'eau, puis neutralisé avec du bicarbonate de sodium à 5%. La phase aqueuse ainsi obtenue est extraite au dichlorométhane (3 fois). Les phasesorganiques sont rassemblées, séchées sur sulfate demagnésium, puis évaporées à
sec. Le produit est purifié par une précipitation à l'aide d'un mélange dichlorométhane/hexane .
Produit isolé = 0,020 9; Rdt = 84 %;
UV-visible (dans CHCI3 à 3,62 x 10-6M) ~ ) 645 (1,1 x 104); 588 (1,7 x 104); 548 (2,2 x 104); 513 (3,3 x 104); 419 (6,5 x 105) (bande de Soret).
IR (lames CaF2)n(cm~') 3200 (NH large); 1629(C=0 large).
Masse (FAB+): m/e 719 (M+1)+
RMN 'H(CDCI3) ~ 9,03 (d, 6H, J = 5,1 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,83 (m, 8H, R-pyrrole); 8,15 (d, 6H, J = 5,1 Hz protons 3,5-pyridine); 7,97 (d, 2H, J =
8,1 Hz, protons 2,6-amino-4-phenyl); 7,08 (d, 2H, J = 8,1 Hz, protons 3,5-amino-4-phenyl); 3,24 (m, 2H, CH2N); 2,03 (m, 4H, CH2C=0 et-CH2); -2,90 (m, 2H, NH pyrrole).
v) Pentaacétatede5-[4-~triméthylaminobutyryl)aminophényl~-10,15,20-tris~N-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine de manganèse ~Ill).
La métallation de la porphyrine (u) avec de l'acétate de manganèse dans le DMF suivie d'une méthylation avec de l'iodure de méthyle dans le DMF (selon la 35 méthode déjà décrite pour l'exemple (1h) conduit après l'échange de contre- ions idodure en acétate à la métalloporphyrine correspondante.
Produit isolé: 0,021 9; Rdt = 87 %;
UV visible (dans H20 à 3,76 x 10-5M) ,1 (~) 596 (1,3 x 103); 560 (2,8 x 103);
462 (2,8 x 104) (bande de Soret).
Masse (FAB+): m/e 844.
;~A i 333602 EXEMPLE 5: Préparation d'une molécule hybride métalloporphyrine-intercalant.
a) Bromure de N2-(4-éthoxycarbonyl-butyl)-9-méthoxy-ellipticinium.
Un mélange de 9-méthoxy-ellipticine* (0,102 g; 0,37 mmole) et de 5-bromo-5 valérate d'éthyle (0,058 ml; 0,37 mmole; 1 eq.) dans 2 ml de DMF anhydre est chauffé à 120~C sous agitation pendant 4 heures. L'agitation est maintenue pendant la nuit à température ambiante puis, on ajoute de l'éther au mélange.
Après filtration, la poudre orange obtenue est lavée à l'éther puis séchée sous vide. Produit isolé = 0,156 g; Rdt = 87 %.
10 UV-visible (CHCI3) ~ ): 406 (3,9 x 103); 390 (4,15 x 103); 348 (3,4 x 103); 332 (6,5 x 103) RMN 'H (DMS0-d6 à 303 K) ~: 10,11 (s, 1H, H,); 8,57 (d, 1H, J = 7,1 Hz, H3);
8,43 (d, 1H, J = 7,1 Hz, H4); 7,82 (d, 1H, L = 1,9 Hz, H,o); 7,62 (d, 1H, J =
8,8 Hz, H7); 7,33 (dd, 1H, J = 2,2 Hz, 8,7 Hz, H8); 4,83 (t, 2H, J = 7,1 Hz, 15 (CH2),2); 4,16 (q, 2H, J = 7,1 Hz, (CH2),7); 4,02 (s, 3H, CH30); 3,44 (s, 3H,(CH3)"); 2,84 (s, 3H, (CH3)5); 2,53 (t, 2H, J = 7,3Hz, (CH2),5); 2,16 (m, 2H, CH2),3); 1,73 (m, 2H, (CH2),4); 1,28 (t, 3H, J = 7,1 Hz, (CH3),8). Les atomes decarbone du bras ont été numérotés de 12 à 18 en partant de l'azote 2 de la 9-méthoxy-ellipticine (le méthyle de la partie ester ayant le numéro 18).
20 * Ce composé et son activité ont été notamment décrits dans J. Le Men et coll., Rev. Europ. Etud. Clin. et Biol. 1970, XV, 534-538.
b) chlorure de N2-(4-carboxybutyl)-9-méthoxy-ellipticinium 0,148 g (0,3 mmole) d'ester (a) dans 14 ml d'acide chlorhydrique 1N sont chauffés au reflux sous ~A, 333602 agitation pendant 3 heures. L'agitation est maintenue pendant toute la nuit à latempérature ambiante. Le mélange est ensuite évaporé à sec; le résidu est reprisdans du méthanol et on fait précipiter le produit par l'éther sous forme d'une poudre orange. Après filtration, le produit est séché sous vide. Produit isolé =5 0,125 q; Rdt = 99%. La présence d'ions chlorure aété vérifiée par un test avec le nitrate d'argent.
UV-visible (CHCL3/MeOH) ,1 (~): 452 (1,29 x 103); 386 (2,5 x 103); 321 (1,8 x 1 o4) Masse (DCI) =: M+ = 377 Déc. 210~C
10 RMN'H (DMSO-d6 à 303 K) ~: 12,19 (1H, s, COOH); 10,22 (1H, s, H,); 8,65 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H3); 8,59 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H4); 8,05 (d, 1H, J = 2,3 Hz, H,O);
7,73 (d, 1H, J = 8,7 Hz, H7); 7,44 (dd, 1H, J = 8,7 Hz, J = 2,3 Hz, H8); 4,84 (t, 2H, J = 7,0 Hz, (CH2),2); 4,06 (s, 3H, CH3 0); 3,46 (s, 3H, (CH3)"); 3,43 (s, 1 H, NH); 2,97 (s, 3H, (CH3)5); 2,45 (t, 2H, J = 7,4 Hz, (CH2),5); 2,16 (m, 2H, 15 (CH2),3); 1,70 (m, 2H, (CH2)14).
Le chlorure obtenu est dissous dans du méthanol. L'addition de résine essorée d'échangeurs d'ions de type Amberlite IRN 78 sous forme acétate (4 eq.) à cette solution suivie d'une agitation de 3 heures à la température ambiante permet, après filtration puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate 20 correspondant. Le produit est ensuite purifié par précipitation dans un mélange méthanol/éther.
IR (lames NaCI): VcO = 1656 cm~' UV-visible (CH30H) ,1 (~): 385 (5,7 x 103); 318 (5,7 x 104).
En suivant les mêmes procédés de synthèse, nous avons préparé les 25 bromures de N2-(2-éthoxycarbonyl-éthyl)-9-méthoxy-ellipticinium et de N2-(5-éthoxycarbonyl-pentyl)-9-méthoxy-ellipticinium ainsi que leurs homologues porteurs d'une fonction acide;
c) Chlorure de N2-~2-carboxyéthyl)-9-méthoxy-ellipticinium Produit isolé: 0,096 q; Rdt = 98 %.
20 1 3 3 3 6a~
W-visible (dans MeOH à 2,2 x 10 5M) ~ (~) 410 (5,3 x 103); 380 (8,0 x 103); 305 (6,2 x 104); 295 (6,5 x 104); 274 (5,9 x 104).
RMN lH (MeOH-d4) ~ 9,76 (s, lH, Hl); 8,38 (d, lH, J = 7,0 Hz, H3); 8,31 (d, lH, J = 7,0 Hz, H4); 7,78 (d, lH, J = 2,0 Hz, Hlo); 7,54 (d, lH, J = 8,8 Hz, H7); 7,28 (d, lH, J = 8,8 Hz, J = 2,0 Hz, H8); 4,98 (m, lH, (CH2)12); 4,02 (s, 3H, MeO); 3,25 (s, 3H, Mell); 2,84 (m, 2H, (CH2)13); 2,79 (s, 3H, Me5).
d) Chlorure de N2-(5-carboxypentyl)-9-méthoxy-ellipticinium.
Produit isolé = 0,170 g; Rdt = 99~.
UV-visible (dans MeOH à 3,3 x 10 5M) ~ (~) 440 (2,4 x 103); 382 (6,1 x 103); 3,13 (5,5 x 104).
Masse (DCI): M = 391.
RMN lH (DMSO-d6 à 294 K) ~ 2,24 (s, lH, COOH);
10,20 (s, lH, Hl); 8,62 (d, lH, J = 7,0 Hz, H3); 8,56 (d, lH, J = 7,0 Hz, H4); 8,02 (d, lH, J = 2,2 Hz, Hlo); 7,72 (d, lH, J = 8,8 Hz, H7); 7,42 (dd, lH, J =
8,8 Hz, J = 2,2 Hz, H8); 4,81 (t, 2H, J = 7,2 Hz, (CH2)12); 4,05 (s, 3H, MeO); 3,44 (s, 3H, Mell); 2,95 (s, 3H, Me5); 2,36 (t, 2H, J = 7,0 Hz, (CH2)16); 2,13 (m, 2H, (CH2)13); 1,70 (m, 2H, (CH2)15); 1,47 (m, 2H, (CH2)14)- 2 e) Chlorure de 5-{4-[5-(9-méthoxy N -ellip-ticinium)-butyryl amino]-phényl}-10,15,20-tris(4-pyri-dyl)-porphyrine.
A 0,054 g (0,13 mmole; 5,4 eq.) de (b) dans 2 ml de dichlorométhane anhydre, on ajoute 0,023 ml (0,16 mmole; 6,7 eq.) de la triéthylamine puis 0,021 ml (0,22 mmole; 9,1 eq.) de chloroformiate d'éthyle et on laisse le mélange sous agitation à température ambiante pendant 30 mn. Le mélange est ensuite éva-poré à sec puis repris dans 2 ml de dichlorométhane anhydre. On ajoute 0,023 ml (0,16 mmole) de la tri-X
20a 1333602 éthylamine puis 0,015 g (0,024 mmole) de la porphyrine de l'exemple (lb) et on porte le mélange au reflux pendant 4 heures. L'avancement de la réaction est suivi par CCM. On laisse ensuite le mélange revenir à
la température ambiante puis, le solvant est évaporé à
sec. Le résidu repris par le dichlorométhane est purifié sur plaque X
v ~ i ~ 3 3 602 de silice (éluant: EtOH/CH2CI2 20/80) à l'abri de la lumière. Le produit est repris par du méthanol et de l'acide acétique. Le filtrat est évaporé à sec, lavé à l'eau distillée puis séché sous vide. Produit isolé = 0,011 9; Rdt = 45%.
Masse (FD): M+-H = 991.
5 UV-visible (CH30H/AcOH): 99/1) ~ ): 318 (7,6 x 104); 414 (5,2 x 104); 508 (3,7 x 103).
RMN'H (DMSO-d6 à 303 K) ~: 10,32 (s, 1H, H1); 9,16 (d, 6H, J = 5,3 Hz, p-2, 6-pyridine); 9,01 (m, 8H, 13-pyrrole); 8,73 (m, 1 H, H3); 8,67 (m, 1 H, H4); 8,38 (d, 6H, J = 5,3 Hz, p-3, 5-pyridine); 8,21 (m, 4H, amino-4-phényl); 8,09 (s élargi, 10 1H, H10); 7,76 (d, 1H, J = 8,7 Hz, H7); 7,44 (d, élargi, 1H, J = 8,7 Hz, H8); 4,96 (m, 2H (CH2)1z; 4,10 (m, 1H, NH); 4,02 (s, 3H, CH30); 3,53 (s, 3H, Me1,); 3,01 (s, 3H, Me5); 2,34 (m, 2H, (CH2),5; 2,10 (m, 4H, (CH2)13 et ,4); -2,90 (s, 2H, NH
pyrrole) .
f) tétraacétate de 5-{4-[5-(9-méthoxy-N2-ellipticinium)-butyrylamino]phényl}-15 10, 15, 20-tris(N-méthyl-4-pyridyl)porphyrine Le résidu de l'étape (e) précédente est repris dans 3 ml de DMF sec. 0,021 ml (0,34 mmole, 10 eq.) d'iodure de méthyle est ajouté puis, on porte le mélangeau reflux pendant 3 heures. On laisse le mélange sous agitation à la températureambiante pendant 15 heures. Le solvant est ensuite évaporé à sec et le résidu est 20 lavé à l'eau plusieurs fois. Après filtration, le précipité est trituré avec l'acétone puis filtré et séché sous vide. Produit isolé = 0,041 9; Rdt = 76%.
UV-visible (MeOH) ,1 (~): 655 (2,19 x 103); 592 (3,4 x 103); 555 (5,0 x 103); 519 (8,4 x 103); 425 (1,00 x 105); bande de Soret); 318 (5,9 x 104).

L'échange d'ions iodure en acétate s'effectue avec de bons rendements à
partir d'une solution méthanolique de ce produit ajoutée à la résine essorée d'échangeurs d'ions de type Amberlite IRN 78 sous forme acétate. Après 2-3 heures d'agitation à la température ambiante, le mélange est filtré et le solvant 5 évaporé à sec. Le résidu est trituré avec de l'acétone, filtré et séché sous vide (Rdt = 80%).
UV-visible (MeOH) ~ 652 (1,7 x 103); 590 (1,5 x 103); 545 (2,3 x 103); 512 (5,3 x 103); 415 (7,7 x 104), bande de Soret); 318 (2,7 x 104).
Masse (FAB+ dans HCI): 1091.
RMN'H (DMSO-d6 à 296 K) ~: 10,32 (s, 1H, H,); 9,16 (d, 6H, J = 5,1 Hz, p-2, 6-pyridine); 9,00 (m, 8H,13-pyrrole); 8,73 (m, lH, H3); 8,61 (m, 1H, H4); 8,37 (d, 6H, J = 5,1 Hz, p-3, 5-pyridine); 8,24 (s, 4H, amino-4-phényl); 8,03 (s, 1H, Hlo);
7,73 (d, 1 H, J = 8,70 Hz, H7); 7,42 (dd, 1 H, J = 8,70 Hz, J = 2,4 Hz, H8); 4,98 (m, 2H, (CH2),2; 4,01 (s, 3H, OCH3); 3,70 (s, 3H, Me"); 3,48 (s, 9H, CH3); 2,98 (s, 3H, Me5); 2,33 (m, 2H, (CH2),5; 2,13 (m, 4H, (CH2),3 et ,4); 2,03 (s, 3H, CH3CO0-);-2,91 (s, 2H, NH pyrrole).
Cette molécule peut être métallée de la même manière que la prophyrine correspondante selon l'exemple 1 9). On préfère toutefois utiliser la méthode suivante combinant les étape e) et f) du présent exemple.
9) méthode générale de synthèse de métalloporphyrines hydrosolubles liées à
une molécule d'intercalant consistant en la 9-méthoxy-ellipticine.
A 0,070 q (0,17 mmole, 4,8 eq.) de (b) dans 3 ml de dichlorométhane anhydre (ceci est également applicable à (c) et (d), on ajoute 0,037 ml (0,26 mmole; 7,6 eq.) de triéthylamine, puis 0,035 ml (0,37 mmole; 10,6 eq.) de 25 chloroformiate d'éthyle et on ~ i 333~02 laisse le mélange agiter à la température ambiante pendant 30 mn. Le mélange estensuite évaporé à sec, puis repris dans 3 ml de dichlorométhane sec. On ajoute 0,037 ml (0,26 mmole) de triéthylamine, puis 0,022 9 (0,35 mmole) de la prophyrine de l'exemple 1 (b) et on porte le mélange au reflux pendant 4 h. Le 5 mélange est ensuite évaporé à sec, puis repris dans 3 ml de DMF anhydre. 0,050ml (0,38 mmole, 11 eq.) de 2,4,6-collidine, puis 0,39 mmole (11 eq.) de sel de manganèse, de fer ou de zinc (Mn(CH3CO0)2, 4H20; FeCI2, 4H20; Zn(CH3CO0)2, 2H2O) sont ajoutés à la solution. Le mélange est chauffé à 140~C pendant 3h, puis on le laisse agiter à la température ambiante pendant 15h. Le solvant est 10 ensuite évaporé à sec. Le résidu est lavé à l'eau distillée, puis purifié sur une colonne sèche d'alumine neutre (éluant: CH2CI2 puis CH2CI2/MeOH).
La métalloporphyrine ainsi obtenue est reprise dans 3 ml de DMF anhydre.
L'iodure de méthyle (10 eq.) est ajouté à la solution. On porte le mélange au reflux pendant 3h, puis on le laisse agiter pendant 15 h à la température ambiante.
15 Le solvant est évaporé à sec et le résidu repris dans du méthanol. L'addition de résine essorée d'échangeurs d'ions de type Amberlite IRN 78, sous forme acétate (4 eq.) à cette solution, suivie d'une agitation de 3h à la température ambiante, permet, après filtration puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate correspondant. Le résidu est ensuite lavé au dichlorométhane, puis recristalisé
20 dans un mélange méthanol/acétone. Les rendements et les données physico-chimiques des différentes molécules hybrides sont décrits ci-après.
24 1333~
Les rendements et les données physico-chimi-ques des différentes molécules hybrides sont décrits ci-après.
Molécules hybrides "intercalant-métallopor-phyrine" résultant du couplage entre la porphyrine de l'exemple (lb) et l'ellipticinium de l'exemple (5b) (longueur du bras reliant les deux entités est de 7 chaînons); Rdt = 60-80%.
W -visible (H2O) A (~) pour les trois composés hybrides métallés, respectivement les dérivés:
(Mn) : 565 (4,8 x 103); 465 (3,7 x 104) (bande de Soret); 316 (4,7.104).
(Fe) : 430 (2,7 x 104) (bande de Soret); 315 (2,4 x 104).
(Zn) : 615 (5,01 x 103); 570 (9,9.103); 442 (9,5.104) (bande de Soret); 3,15 (6,1 x 104).
Masse (FAB+) : pour (Mn) : 1182 et pour (Fe) :
1183.
Les métalloporphyrines Mn et Fe étant para-magnétiques, nous ne pouvons décrire que le spectre RMN 1H du composé (Zn):
RMN 1H (DMSO-d6 à 303 K) ~ : 10,24 (s, lH, H1);
9,54 (d, 6H, J = 5,2 Hz, p-2,6-pyridine); 9,10 (s, 4H, amino-4-phényl); 9,00 (m, 8H, ~-pyrrole); 8,62 (m, 2H, H3 et H4); 8,20 (m, 6H, p-3,5-pyridine); 8,09 (s élargi, lH, H1o); 7,77 (d, lH, J = 8,7 Hz, H7); 7,45 (d, lH, J = 8,7 Hz, H8); 5,02 (m, 2H, (CH2)12); 4,83 (s large, 9H, N-Me); 4,04 (s, 3H, OCH3); 3,55 (s, 3H, Me11); 3,03 (s, 3H, Me5); 2,34 (m, 2H, (CH2)15); 2,12 ' ' (CH2)13+14); 2~02 (s, 3H, cH3coo-).
X
~A I ~33602 * Molécule hybrides "intercalant-métalloporphyrine " résultant du couplage entre la porphyrine de l'exemple ~1b) et l'ellipticinium de l'exemple ~5d). ~longueur du bras reliant les deux entités est de 8 chaînons).
Pentaacétate de 5-{4-[6-~9-méthoxy-N2-ellipticinium)-pentanoyllamino-phényl}- 10, 15,20-tris-~N-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine de manganèse ~Ill).
Rdt = 79 %
UV-visible (H20 à 1,86 x 10-5M) ,1 (~): 600 (4,3 x 103); 564 (7,4 x 103); 464 (1,6 x 104) (bande de Soret); 314 (5,6 x 104).
Tétraacétate de 5-{4-[6-~9-méthoxy-N2-ellipticinium)-pentanoyllamino-phényl}-10,15,20-tris-~4-pyridyl)-porphyrine de zinc ~Il). -Rdt = 79 %
UV-visible (dans MeOH à 3,0 x 10-6M) ,1 (~): 594 (5,3 x 103); 554 (1,6 x 104);
420 (4,22 x 105) (bande de Soret); 314 (6,3 x 104).
La résolution en RMN étant meilleure, le dérivé non quaternarisé sur les pyridinium est décrit:
RMN 'H (DMSO-d6 à 330 K) ~10,30 (s, 1H, H,); 9,12 (d, 6H, J = 5,00 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,94 (m, 8H, 13-pyrrole); 8,72 (d, 1H, J = 7,10 Hz, H3);
8,62 (d, 1 H, J = 6,85 Hz, H4); 8,32 (d, 6H, J = 5,0 Hz, protons 3,5-pyridine);
8,17 (m, 4H, protons amino-4-phenyl); 8,07 (d, 1H, J = 2,10 Hz, H1o); 7,70 (d, 1 H, J = 8,70 Hz, H7); 7,39 (d, 1 H, J = 8,70 Hz; J = 2,20 Hz, H8); 4,93 (m, 2H,(CH2),2); 3,98 (s, 3H, MeO); 3,52 (s, 3H, Me11); 2,97 (s, 3H, Me5); 2,29 (m, 2H,(CH2),6);manganèse, de fer ou de zinc (Mn(CH3CO0)2, 4H20; FeCI2, 4H20; Zn(CH3CO0)2, la solution. Le mélange est chauffé à 140~C pendant 3h, est CH2CI2 puis CH2CI2/MeOH).
ajouté à la solution. On porte le mélange au Le solvant est évaporé à sec et le résidu repris dans du méthanol. L'addition de e IRN 78, sous forme acétate ion puis évaporation du solvant, d'obtenir l'acétate crits ci-après.
s des différentes molécules hybrides sont décrits t du couplage entre la porphyrine de est de 7 és:
2,4 (Mn) : 1182 et pour (Fe) :
spectre (s, 4H, 77 (d, lH, J = 8,7 Hz, H7); 7,45 (s, 3H, ~A I ~33602 hyrine de l'exemple ~1b) et l'ellipticinium de l'exemple ~5d). ~longueur du bras acétate de 5-{4-[6-~9-méthoxy-N2-ellipticinium)-pentanoyllamino-e ~Ill).
314 (5,6 x 104).
de zinc ~Il). -e de Soret); 314 (6,3 x 104).
(DMSO-d6 à 330 K) ~10,30 (s, 1H, H,); 9,12 (d, 6H, J = 5,00 Hz, ,10 Hz, H3);
,07 (d, 1H, J = 2,10 Hz, H1o); 7,70 (d, 1,95 (m, 4H, (CH2)13 et 15); 1,65 (m, 2H, (CH2)14.
* Molécules hybrides "intercalant-métalloporphyrine " résultant du couplage 25 entre la porphyrine de l'exemple ~30) et l'elliptincinium de l'exemple ~5b) ~longueur du bras reliant les deux entités est de 11 chaîons).
- La métalloporphyrine de manganèse ~IIIJ ~N-méthyl-4-pyridyl) correspondante:
Rdt = 65%.
UV-visible (H20 à 1,1 x 10-5 ~ ) 596 (1,9 x 103); 564 (3,6 x 103); 464 (3,5 X 104) (bande de Soret); 314 (2,3 x 104).
- La métalloporphyrine de zinc ~4-pyridyl) correspondante ~la résolution en RMN étant meilleure, le dérivé non quaternarisé sur les pyridinium est décrit):
Zn(Pp)(py)3: -Ph-O-CH2'9-CH2'3-CH2'7-NH(CO)-CH2'5-CH2'4-CH2'3-CH2'2-N+-Ellip Rdt = 60 %
UV-visible (dans MeOH à 1,6 x 10-6M) ,1 (~) 596 (6,3 x 103); 554 (2,2 x 104);
420 (5 x 105) (bande de Soret); 314 (7,5 x 104).
Masse (FAB+): m/e 1114 (M+).
26 1 3 3~ &0 2 RMN lH (DMSO-d6 à 303 K) ~ 10,26 (s, lH, Hl);
9,11 (d, 6H, J = 4,65 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,93 (m, 8H, ~-pyrrole); 8,66 (d, lH, J = 6,75 Hz, H3);
8,58 (d, lH, J = 6,75 Hz, H4); 8,32 (d, 6H, J = 4,65 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,15 (d, 2H, J = 8,45 Hz, protons 2,6-phénoxy-4); 8,01 (s élargi, lH, Hlo); 7,65 (d, lH, J = 8,60 Hz, H7); 7,43 (d, 2H, J = 8,45 Hz, protons 3,5-phénoxy-4); 7,35 (d, lH, J = 8,8 Hz, H8);

4,88 (m, 2H, (CH2)12); 4,39 (m, 2H, (CH2)l9): 4,00 (s, 3H, MeO); 3,45 (s, 3H, Mell); 2,91 (s, 3H, Me5); 2,39 (m, 2H, (CH2)15); 2,17 (m~ 4H~ (CH2)13 et 18); 1, (m, 4H, (CH2)14 et 17) * Molécules hybrides résultant du couplage entre la porphyrine de l'exemple (4u) et l'elliptici-nium (5b) (longueur du bras reliant les deux entités est de 12 chaînons):
- La métalloporphyrine de manganèse (III) (N-méthyl-4-pyridyl) correspondante:
Rdt. = 47~.
UV-visible (MeOH à 1,1 x 10 5M) A (~) 598 (3,6 x 103); 556 (1,3 x 104); 421 (2,8 x 105); 315 (5,7 x 104).
La résolution en RMN étant meilleure, le dérivé zinc non quaternarisé sur les pyridinium est décrit:
zn(PP)(PY)3 -o-NH(Co)-CH219-CH218-CH217-NH(Co)-CH215-CH214-CH213-CH212-N+-Ellip RMN lH (DMSO-d6 à 303 K) ~ 10,21 (s, lH, Hl);
9,10 (d, 6H, J = 5,60 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,98 (d, 2H, J = 4,7 Hz, ~-pyrrole); 8,93 (s, 4H, ~-pyr-role); 8,89 (d, 2H, J = 4,7 Hz, ~-pyrrole); 8,63 (d, lH, J = 7,10 Hz, H3); 8,52 (d, lH, J = 7,10 Hz, H4);
8,31 (d, 6H, J = 5,60 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,19 (s élargi, 4H, protons amino-4-phényl); 7,96 (d, lH, X
26a 13~6~2 J = 2,10 Hz, H1o); 7,68 (d, lH, J = 8,78 Hz, H7); 8,38 (d, lH, J = 8,78 Hz, J = 2,2 Hz, H8); 4,87 (t, 2H, J = 6,80 Hz, (CH2)12); 3,99 (s, 3H, MeO); 3,39 (s, 3H, Me11); 2,90 (s, 3H, Me5); 2,39 (t, 2H, J = 6,90 Hz, (CH2)19); 2,18 (m, 4H~ (CH2)13 et 18);
J = 6~90 Hz, (CH2)15); 1,76 (m, 4H, (CH2)14 et 17).
* Molécules hybrides résultant du couplage entre la métalloporphyrine de l'exemple (3O) et de l'ellipticinium de l'exemple (5d) (longueur du bras reliant les deux entités est de 12 chaînons):
- La métalloporphyrine de manganèse (III) (N-méthyl-4-pyridyl):
X' ~ A i ~33602 Rdt = 44%
UV-visible (H20) à 5,3 x 10-6M) ~ ) 620 (5,2 x 103); 674 (8,5 x 103); 466 (7,4 x 104) (bande de Soret); 315 (7,5 x 1 o4) .
- La métalloporpyrine de zinc ~4-pyridyl);
Rdt. = 41 %
UV-visible (MeOH à 8,7 x 10-6M) ,1 (~) 600 (3,7 x 103); 558 (1,2 x 104); 422 (2,4 x 1 o5) ; 316 (7,6 x 104) .
La résolution en RMN étant meilleure, le dérivé zinc non quaternarisé sur les pyridinium est décrit:
1 0 Zn(PP)(py)3:
- Ph-O-CH22~-CH2'9-CH213-NH(CO)-CH2l6-CH2'5-CH2'4-CH2'3-CH2'2-N+-Ellip.
RMN 'H (DMSO-d6 à 303 K) ~ 10,09 (s élargi, 1H, H,); 9,10 (d, 6H, J =
4,30 Hz, protons 2,6-pyridine); 8,97 (d, 2H, J = 4,70 Hz,13-pyrrole); 8, 91 (s, 4H,13-pyrrole); 8,89 (d, 2H, J = 4,70 Hz,13-pyrrole); 8,56 (d, 1H, J = 6,10 Hz, 15 H3); 8,43 (d, 1H, J = 6,10 Hz, H4); 8,31 (d, 6H, J = 4,30 Hz, protons 3,5-pyridine); 8,19 (d, 2H, J = 8,40 Hz, protons 2,6-phénoxy-4); 7,89 (s élargi, 1H,H~o); 7,67 (d, 1H, J = 8,50 Hz, H7); 7,42 (d, 2H, J= 8,40 Hz, protons 3,5-phénoxy-4); 7,37 (d, 1H, J = 8,50 Hz, H8); 4,79 (m, 2H, (CH2),2); 4,34 (m, 2H, (CH2)20); 3,98 (s, 3H, MeO); 3,27 (s, 3H, Me"); 3,01 (s, 3H, Me5); 2,31 (t, 2H, J
20 = 6,60 Hz, (CH2),6); 2,13 (m, 4H, (CH2),3et ,9); 1,78 (m, 4H, (CH2)~set 18); 1,50 (m, 2H, (CH2),4).
~, ~ i 33 3 602 Pour chacun de ces composés on n'observe aucun point de fusion en-dessous de 240~C.
Activités biologiques des métalloporphyrines hydrosolubles selon l'invention.
L'activité cytotoxique a été déterminée sur des cellules leucémiques murines

5 de type L1210 selon une méthode déjà décrite (par C. Paoletti, S. Cros et coll., Chem. Bio. Interact., 25, 45 ~1979). L'effet sur la croissance cellulaire est exprimé en termes de dose inhibant 50% de la croissance cellulaire (Dl50). Seules les valeurs des Dl50 inférieures à 2 uM peuvent être considérées comme significatives sur le plan biologique.
Les résultats de cytotoxicité sont rassemblés dans le tableau 1. Seuls les composés porphyriniques ayant un métal central susceptible d'atteindre de hauts degrés d'oxydation ou capables de conduire à des espèces métal-oxo en présence d'oxygène ou de dérivés réduits de l'oxygène présentent une cytotoxicité
appréciable: c'est le cas de complexes du manganèse. Les composés métallés 15 avec le zinc n'ont pas de toxicité significative (tableau 1). Le composé métallé
avec le fer, possède une toxicité plus faible que le composé analogue avec le manganèse.
Les produits les plus intéressants de cette série sont les dérivés hydrosolublesdu manganèse décrits dans les exemples, avec un, deux ou trois groupes 20 pyridinium et un, deux ou trois groupes phényle portant une fonction amine oualcool, permettant ainsi d'accrocher par l'intermédiaire d'un bras cette molécule à
une autre entité ("vecteur") présentant une affinité pour les acides nucléiques.Ces dérivés métalloporphyriniques peuvent conduire à la synthèse de molécules hybrides cytotoxiques avec un vecteur (in-~A I ~336~2 tercalant, oligonucléotides, oligopeptides, protéines ou fragments de protéines)adapté à la cible biologique (cellules tumorales, virus ...). Nous avons décrit de tels exemples (intercalants) dans l'exemple 5.
Par ailleurs, ces molécules cytotoxiques présentent une activité nucléase sur 5 de l'ADN in vitro. Cette activité a été mise en évidence en étudiant les coupures sur la forme superenroulée (forme 1) - de l'ADN de bactériophage OX 174 (voir tableau 2).
L'efficacité de coupure avec le composé (1 h), possédant trois groupes pyridinium est très nette. En effet il ne reste que 13% de la forme I au bout de 2 10 mn en présence de 250 nM de métalloporphyrine et 5 uM d'hydrogénopersulfate de potassium, KHS05. Il s'agit là de coupures simples brins, puisque la forme ll(ADN duplex circulaire avec une coupure) s'accumuleavant de conduire à la formelll (ADN du - La métalloporphyrine de manganèse (III) ~ A i ~33602 ; 466 8,7 x 10-6M) ,1 (~) 600 (3,7 x 103); 558 (1,2 x 104); 422 dérivé zinc non quaternarisé sur les 3-CH2'2-N+-Ellip.
J = 4,70 Hz,13-pyrrole); 8, 91 (s, 1H, J = 6,10 Hz, H4); 8,31 (d, 6H, J = 4,30 Hz, protons 3,5-largi, 1H,H~o); 7,67 (d, 1H, J = 8,50 Hz, H7); 7,42 (d, 2H, J= 8,40 Hz, protons 3,5-(m, 2H, (CH2),2); 4,34 (m, 2H, ),6); 2,13 (m, 4H, (CH2),3et ,9); 1,78 (m, 4H, (CH2)~set 18); 1,50 rines hydrosolubles selon l'invention.
selon une méthode déjà décrite (par C. Paoletti, S. Cros et coll., llulaire est uM peuvent être considérées comme au 1. Seuls les nduire à des espèces métal-oxo en présence st le cas de complexes du manganèse. Les composés métallés sé métallé
ts de cette série sont les dérivés hydrosolublesdu manganèse décrits dans les exemples, avec un, deux ou trois groupes et un, deux ou trois groupes phényle portant une fonction amine oualcool, permettant ainsi d'accrocher par l'intermédiaire d'un bras cette molécule à
peuvent conduire à la synthèse de molécules s, virus ...). Nous avons décrit de nt une activité nucléase sur nroulée (forme 1) - de l'ADN de bactériophage OX 174 (voir s groupes orphyrine et 5 uM d'hydrogénopersulfate plex linéaire). Les conditions expérimentales et les détails de la méthode d'analyse sont indiqués dans la référence Fouquet et coll. (cf. page 1).1 5 Activités biologiques des molécules hybrides, Nous avons choisi comme molécule hybride une métalloporphyrine (I) reliée à
un intercalant de la série pyrido-carbazole comme vecteur, à savoir la 9- méthoxy-ellipticine .
La molécule hybride la plus cytotoxique est celle où le métal central est le manganèse (Dl50 du composé (5f) = 0,58 ,uM, voir tableau 1). Le composé
analogue avec le fer reste toujours cytotoxique (Dl50 = 3,2,uM), par contre la toxicité devient beaucoup plus faible lorsque le métal est le zinc. Ceci con-~A t ~33602 firme que le métal de la partie porphyrinique joue un rôle essentiel dans l'expression de la toxicité de ces molécules hybrides. Ce même effet du métal central a été observé pour les métalloporphyrines sans vecteur.
Il faut noter que la molécule de l'exemple 5 présente toujours une activité
5 nucléase importante, bien que plus faible que l'exemple 1 (h). La quasi- complète transformation de la forme I en form 11 est obtenue à une concentration de 4,uM
en composé (5f).
Les molécules hybrides selon l'invention peuvent être considérées comme les premiers modèles biologiquement actifs de la bléomycine, médicament antitumoral 10 agissant par dégradation oxydante de l'ADN en présence de sels métalliques (Sausville et coll ., Biochemistry, 1 7, 2740 ( 1 978) .
En conclusion, les métalloporphyrines hydrosolubles et portant une fonction pour l'accrochage de vecteurs selon l'invention présentent à la fois une actitivité
cytotoxique sur des cellules tumorales et une capacité à couper les acides 1 5 nucléiques in vitro .
Ces deux activités biologiques sont conservées lorsque ces mêmes métallopophyrines sont reliées par l'intermédiaire d'un bras à un vecteur capable de moduler l'affinité ou l'interaction de ces molécules cytotoxiques vis-à-vis des acides nucléiques (les vecteurs peuvent être des intercalants, cas décrits ci-20 dessus, des oligonucléotides, oligo- ou polypeptides, ou des polyamines...).
Il s'agit là d'une nouvelle série originale de molécules cytotoxiques ayant pourcible les acides nucléiques. La large gamme des vecteurs qui leur sont associables permet d'envisager une activité cytotoxique sur des cellules de type très différent:
cellules tumorales, virus...
~A I 333602 Les composés de l'invention sont donc utilisables en thérapeutique, notamment comme antitumoraux, antileucémiques et antiviraux. L'invention a aussi pour objet les compositions pharmaceutiques contenant ces composés ainsi qu'un véhicule ou excipient pharmaceutiquement acceptable.
Tableau 1 - Effets in vitro sur des cellules L1210 de quelques composés selon l'invention Composé Dl50 (~M) de l'exemple -1 h) (Mn) 0,54 1 h) (Fe) 2,1 1 h) (Zn) 10,9 2 n) (Mn) 0,68 5 b) > 23 5 f) (Mn) 0,58 5 9) (Mn) 0,84 5 f) (Fe) 3,2 5 f) (Zn) >7,5 ~Al 333602 Tableau 2 - Observation par électrophorèse sur gel d'agarose des effets endonucléases Composé Conditions 1 ,uM en métalloprophyrine 5,uM en KHSO5 temps de pré-incubation (ADN +métallo-porphyrine): a) 20 mn, b) 1 mn temps d'incubation (avec oxydant): 2 mn Produit Formes I ll lll (ADN témoin) 85% 15%
1 h) (Mn) (250 nM)a 13% 78% 9%
1 h) (Mn) (250 nM)b 63% 37%
1 h) (Fe) (250 nM)b 75% 25%
1 h) (Zn) (250 nM)b 85% 15%
1 h) (Mn) (1 ,uM)a - 59% 41%
5 f) (Mn) (1,uM)a 32% 65% 3%
5 f) (Mn) (4,uM)a - 71% 10%
5 f) (Fe) (4,uM)a 58% 31%

Claims (11)

33 REVENDICATIONS

1. Dérivés de métalloporphyrines selon l'invention répondant à la formule générale I
dans laquelle A et B représentent chacun ou et Z+ représente N+-R1, ou C-N+R1R2R3, R1 étant un groupe aliphatique droit ou ramifié en C1 à C10, et R2 et R3 étant chacun un atome d'hydrogène ou un groupe aliphatique droit ou ramifié en C1 à C10.
R représente un groupe NH2, OH, COOH ou -N+(R1)3, ou un atome d'halogène.
n est O ou un entier de 1 à 10, le groupe alkylène correspondant pouvant être droit ou ramifié.
M représente un métal de transition.
X représente l'anion d'un acide carboxylique pharmaceutiquement acceptable, m étant un entier de 1 à 5, et Y représente une liaison ou un radical -O-, -CO- ou -CONH-.

2. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que R1 représente un groupe méthyle ou éthyle.

3. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que R2 et R3 représentent chacun un atome d'hydrogène.

4. Composés selon la revendication 1, carac-térisés en ce que M représente Mn ou Fe.

5. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que Z repré-sente le groupe N+ R1.

6. Le Pentaacétate de 5-(4-aminophényl)-10,15,20-tris(N-méthyl-4-pyridyl)-porphyrine de man-ganèse (III).

7. Procédé de préparation des composés (I) selon la revendication 1, caractérisé par les étapes suivantes :
(a) condensation d'un phényl-carboxaldéhyde de formule II
dans laquelle n et Y ont la même signification que dans la formule I et R' le groupe R éventuellement protégé de la formule I, et d'un aldéhyde de formule III
dans laquelle Z' représente N ou ?C-NR2R3, R2 et R3 ayant la même signification que dans la formule I, avec le pyrrole en milieu acide, de façon à obtenir une porphyrine (PP) tétrasubstituée en positions 5,10, 15,20 de formule générale IV
dans laquelle R', n, Y et Z' ont les mêmes significa-tions que dans les formules II et III respectivement, et n1 et n2 sont des entiers de 1 à 3 avec n1+n2=4, b) le cas échéant le composé IV est soumis à une déprotection du radical R' pour obtenir une por-phyrine tétrasubstituée en 5, 10, 15, 20 de formule générale V
dans laquelle Z' a la même signification que dans la formule III, pp, n1 et n2 sont comme dans la formule IV et n, Y et R ont la même signification que dans la formule I, c) le composé de formule V, après protec-tion éventuelle de la fonction R, est soumis à une réaction d'alkylation à l'aide d'un halogènure R1-hal, R1 ayant la même signification que dans la formule I
et hal désignant le brome ou d'iode, de manière à
obtenir une porphyrine tétrasubstituée en 5, 10, 15, 20 de formule générale VI
et d) ce composé est métallé à l'aide d'un sel MXp, M et X ayant la même signification que dans la formule I et p correspondant à la valence du métal M.

8. Procédé selon la revendication 7, carac-térisé en ce que les étapes c) et d) sont inversées.

9. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, et un véhicule ou excipient pharmaceutiquement acceptable.

10. Utilisation des composés selon l'une quelconque des revendications 1 à
5 6, pour la préparation de molécules hybrides à usage thérapeutique.

11. Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que la molécule hybride est obtenue avec la 9-méthoxy-ellopticine.