DE19604484A1

DE19604484A1 - Operation fields in living beings are long term stained

Info

Publication number: DE19604484A1
Application number: DE19604484A
Authority: DE
Inventors: Peter Edgar Dr Heide
Original assignee: Eberhard Karls Universitaet Tuebingen; Universitaetsklinikum Tuebingen
Current assignee: Heide Peter Edgar Dr 72147 Nehren De
Priority date: 1996-02-08
Filing date: 1996-02-08
Publication date: 1997-08-14
Anticipated expiration: 2016-02-09
Also published as: DE19604484C2

Abstract

Liposome vesicles (LV) containing absorbed water insoluble, solid dyestuffs are new. For the staining of operation fields in living beings, especially when carrying out endoscopic operations. The staining material can be readily prepared and handled, i.e. sterilised, is non-toxic, does not cause allergies, can be applied through capillaries, strongly stains the fields and remains there for several years allowing post-examination to be carried out long after the operation.

Description

Die Erfindung betrifft eine Farbstoffzubereitung zum Markieren von Operationsfeldern in Lebewesen, insbesondere für endos kopische Operationen.The invention relates to a dye preparation for marking of surgical fields in living things, especially for endos kopische operations.

Die Erfindung betrifft ferner ein Verfahren zum Herstellen einer Farbstoffzubereitung zum Markieren von Operationsfeldern in Lebewesen, insbesondere für endoskopische Operationen. The invention further relates to a method for producing a Dye preparation for marking surgical fields in Living things, especially for endoscopic operations.

Bei Operationen, insbesondere bei innerkörperlichen Operations feldern, wird das Operationsfeld farbig markiert, damit der Chirurg ein klar abgegrenztes Gebiet erkennen kann.In operations, especially in intra-body operations Fields, the surgical field is highlighted in color, so that the Surgeon can recognize a clearly demarcated area.

In letzter Zeit hat sich die minimalinvasive Chirurgie, die mittels Endoskopietechniken durchgeführt wird, stark verbreitet.Lately, minimally invasive surgery, the performed by endoscopy techniques, is widely used.

Bei dieser Operationstechnik wird keine große Incision vorge nommen, die ein innerkörperliches Operationsfeld von außen her ersichtlich machen kann, sondern es werden die Operations instrumente, meist Endoskope, über Trokare von ca. 1-2 cm Durchmesser in den Körper eingeführt und so die Operation bewerkstelligt. Bei endoskopischen Operationen kann der Operateur durch eine durch das Endoskop hindurchreichende Optik direkt, oder über angeschlossene Monitore, indirekt das Operationsfeld betrachten. Da der Ausschnitt der Endoskopieoptik oft nicht das gesamte Operationsfeld erfaßt, sondern nur Ausschnitte davon, ist es bei endoskopischen Operationen besonders wichtig, das Operationsfeld farblich zu markieren, um dem Chirurg die Orientierung zu erleichtern.There is no major incision in this surgical technique taken from the outside, which is an inner-body surgical field but it can become the operations Instruments, mostly endoscopes, about trocars of about 1-2 cm Diameter introduced into the body and so the operation accomplished. For endoscopic surgery, the surgeon may directly through an endoscope through the endoscope, or via attached monitors, indirectly the surgical field consider. Because the cutout of endoscopic optics is often not covers the entire surgical field, but only excerpts of it, It is especially important in endoscopic surgery To highlight the surgical field in color to the surgeon To facilitate orientation.

Derartige Markierungen, bzw. bei kleineren Operationsfeldern ein Anfärben des Operationsfeldes, können bei endoskopischen Operationen zu Beginn der Operation durchgeführt werden, bspw. indem nach Einführen entsprechender Trokare die Markierung bzw. das Anfärben mittels geeigneter Injektionsvorrichtungen, wie bspw. Spritzen, durchgeführt wird.Such markings, or in smaller surgical fields a staining of the surgical field, in endoscopic Operations are performed at the beginning of the operation, eg. in that after insertion of appropriate trocars the marking or staining by means of suitable injection devices, such as For example, spraying is performed.

Bei manchen Operationen ist es notwendig, nach gewissen Zeit abschnitten, die im Halb- oder Jahresbereich liegen, Kontroll untersuchungen des Operationsfeldes durchzuführen, wobei dies ebenfalls durch endoskopische Untersuchungen durchgeführt wird. Solche Nachuntersuchungen können dadurch wesentlich erleichtert werden, daß nach wie vor, auch nach einem Zeitraum von mehreren Jahren, die Markierung noch erkannt werden kann, so daß ganz gezielt das Operationsfeld nach eventuellen Nachwucherungen oder dgl. untersucht werden kann.For some operations, it is necessary after a certain time periods in the half or yearly range, control carry out examinations of the surgical field, this being also performed by endoscopic examinations. Such follow-up can be much easier be that, as before, even after a period of several Years, the mark can still be recognized, so that whole targeted the surgical field after any new growths or the like can be examined.

Es ist bekannt, zum Markieren bzw. zum Anfärben von Operations feldern wasserlösliche Farbstoffe, wie bspw. Patentblau, Methylenblau etc., einzusetzen, die für diese Zwecke entsprechend zubereitbar sind. Das bedeutet, die Farbstoffe können einer Sterilfiltration unterzogen werden, autoklaviert werden, portioniert werden, in Spritzen aufgezogen werden, bspw. auch in dünnsten Butterfly-Kanülen, somit für die Markierungszwecke vorbereitet und mit den dafür vorgesehenen Gerätschaften hantiert werden.It is known to mark or stain operations fields of water-soluble dyes, such as patent blue, Methylene blue, etc., to use that for these purposes accordingly are prepared. This means that the dyes can one Be subjected to sterile filtration, autoclaved, be portioned, raised in syringes, for example, also in thinnest butterfly needles, thus for marking purposes prepared and handled with the appropriate equipment become.

Nachteilig an diesen wäßrigen Farbstofflösungen ist, daß die Konturen der markierten Bereiche in kürzester Zeit verblassen, da Diffusionen an oder in den wasserhaltigen Körperteilen erfolgen.A disadvantage of these aqueous dye solutions is that the Contours of the marked areas fade in no time, as diffusions on or in the water-containing body parts respectively.

Diese Farbstoffe, die daher nicht für länger andauernde Opera tionen geeignet sind, sind schon überhaupt nicht zur langanhal tenden Markierung zur Erleichterung von zeitlich späteren Nachuntersuchungen geeignet.These dyes, therefore, not for longer-lasting Opera are not at all long-lasting border marking to facilitate later in time Follow-up examinations suitable.

Es ist auch schon bekannt geworden, öllösliche Farbstoffe, z. B. Guajazulen, zum Markieren bzw. zum Anfärben heranzuziehen, eine Zubereitung, die sich ebenfalls gut verarbeiten läßt (z. B. Sterilfiltrieren, Portionieren). Solche öligen Farbstofflösungen verweilen zwar längere Zeit im markierten Feld als wasserlösliche Farbstoffe, der Nachteil von öligen Zubereitungen liegt jedoch in der Gefahr einer möglichen Fettembolie. It has also become known oil-soluble dyes, eg. B. Guazucolas, to be used for marking or staining, one Preparation that also works well (eg Sterile filtration, portioning). Such oily dye solutions Although linger for a long time in the marked field as water-soluble Dyes, the disadvantage of oily preparations, however in danger of possible fat embolism.

Es ist ferner schon bekannt geworden, feste Farbpigmente, meist Oxide von Schwermetallen, wie z. B. Eisen, im pharmazeutischen Bereich einzusetzen. Ein großer Nachteil beim Einsatz zum Markieren von Operationsfeldern ist die Möglichkeit einer Allergenität, d. h. daß der markierte Körper allergisch auf solche Farbpigmente reagiert.It is also already known, solid color pigments, mostly Oxides of heavy metals, such as. As iron, in the pharmaceutical Insert area. A big disadvantage when using for Marking operation fields is the possibility of a Allergenicity, d. H. that the labeled body is allergic to such Color pigments reacts.

Es wurden auch schon Untersuchungen der Anmelderin angestellt, zur Markierung von Operationsfeldern sterilisierte Suspensionen aus Aktivkohle herzustellen. Galenisch ist diese Zubereitung unbefriedigend, da die kleinen Aktivkohlepartikel nach und nach zu größeren Gebilden aggregieren, die dann aus der Suspension rasch ausfallen und einen Bodensatz bilden. Es wurde versucht, dieser Aggregation durch Tenside zu entgegnen, es wurde aber festgestellt, daß sich Tenside negativ auf das Blutbild auswirken (Hämolyse) und Allergien hervorrufen.There have also been investigations by the applicant, for marking surgical fields sterilized suspensions made of activated carbon. Galenic is this preparation Unsatisfactory, since the small particles of activated carbon gradually aggregate into larger entities, which then emerge from the suspension precipitate quickly and form a sediment. It has been tried, However, it has been said to counteract this aggregation by surfactants found that surfactants have a negative effect on the blood count (Hemolysis) and allergies.

In der Praxis wurden schon Zeichentuschen, wie sie bspw. auch zum Tätowieren herangezogen werden, dazu verwendet, um Opera tionsfelder zu markieren. Untersuchungen haben zwar gezeigt, daß solche Tuschen frei von kanzerogenen Stoffen sind, da die Zubereitung solcher Tuschen aber nicht auf den operativen Bereich abgestimmt ist, können solche handelsfertigen Produkte nicht ohne weiteres herangezogen werden.In practice, drawing showers have already been used, as they are, for example used for tattooing, used to opera Mark fields. Studies have shown, that such shells are free of carcinogenic substances, since the Preparation of such showers but not on the operative area is not compatible with such ready-made products be used without further ado.

Es ist daher Aufgabe der vorliegenden Erfindung, eine Farbstoff zubereitung zum Markieren von Operationsfeldern in Lebewesen, insbesondere für endoskopische Operationen, und ein Herstellungs verfahren für eine solche Farbstoffzubereitung zu schaffen, die für den operativen Einsatz einfach zubereitbar und handhabbar ist, d. h. leicht zu sterilisieren ist, untoxisch ist, keine Allergien hervorruft, sowie auch durch dünne Kanülen applizierbar ist, und die ferner das Operationsfeld nachhaltig stark anfärbt und ggf. auch über Jahre am Ort verbleibt, um auch spätere Untersuchungen zu ermöglichen. It is therefore an object of the present invention, a dye preparation for marking operation fields in living beings, especially for endoscopic surgery, and a manufacturing to provide a method for such a dye preparation, They are easy to prepare and handle for operational use is, d. H. easy to sterilize, is non-toxic, no Allergies causes, as well as by thin needles applizierbar is, and further stains the surgical field sustainably strong and if necessary also for years at the place remains, even later Allow investigations.

Erfindungsgemäß wird die Aufgabe bei einer Farbstoffzubereitung dadurch gelöst, daß ein wasserunlöslicher fester Farbstoff in Liposomvesikeln aufgenommen ist.According to the invention, the object of a dye preparation achieved in that a water-insoluble solid dye in Liposomesicles is included.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß auch durch ein Verfahren dadurch gelöst, daß ein wasserunlöslicher fester Farbstoff in wäßriger Dispersion in ein Liposomvesikel mit an sich bekannter Technik eingebracht wird und anschließend die Liposomvesikel sterilisiert werden.This object is achieved by a method achieved in that a water-insoluble solid dye in aqueous dispersion into a liposome vesicle with per se known Technique is introduced and then the liposome vesicles be sterilized.

Es konnte auf überraschende Weise festgestellt werden, daß es möglich ist, wasserunlösliche feste Farbstoffe in einer wäßrigen Suspension in Liposomvesikel zu überführen.It could be found in a surprising way that it is possible, water-insoluble solid dyes in an aqueous Transfer suspension into liposome vesicles.

Liposomvesikel (auch Lipidvesikel oder Liposome genannt) sind wäßrige Kompartimente, die von einer Lipiddoppelschicht umgeben sind. Die Lipiddoppelschicht ist so aufgebaut, daß sich die hydrophoben Einheiten der Lipide (meist Fettsäureketten) gegenüberstehen und die hydrophilen Einheiten (meist OH-Gruppen oder phosphorylierte Alkohole) der einen inneren Schicht dem Innenraum zugewandt sind und die der anderen Schicht an der Außenseite des Liposomvesikels liegen.Liposome vesicles (also called lipid vesicles or liposomes) are aqueous compartments surrounded by a lipid bilayer are. The lipid bilayer is constructed so that the hydrophobic units of the lipids (mostly fatty acid chains) and the hydrophilic units (usually OH groups or phosphorylated alcohols) of an inner layer Interior facing and the other layer on the Outside the Liposomvesikels lie.

Die Liposomvesikel weisen eine Größe im Bereich von einigen Nanometern bis einigen hundert Nanometern auf. Es konnte nunmehr festgestellt werden, daß wasserunlösliche Farbstoffe, bei einer entsprechend kleinen Körnung, über an sich bekannte Techniken in solche Liposomvesikel eingebaut werden können, in denen diese auf Dauer gefangen sind. Solche Liposomvesikel sind unter geeigneten Bedingungen über Jahre haltbar, können somit ent sprechend auf Vorrat produziert und gelagert werden.The liposome vesicles have a size in the range of some Nanometers to a few hundred nanometers. It could now be found that water-insoluble dyes, in a correspondingly small grain size, via known techniques can be incorporated into such liposome vesicles in which these are trapped permanently. Such liposome vesicles are under suitable conditions for years, so ent speaking to be produced and stored in stock.

Mit solchen Liposomvesikeln können gängige Sterilfiltrationen durchgeführt werden, bei denen im letzten Schritt mit Filtern mit einem Porendurchmesser von 0,2 µ gearbeitet werden, durch die die Liposomvesikel, mit der Ausnahme von einigen sehr großen Vesikeln, durchtreten können. Somit ist die Farbstoffzubereitung über gängige Sterilisiervorgänge einfach und mit hohen Ausbeuten in ein steriles Produkt überzuführen.With such liposome vesicles common sterile filtration can in the last step with filters are worked with a pore diameter of 0.2 μ, through the liposome vesicles, with the exception of some very large ones Vesicles, can pass through. Thus, the dye preparation easy and high yields over common sterilization procedures into a sterile product.

Es ist auch möglich, bei geeigneter Auswahl der Lipiddoppel schichten eine Sterilisation im Autoklaven durchzuführen. Die resultierenden Liposomvesikel weisen eine solche Größe auf, daß sie nicht zu Agglomerationen neigen und durch die Braun′sche Molekularbewegung in Schwebe gehalten werden, sich somit auch in wäßriger Suspension nicht absetzen, diese sind somit ge brauchsfertig lagerbar. Diese Suspensionen bzw. die Liposom vesikel sind mit gängigen Gerätschaften, wie Injektionsspritzen oder Kanülen, handhabbar, somit ist der Markierungsvorgang einfach durchzuführen.It is also possible, with appropriate selection of the lipid double to perform a sterilization in an autoclave. The resulting liposome vesicles are of such size that they do not tend to agglomerate and through the Braun'sche Molecular movement are held in suspension, thus also do not settle in aqueous suspension, these are thus ge storable ready for use. These suspensions or the liposome Vesicles are made with common equipment, such as hypodermic syringes or cannulas, manageable, thus the marking process easy to perform.

Die Lipide, die die Lipiddoppelschichten der erfindungsgemäßen Liposomvesikeln aufbauen, werden vom Körper von Lebewesen, insbesondere vom menschlichen Körper, vertragen, d. h. es finden keine allergischen Reaktionen statt, und es besteht auch nicht die Gefahr von Fettembolien. Die Vesikel verbleiben an der im Körper aufgebrachten Stelle, haften quasi an den Organen. Dadurch können sehr scharf konturierte Markierungen bewerkstelligt werden. Durch Auswahl einer entsprechend hohen Konzentration und von farbintensiven Farbstoffen in den einzelnen Liposom vesikeln und durch Auswahl einer entsprechend hochkonzentrierten Vesikel-Suspension kann die gewünschte Farbintensität eingestellt werden. Die Markierung verbleibt über längere Zeit an Ort und Stelle, zumindest solange, solange die Liposomvesikel vom Körper nicht abgebaut werden, also ggf. über mehrere Jahre. Selbst dann, wenn die Liposomvesikel aufgelöst werden, verbleibt aber der wasserunlösliche Farbstoff an Ort und Stelle, so daß bei Nachuntersuchungen die Markierung nach wie vor erkannt werden kann, selbst dann, wenn das eigentlich Liposomvesikel schon enzymatisch abgebaut wurde. Dies wird als ein besonders hervor zuhebender Vorteil der Erfindung angesehen.The lipids containing the lipid bilayers of the invention Build up liposome vesicles are carried by the body of living things, especially from the human body, d. H. find it no allergic reactions take place, and it does not exist the risk of fat embolism. The vesicles remain at the Body applied body, adhere to the organs, so to speak. Thereby can do very sharp contoured markings become. By selecting a correspondingly high concentration and of color-intense dyes in the individual liposome vesicles and by selecting a correspondingly highly concentrated Vesicle suspension can adjust the desired color intensity become. The mark remains in place for a long time Body, at least as long as the liposome vesicles from the body not be dismantled, so possibly over several years. Even but when the liposome vesicles are dissolved, but remains the water-insoluble dye in place, so that at Follow-up the marker will still be detected can, even if that actually liposome vesicle was enzymatically degraded. This is especially evident considered to advantage of the invention.

Durch das erfindungsgemäße Verfahren kann, mit an sich bekannten Verfahrenstechniken, sehr flexibel an entsprechende Farbwünsche und Farbintensitäten angepaßt werden und die für den operativen Einsatzbereich gewünschte Isolierung und Sterilisierung der Liposomvesikel deswegen sehr einfach durchgeführt werden, da diese der gängigen Sterilfiltration zugänglich sind. Auch dies wird als ein besonders hervorzuhebender Vorteil deswegen angesehen, da durch die Eigenschaft der Liposomvesikel, sich größenmäßig im Nanometerbereich von selbst auszubilden, die Möglichkeit geschaffen wird, die Liposome von nicht sterilen Partikeln, die üblicherweise eine Größe von mehr als 0,35 µ aufweisen, einfach abzutrennen. Dies ermöglicht, mit einfachem operativen Aufwand auch großtechnische Mengen kostengünstig steril herzustellen.By the method according to the invention can, with per se known Process technologies, very flexible to corresponding color requirements and color intensities are adjusted and those for the operative Area of application desired isolation and sterilization of Because of this, liposome vesicles are very easy to perform These are the common sterile filtration accessible. This too is considered as a special advantage because of that Considered by the property of liposome vesicles, themselves on the nanometer scale by itself, the Possibility is created, the liposomes of non-sterile Particles usually larger than 0.35 μ in size have, just separate. This allows, with simple operational effort and large-scale quantities cost to produce sterile.

Somit wird die Aufgabe vollkommen gelöst.Thus, the task is completely solved.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung sind die Liposom vesikel aus Lipiden aufgebaut, die ähnlich oder gleich der Zellmembranlipide (sogenannte Organfette) von Lebewesen sind.In a further embodiment of the invention are the liposome vesicles composed of lipids similar or equal to the Cell membrane lipids (so-called organ fats) of living things are.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß Liposomvesikel gebaut werden, die dem Aufbau der Zellen von Lebewesen sehr ähnlich sind, somit von diesen sehr gut vertragen werden und auch keine Abstoß- oder allergische Reaktionen auslösen. Dadurch kann die Verträg lichkeit, insbesondere die Langzeitverträglichkeit, sicher gestellt werden. This measure has the advantage that liposome vesicles are built, which are very similar to the structure of the cells of living beings, thus be tolerated by these very well and no repulsion or cause allergic reactions. This allows the contract safety, especially long-term compatibility be put.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung sind Phospolipide, Glykolipide, Lipopolysaccharide, Lipoproteine und deren Unter gruppen als die Liposomvesikel aufbauende Lipide vorhanden.In a further embodiment of the invention are phospholipids, Glycolipids, lipopolysaccharides, lipoproteins and their sub groups as liposome vesicle-building lipids present.

Diese Lipidstoffe sind Baustoffe der Zellwände des menschlichen Körpers, so daß die Liposomvesikel aus Lipiden aufgebaut werden, die ohnehin im menschlichen Körper vorhanden sind, somit von diesem besonders gut verträglich sind.These lipid substances are building materials of the cell walls of the human Body, so that the liposome vesicles are built up from lipids, which are already present in the human body, thus of this are particularly well tolerated.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung sind Phosphatidyl cholin enthaltende Lipide pflanzlichen oder tierischen Ursprungs, insbesondere Soja-Phospolipide, als die Liposomvesikel aufbauende Lipide vorhanden.In a further embodiment of the invention are phosphatidyl choline-containing lipids of plant or animal origin, in particular, soy phospholipids, as the liposome vesicle-building Lipids present.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß durch die Auswahl der Phosphatidylcholin enthaltenden Lipide Substanzen ausgewählt sind, die zum einen im menschlichen Körper vorhanden sind, zum anderen technisch zur Verfügung stehen, die außerdem hervorragend geeignet sind, sehr gleichmäßige Liposomvesikel auszubilden, die auch sehr stabil sind.This measure has the advantage that by selecting the Phosphatidylcholine-containing lipids selected substances are, on the one hand present in the human body, for other technically available, which are also excellent are suitable for forming very uniform liposome vesicles, which are also very stable.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung sind die beiden Lipidschichten, die die Lipiddoppelschicht der Liposomvesikel aufbauen, untereinander vernetzt.In a further embodiment of the invention, the two Lipid layers containing the lipid bilayer of liposome vesicles build, interconnected with each other.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß durch die Vernetzung langzeitstabile Liposomvesikel geschaffen werden, die hydro lytischen oder enzymatischen Angriffen lange widerstehen. Solche Liposomvesikel sind über lange Zeit, also über mehrere Jahre hinweg, lagerstabil und sind auch insbesondere zur Markierung von solchen Operationsfeldern geeignet, bei denen Nachunter suchungen stattfinden. This measure has the advantage that by networking long-term stable liposome vesicles are created, the hydro long resist lytic or enzymatic attacks. Such Liposome vesicles are over a long time, so over several years time, storage stable and are also in particular for marking suitable for such surgical fields in which Nachunter take place.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung ist die Lipid doppelschicht über Substanzen vernetzt, die ähnlich oder gleich von in Organen vorhandenen Substanzen sind.In a further embodiment of the invention, the lipid double layer crosslinked via substances that are similar or the same of substances present in organs.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß auch die Vernetzungsagenzien und auch die damit vernetzten Lipiddoppelschichten vom Körper toleriert werden, somit keine Abwehrreaktionen oder allergische Reaktionen auslösen.This measure has the advantage that the crosslinking agents and also the cross-linked lipid bilayers from the body be tolerated, thus no defense reactions or allergic Trigger reactions.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung sind die Lipid doppelschichten über Cholesterol und/oder Dicetylphosphat vernetzt.In a further embodiment of the invention, the lipid double layers over cholesterol and / or dicetyl phosphate networked.

Mit diesen Substanzen können besonders verträgliche vernetzte Liposomvesikel hergestellt werden, wobei das Cholesterol eine ohnehin in der menschlichen Zelle vorkommende Substanz darstellt. Dadurch wird nicht nur ein weiterer Beitrag zur Lagerstabilität der Liposomvesikel sondern auch zu deren Verträglichkeit geleistet.With these substances can be particularly compatible cross-linked Liposomesikel be produced, the cholesterol a already occurring in the human cell occurring substance. This will not only add to storage stability the liposome vesicles but also to their compatibility done.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung weisen die Liposomvesikel einen Durchmesser von 0,2 µ auf.In a further embodiment of the invention, the Liposome vesicles have a diameter of 0.2 μ.

Diese Größenauswahl, die bspw. nach einer Sterilfiltration erhalten wird, garantiert eine Farbstoffzubereitung, die den Sterilbedingungen entspricht bzw. die auch ohne Mühe nach einer längeren Lagerung zur Sicherheit noch einmal rasch einer Steril filtration unterzogen werden kann.This size selection, for example, after a sterile filtration is obtained, guarantees a dye preparation containing the Sterile conditions corresponds or without effort after a prolonged storage for safety once again quickly a sterile filtration can be subjected.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung ist der Farbstoff als Dispersion im Liposomvesikel aufgenommen. In a further embodiment of the invention is the dye taken up as a dispersion in the liposome vesicle.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß durch die Herstellung bestimmter feindisperser Aufschlämmungen bzw. Dispersionen die gewünschte Konzentration an Farbstoff pro Volumeneinheit im Innern des Liposomvesikels ausgewählt werden kann und die Farbstoffzubereitung bspw. in wäßriger Suspension aufbewahrt werden kann.This measure has the advantage that through the production certain finely divided slurries or dispersions the desired concentration of dye per unit volume in Inside the liposome vesicle can be selected and the Dye preparation, for example, stored in aqueous suspension can be.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung liegen die Liposomvesikel in getrocknetem Zustand, nämlich als Pulver vor.In a further embodiment of the invention are the Liposomesicles in the dried state, namely as a powder before.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß, nach Herstellen der Liposomvesikel, diese getrocknet werden, wonach im Innern der Liposomvesikel nur noch der feste Farbstoff vorliegt. In diesem Zustand sind die Liposomvesikel über Jahre hinweg haltbar und können zum Einsatz in eine wäßrige Suspension übergebracht werden.This measure has the advantage that, after making the Liposome vesicles, these are dried, after which inside the Liposome vesicles only the solid dye is present. In this State, the liposome vesicles are stable over years and years can be placed in an aqueous suspension for use become.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung ist ein Volumen geber zugegeben.In a further embodiment of the invention is a volume added.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß beim Trocknen der Liposom vesikel die Volumenstruktur der Suspension im wesentlichen aufrechterhalten wird, was ein späteres Überführen in eine wäßrige Suspension wesentlich erleichtert. Aufrechterhalten der Volumenstruktur bedeutet, daß nach dem Trocknen ein fein verästeltes dreidimensionales faserartiges Raumgebilde verbleibt, das das Volumen der ausgänglich wäßrigen Phase belegt. Die getrockneten Liposomvesikel sind in dieser Volumenstruktur verteilt und können durch Zugabe von Wasser problemlos wieder in eine wäßrige Suspension übergeführt werden. Darüber hinaus verhindert ein Volumengeber beim Trocknen, insbesondere beim Gefriertrocknen, das explosionsartige Verdampfen von Wasser, was möglicherweise zu Schäden in der Lipiddoppelschicht führen könnte. Diese Schäden bestehen bspw. in regelrechten Durch brüchen, durch die dann der Farbstoff aus dem Liposomvesikel austreten könnte.This measure has the advantage that when drying the liposome vesicles the volume structure of the suspension substantially is maintained, resulting in a later transfer to one aqueous suspension much easier. maintain the volume structure means that after drying a fine ramified three-dimensional fibrous spatial structure remains, which occupies the volume of the aqueous phase. The dried liposome vesicles are in this volume structure distributed and can be easily recovered by adding water be converted into an aqueous suspension. Furthermore prevents a volume sensor when drying, especially when Freeze-drying, the explosive evaporation of water, possibly leading to damage in the lipid bilayer could. These damages exist, for example, in regular through breaks, through which then the dye from the liposome vesicle could escape.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung werden als Volumengeber Zuckerstoffe, insbesondere Mannit, hinzugegeben.In a further embodiment of the invention are as Volumetric sugars, especially mannitol added.

Diese Volumengeber sind Substanzen, die im Körper keinerlei allergische oder Abwehrreaktionen oder sonstige Schädigungen hervorrufen können, zugleich die vorteilhafte Wirkung als Volumengeber entfalten.These volume donors are substances that are not in the body allergic or defensive reactions or other damage can cause at the same time the beneficial effect as Unfold volume sensor.

In einer besonders bevorzugten Ausgestaltung der Erfindung ist der feste wasserunlösliche Farbstoff Kohlenstoff.In a particularly preferred embodiment of the invention the solid water-insoluble dye carbon.

Diese Maßnahme hat den Vorteil, daß ein chemisch nahezu inerter Farbstoff ausgewählt ist, der aufgrund seiner schwarzen Farbe eine hohe Färbungs- bzw. Markierungsintensität aufweist.This measure has the advantage that a chemically almost inert Dye is selected because of its black color has a high coloring or marking intensity.

Farbmarkierungen mit schwarzer Farbe haben sich als besonders vorteilhaft erwiesen. Kohlenstoff als Element ruft im Körper keinerlei Abwehrreaktionen oder Nebenreaktionen hervor, ganz im Gegenteil, die eingangs erwähnten Kohlesuspensionen haben sich, was den Bestandteil Kohle betrifft, in der Praxis als sehr günstige Farbmarkierungen erwiesen.Color markers with black color have become special proved advantageous. Carbon as an element calls in the body no defense reactions or side reactions, whole on the contrary, the coal suspensions mentioned above have in terms of coal, in practice as very cheap color markings proved.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung wird Kohlenstoff in Form von Ruß, insbesondere in Form von Furnaceruß eingesetzt.In a further embodiment of the invention is carbon used in the form of carbon black, in particular in the form of Furnaceruß.

Furnaceruß ist als industrielles Produkt in reproduzierbarer Qualität erhältlich. Toxikologische Untersuchungen haben gezeigt, daß solche Rußzubereitungen, die entweder als Pulver oder als Suspension angeboten werden, keinerlei kanzerogene oder sonstige schädlichen Stoffe enthalten. Furnace black is reproducible as an industrial product Quality available. Toxicological studies have shown that such carbon black formulations, either as a powder or as Suspension are offered, no carcinogenic or otherwise contain harmful substances.

Furnaceruße bestehen aus graphitähnlichen Kohlenstoff sechsringschichten und weisen eine Teilchengrößeverteilung mit einem Maximum im Bereich von einigen Nanometern auf. Es sind selbstverständlich auch die anderen gängigen industriellen Rußarten, wie Ölruße, Acetylenruße, Flammruße, Thermalruße, einsatzfähig, wobei sich die Furnaceruße durch eine besonders schmale Korngrößenverteilung auszeichnen.Furnaceruße consist of graphite-like carbon six-ring layers and have a particle size distribution with a maximum in the range of a few nanometers. There are of course, the other common industrial Soot types, such as oil blacks, acetylene blacks, flame blacks, thermal blacks, operational, whereby the Furnaceruße by a particularly distinguish narrow particle size distribution.

In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung sind als Farbstoff gegenüber dem menschlichen Körper unbedenkliche Metalloxide, insbesondere Zinkoxid vorhanden.In a further embodiment of the invention are as a dye harmless metal oxides to the human body, especially zinc oxide present.

Einige Metalloxide, wie insbesondere Zinkoxid und auch Titanoxid zeigen ein leuchtend weißes Erscheinungsbild und sind daher ebenfalls als Markierungsstoffe geeignet. Auch solche Oxide sind in sehr kleiner Korngröße herstellbar und werden auch vom menschlichen Körper toleriert. Es ist möglich, insbesondere in Verbindung mit vernetzten Lipiddoppelschichten, auf Dauer haltbare Liposomvesikel im Körper einzusetzen, auch wenn nicht völlig ausgeschlossen werden kann, daß einige der Metalloxid moleküle, falls ein Liposomvesikel aufgelöst wird, ggf. von Zellen aufgenommen wird.Some metal oxides, in particular zinc oxide and also titanium oxide show a bright white appearance and are therefore also suitable as markers. Also such oxides are produced in very small grain size and are also from tolerated by the human body. It is possible, in particular in conjunction with cross-linked lipid bilayers, over time Use durable liposome vesicles in the body, even if not can be completely ruled out that some of the metal oxide molecules, if a liposome vesicle is dissolved, if necessary from Cells is recorded.

In besonderen Ausgestaltungen des Verfahrens wird, wie bereits erwähnt, eine Sterilfiltration, insbesondere eine Stufen filtration bis zu einer Porengröße von 0,2 µ bewerkstelligt.In particular embodiments of the method, as already mentions a sterile filtration, in particular a step filtration accomplished up to a pore size of 0.2 μ.

Höchst vorzugsweise werden die Liposomvesikel zur Lagerung getrocknet, insbesondere gefriergetrocknet, wozu den Liposom vesikeln Volumengeber hinzugegeben werden.Most preferably, the liposome vesicles are stored dried, in particular freeze-dried, including the liposome Volume dispensers are added.

In einer besonders günstigen Ausgestaltung, nämlich wenn Soja-Lecithinsorten mit einem Anteil von mehr als 1% Phosphati dylethanolamin als die Liposomvesikel aufbauende Lipide einge setzt werden, kann eine Herstelltechnik eingesetzt werden, die sich mechanischer Rührer, bspw. hochtouriger Ultraturrax-Rührer, bedient, wodurch im technischen Maßstabe Farbstoffzubereitungen möglich sind. Die gängige Technik zur Herstellung von Liposom vesikeln ausschließlich mit Ultraschall ist für kleine Mengen oder für Labormengen besonders geeignet, im technischen Maßstabe jedoch sehr aufwendig.In a particularly favorable embodiment, namely when Soya lecithin varieties with a content of more than 1% Phosphati dylethanolamine as the liposome vesicles building lipids be set, a manufacturing technique can be used, the mechanical stirrer, for example high-speed Ultraturrax stirrer, operated, which on an industrial scale dye preparations possible are. The common technique for producing liposome Ultrasound vesicles are for small quantities or particularly suitable for laboratory quantities, on an industrial scale but very expensive.

Es versteht sich, daß die vorstehend genannten und die nach stehend noch zu erläuternden Merkmale nicht nur in den ange gebenen Kombinationen, sondern auch in anderen Kombinationen oder einzeln einsetzbar sind, ohne den Rahmen der vorliegenden Erfindung zu verlassen.It is understood that the above and the standing still to be explained features not only in the ange given combinations, but also in other combinations or individually applicable, without the scope of the present To leave invention.

Die Erfindung wird nachfolgend anhand einiger ausgewählter Ausführungsbeispiele näher beschrieben und erläutert.The invention will be described below with reference to a few Embodiments described and explained in detail.

Preparation of a black dye preparation raw materials

Farbstoff: Rußzubereitungen der Firma Degussa PRINTEX L (Furnaceruß, Halbwertsbreite der Korngrößenver teilung etwa 20 bis 50 Nanometer)
DERUSSOL AN1-25/l (Rußdispersion)
Lipid: Soja-Lecithine der Firma L. Meyer, Hamburg EPIKURON 200 (gereinigtes Phosphatidylcholin aus Soya)Dye: carbon black formulations from Degussa PRINTEX L (furnace carbon black, half-width of grain size distribution about 20 to 50 nanometers)
DERUSSOL AN1-25 / l (soot dispersion)
Lipid: soy lecithins from the company L. Meyer, Hamburg EPIKURON 200 (purified phosphatidylcholine from soya)

Phosphatidylcholinphosphatidylcholine min. 92%minute 92% Lyso-PhosphatidylcholinLysophosphatidylcholine max. 4%Max. 4% andere Phospholipideother phospholipids max. 1%Max. 1% Wasser, RestölgehaltWater, residual oil content max. 1%Max. 1%

EPIKURON 180, EPIKURON 100
LIPOID S100, LIPOID S75, KRYOSOME
Vernetzer: Cholesterol der Firma Merck, Darmstadt Dicetylphosphat der Firma Sigma, Traunstein
Volumengeber: Mannit der Firma Merck, Darmstadt
Lösungsmittel: Chloroform der Firma Merck, Darmstadt, Destil liertes WasserEPICURON 180, EPICURON 100
LIPOID S100, LIPOID S75, KRYOSOME
Crosslinker: Cholesterol from Merck, Darmstadt Dicetyl phosphate from Sigma, Traunstein
Volume transmitter: mannitol from Merck, Darmstadt
Solvent: chloroform from Merck, Darmstadt, distilled water

example 1

Die zur Handhabung eingesetzten Glasgeräte, Magnetrührer, Löffel und dgl. wurden bei 180°C über eine Stunde in einem Sterilisier schrank sterilisiert und pyrogenfrei gemacht. Nach dem Erkalten wurden aseptisch folgende Substanzen in einen 250 ml Rundkolben eingewogen:The glassware used for handling, magnetic stirrer, spoon and the like were sterilized at 180 ° C for one hour in a sterilizer Cabinet sterilized and made pyrogen free. After cooling The following substances were aseptically added to a 250 ml round bottom flask weighed:

EPIKURON 200|1,5 gEPICURON 200 | 1.5 g Dicetylphosphatdicetyl 0,15 g0.15 g Cholesterolcholesterol 0,22 g0.22 g Chloroformchloroform 200 g200 g

Mittels eines Magnetrührers werden die Festsubstanzen in Chloroform gelöst. Diese Chloroformlösung wird über einen Ultrafilter steril und pyrogenfrei filtriert. (Ultrafilter Zellulosenitrat 0,05 µ der Firma Sartorius, steriler Einmalfilter Minisart 0,45 µ und 0,2 µ der Firma Satorius/Göttingen).By means of a magnetic stirrer, the solid substances in Chloroform dissolved. This chloroform solution is over a Filtered ultrafilter sterile and pyrogen-free. (Ultrafilter Cellulose nitrate 0.05 μ from Sartorius, sterile disposable filter Minisart 0.45 μ and 0.2 μ from Satorius / Göttingen).

Danach wird das Lösungsmittel bei 50°C in einem Rotations verdampfer abgezogen, so daß ein dünner Lecithinfilm im Rund kolben entsteht. Daraufhin werden 3,0 g DERUSSOL in den Rund kolben eingewogen und 200 ml destilliertes Wasser hinzugefügt.Thereafter, the solvent at 50 ° C in a rotation withdrawn evaporator, so that a thin lecithin film in the round piston is created. Then 3.0 g DERUSSOL in the round weighed out and added 200 ml of distilled water.

Der Rundkolben wird nunmehr in ein Ultraschallbad (Ultraschallbad 1800 Watt Transsonic T570/H der Firma Elma/Singen) eingehängt und bei 25°C über eine Stunde mit 1800 Watt behandelt, so daß sich der Lecithinfilm von der Kolbenwand löst und sich mit Kohlepartikeln beladene Liposomvesikel bilden.The round bottom flask is now placed in an ultrasonic bath (ultrasonic bath 1800 Watts Transsonic T570 / H from Elma / Singen) and treated at 25 ° C for one hour with 1800 watts, so that the lecithin film separates from the bulb wall and joins Carbon particles laden liposome vesicles form.

Anschließend wird eine Stufenfiltration bis hin zu einer Sterilfiltration (0,2 µ) durchgeführt, und zwar mit Filter membranen aus Zelluloseacetat mit den Porendurchmessern 1,8 µ, 1,2 µ, 0,8 µ, 0,6 µ, 0,45 µ und abschließend 0,2 µ. Die fertige Präparation wird in 10 ml sterile Injektionsflaschen portioniert, mit Gummistopfen verschlossen und zugebördelt. Die Proben werden noch auf Sterilität und Pyrogenfreiheit untersucht.Subsequently, a step filtration up to a Sterile filtration (0.2 μ) performed, with filter cellulose acetate membranes with pore diameters of 1.8 μ, 1.2 μ, 0.8 μ, 0.6 μ, 0.45 μ and finally 0.2 μ. The finished one Preparation is portioned into 10 ml sterile injection bottles, closed with rubber stopper and crimped. The samples will be still examined for sterility and pyrogen free.

Zur Abtrennung von noch freien Kohlenstoffpartikeln, die nicht in Liposomvesikel eingebaut wurden, kann noch eine Gelfiltration über Sephadex durchgeführt werden.For the separation of still free carbon particles, not can be incorporated into liposome vesicles, can still gel filtration be performed on Sephadex.

Die Farbstoffzubereitung weist eine intensive schwarze Farbe auf und kann mit allen gängigen Mitteln, Injektionsnadeln, dünnen Kanülen oder dgl. aufgezogen und zur Farbmarkierung aufgetragen werden. The dye formulation has an intense black color on and can by all common means, hypodermic needles, thin Cannulas or the like. Raised and applied to the color marking become.

Die Farbstoffzubereitung ist stabil, selbst nach drei Monaten Aufbewahrung bei 25°C ist kein Bodensatz zu beobachten.The dye formulation is stable even after three months Storage at 25 ° C is not observed sediment.

Die Markierung eines Operationsfeldes (Brustoperation einer Patientin) ergab scharf konturierte schwarze Farbpunkte, die auch bei endoskopischen Nachuntersuchungen nach sechs und nach zwölf Monaten noch klar und scharf abgegrenzt erkennbar waren.The marking of a surgical field (thoracic surgery of a Patient) revealed sharply contoured black spots, the also at endoscopic follow-up after six and after twelve months were still clearly and sharply demarcated recognizable.

Example 2

Anstatt des in Beispiel 1 beschriebenen Soja-Phospholipides EPIKURON 200 wird ein EPIKURON 100 eingesetzt, das sich durch einen höheren Gehalt an Phosphatidylethanolamin (21 bis 24%) auszeichnet.Instead of the soy phospholipid described in Example 1 EPICURON 200 uses an EPIKURON 100 which is characterized by a higher content of phosphatidylethanolamine (21 to 24%) distinguished.

Mit dieser Soja-Lecithinsorte können die 10fachen Mengen der Ausgangsstoffe von Beispiel 1 direkt in Kleinreaktoren der Firma Ika/Staufen, die mit Ankerrührwerk, Ultraturrax, Viskositäts aufnehmer, Ultrathermostaten und Vakuumanschluß ausgestattet sind, verarbeitet werden.With this soy lecithin variety can be 10 times the amount of Starting materials of Example 1 directly in small reactors of the company Ika / Staufen, with anchor agitator, Ultraturrax, Viscosity sensor, ultra-thermostats and vacuum connection are to be processed.

Nach Herstellen der Liposomvesikel wurde die zuvor beschriebene Stufenfiltration bis auf einen Porendurchmesser von 0,2 µ durchgeführt.After preparation of the liposome vesicles was the previously described Step filtration to a pore diameter of 0.2 μ carried out.

Entsprechende Farbstoffzubereitungen auf wäßriger Basis wurden mit den Lecithinen EPIKURON 180, LIPOID S100, LIPOID S75, KRYOSOME sowie mit wäßrigen Suspensionen von PRINTEX L-Rußen durchgeführt.Corresponding aqueous-based dye preparations were with lecithin EPIKURON 180, LIPOID S100, LIPOID S75, KRYOSOME and with aqueous suspensions of PRINTEX L carbon blacks carried out.

Alle erhaltenen schwarzen Farbstoffzubereitungen auf wäßriger Basis waren bei 25°C über mindestens drei Monate stabil, ohne daß sich ein Bodensatz bildete. All black pigment preparations obtained on aqueous Base were stable at 25 ° C for at least three months without that a sediment formed.

Example 3

Die Herstellungsschritte von Beispiel 1 und von Beispiel 2 wurden wiederholt, jedoch ohne die Vernetzungsagenzien Cholesterol und Dicetylphosphat.The preparation steps of Example 1 and Example 2 were repeated, but without the cross-linking agents cholesterol and dicetyl phosphate.

Es werden gleichermaßen farbintensive schwarze wäßrige Farbstoff zubereitungen erhalten, die jedoch nach mehreren Tagen einen Bodensatz zeigen. Untersuchungen haben gezeigt, daß eine gewisse Hydrolyse der Lecithinhülle der Liposomvesikel erfolgt ist.It will be equally color intense black aqueous dye received after a few days Show sediment. Investigations have shown that a certain Hydrolysis of the lecithin shell of the liposome vesicles is done.

Example 4 Producing freeze-dried liposome vesicles

Für eine Gefriergetrocknung wurde den wäßrigen Kohlen stoff-Liposompräparationen der Beispiele 1 bis 3 noch Mannit (5 g pro 100 ml) als Volumengeber hinzugefügt. Die Proben wurden in sterile 20 ml Injektionsflaschen portioniert (halbe Füllhöhe), mit einem Gefriertrocknungsstopfen versehen und bei -30°C tiefgefroren. Danach wurde im Gefriertrockner der Präparation das Wasser entzogen.For a freeze-drying was the aqueous coals fabric liposome preparations of Examples 1 to 3 or mannitol (5 g per 100 ml) as volumizer added. The samples were portioned into sterile 20 ml injection bottles (half full height), provided with a freeze-drying stopper and at -30 ° C frozen. Thereafter, in the freeze dryer of the preparation the water was removed.

Die so gewonnenen Pulver sind stabil, und zwar sowohl was die vernetzten (Beispiele 1 und 2) als auch die unvernetzten (Beispiel 3) Lipiddoppelschichten betrifft.The powders thus obtained are stable, both the crosslinked (Examples 1 and 2) and the uncrosslinked (Example 3) relates to lipid bilayers.

Die Liposomzubereitung wird erst unmittelbar vor Gebrauch mit 10 ml destilliertem Wasser rekonstruiert. Somit können auch nicht quervernetzte Liposomvesikel (Beispiel 3) zunächst über Jahre hinweg gelagert werden, diese bilden allerdings dann eine wäßrige Farbstoffzubereitung, bei der die Lipiddoppelschicht struktur nach und nach im Körper hydrolisiert. Die dadurch freigesetzten Rußpartikel bleiben im Körper immobil, so daß die Farbmarkierung auch noch nach Jahren bei Nachuntersuchungen, selbst dann, wenn die Liposomvesikel enzymatisch abgebaut worden sind, noch zu erkennen ist.The liposome preparation is not until immediately before use with 10 ml of distilled water reconstructed. Thus, too not cross-linked liposome vesicles (Example 3) over Stored for years, but these then form one aqueous dye preparation in which the lipid bilayer structure gradually hydrolyzed in the body. The result released soot particles remain immobile in the body, so that the color marking even after years at follow-up, even if the liposome vesicles have been enzymatically degraded are still recognizable.

Example 5

Anstelle von Ruß wird Zinkoxid (Firma CYANAMID, Korngröße ca. 30 nm) eingesetzt und entsprechend dem Beispiel 1 zu einer wäßrigen weißen Farbstoffzubereitung verarbeitet. Bei der Markierung von tierischem Gewebe entstanden scharf konturierte weiße Farbflecke, die auch nach mehreren Wochen noch zu erkennen waren.Instead of carbon black, zinc oxide (CYANAMID company, particle size approx. 30 nm) and according to Example 1 to a processed aqueous white dye preparation. In the Marking of animal tissue emerged sharply contoured white spots of color, which can still be recognized after several weeks were.

Claims

1. Dye preparation for marking surgical fields in living beings, in particular for endoscopic operations, characterized by a water-insoluble solid dye, which is incorporated in Liposomvesikeln.

2. dye preparation according to claim 1, characterized gekennzeich net, that the liposome vesicles are made up of lipids, similar or equal to cell membrane lipids (organ fats) of living beings are.

3. dye preparation according to claim 2, characterized gekenn records that phospholipids, glycolipids, lipopoly saccharides, lipoproteins or their subgroups as lipids available.

4. dye preparation according to claim 2 or 3, characterized characterized in that phosphatidylcholine-containing lipids of plant or animal origin, in particular Soy phospholipids, as the liposome vesicles building lipids available.

5. Dye preparation according to one of claims 1 to 4, characterized in that the two lipid layers, which build up the lipid bilayer of liposome vesicles, networked with each other.

6. dye preparation according to claim 5, characterized net, that the lipid bilayer crosslinks via substances is similar or equal to organs.

7. A dye preparation according to claim 5 or 6, characterized characterized in that the lipid bilayers via Chole sterol and / or dicetyl phosphate are crosslinked.

8. A dye preparation according to any one of claims 1 to 7, characterized in that the liposome vesicles have a Diameter of 0.2 μ have.

9. Dye preparation according to one of claims 1 to 8, characterized in that the dye is aqueous Dispersion is included in the liposome vesicle.

10. Dye preparation according to one of claims 1 to 8, characterized in that the liposome vesicles in getrock netem state as a powder.

11. Dye preparation according to claim 10, characterized net, that a volume sensor is added.

12. Dye preparation according to claim 11, characterized gekennzeich net, that as volumizer sugars, especially mannitol, available.

13. A dye preparation according to any one of claims 1 to 12, characterized in that the solid water-insoluble Dye is carbon.

14. Dye preparation according to claim 13, characterized marked records that the carbon as carbon black, especially as Furnaceruß present.

15. A dye preparation according to any one of claims 1 to 12, characterized in that the dye is opposite the human body harmless metal oxide, esp special zinc oxide, is.

16. A method for producing a dye preparation for Marking surgical fields in living beings, in particular for endoscopic operations, characterized that a water-insoluble solid dye in aqueous Dispersion into a liposome vesicle in per se known Technique is introduced, and that subsequently the liposome vesicles are sterilized.

17. The method according to claim 16, characterized in that the sterilization through a step filtration all the way to a sterile filtration through a filter with a Pore size of 0.2 μ is accomplished.

18. The method according to claim 16 or 17, characterized that the liposome vesicles dried, in particular freeze be dried.

19. The method according to claim 18, characterized in that Add to the liposome vesicles to be dried a volume generator is added.

20. The method according to any one of claims 16 to 19, characterized characterized in that soy lecithin varieties with a proportion greater than 1% phosphatidylethanolamine as liposome vesicle constitutive lipids are used.