DE2105095C3

DE2105095C3 - Dibasisches Aluminiumhistidinat

Info

Publication number: DE2105095C3
Application number: DE2105095A
Authority: DE
Inventors: Lavinio Legnano Mailand Canavesi; Franco Mailand Faustini; Franco Pavia Parisi
Original assignee: Carlo Erba SpA
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1970-02-11
Filing date: 1971-02-04
Publication date: 1979-08-16
Also published as: ZA708696B; CY677A; NL7101644A; NO130588B; BE761837A; ES387161A1; US3746700A; AU2403671A; IL35955A0; IL35955A; DE2105095B2; DK125855B; AT303032B; YU3671A; DE2105095A1; SU374829A3; CH546767A; NO130588C; MY7300246A; GB1279071A

Description

N NH

OH

CH₂-CH-C

NH₂ O—Ai

N NH

OH

(I)

10

2. Dibasisches Aluminiumhistidinat nach Anspruch I₁ dadurch gekennzeichnet, daß der Histidinrest in der L-Form vorliegt.

3. Verfahren zur Herstellung eines dibasischen Aluminiumhistidinats nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise entweder Histidin mit einem Aluminiumalkoxyd in Gegenwart von Wasser oder >o ein Histidinsalz mit einem Aluminiumsalz in einem wäßrigen Alkohol umsetzt

4. Pharmazeutische Zubereitung, gekennzeichnet durch den Gehalt eines dibasischen Aluminiumhistidinats nach Anspruch 1 oder 2 und eines pharmazeutisch geeigneten Trägers oder Verdünnungsmittels.

30

Die Erfindung betrifft dibasisches Aluminiumhistidinat der Fc rmel I

Das Histidin kann in der natürlichen L-Form, der D-Form oder einem Gemisch dieser Formen vorliegen, insbesondere in der racemischen (DL) Form.

Erfindungsgegenstand ist außerdem ein Verfahren zur Herstellung dieses Salzes, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man in an sich bekannter Weise entweder Histidin mit einem Aluminiumalkoxyd in Gegenwart von Wasser oder ein Histidinsalz mit einem Aluminiumsalz in einem wäßrigen Alkohol umsetzt. Die Art des erhaltenen Salzes wird dabei hauptsächlich durch das Molverhältnis von Histidin und dem Aluminiumalkoxyd oder Aluminiumsalz bestimmt. Bei Verwendung von 1 Mol Histidin auf 1 Mol Aluminiumalkoxyd oder 1 Mol Aluminiumsalz wird das dibasische Salz erhalten.

Das Salz ist ein weißes amorphes Pulver, das unlöslich in Wasser und organischen Lösungsmitteln, jedoch löslich in Mineralsäuren ist (beispielsweise Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Salpetersäure). Sein Molekulargewicht beträgt 215. Dieses Salz ist wirksam t>o zur Behandlung von Gastritis und von Magen- und Zwölffingerdarmgeschwüren. Die Aktivität in vivo von dibasischem Aluminiumhistidinat wurde an Versuchstieren anhand seiner Fähigkeit bestimmt, die nach verschiedenen Methoden induzierte Bildung von Ma- _hi gengeschwüren zu antagonisieren. Die Methoden zum Induzieren der Bildung von gastrischen Ulzera wurden so auseewählt. daß sie die beste Reproduzierbarkeit in Verbindung mit dem besten Zusammenhang von Dosis und Wirkung (Regression) zeigten. Die zufriedenstellendsten Ergebnisse wurden mit Ulcera erzielt, die mit Phenylbutazon, Glucose und Coffein erhalten worden waren.

Da dibasisches Aluminiumhistidinat ein Salz darstellt, war es interessant, festzustellen, welcher Anteil der Aktivität auf das Aluminium und welcher auf das Histidin zurückzuführen ist und zu prüfen, ob die Aktivität des Salzes sich von der eines Gemisches aus Aluminiumhydroxyd und Histidin unterscheidet Die in sämtlichen Tests erhaltenen Daten zeigten, daß die Aktivität von dibasischem Aluminiumhistidinat größer ist als die Summe der mit Aluminiumhydroxyd und Histidin getrennt erzielten Aktivitäten. Aluminium und Histidin zeigen daher, wenn sie im Molekül des dibasischen Aluminiumhistidinats vorliegen, einen synergistischen Effekt zum Schutz der Magenschleimhaut gegenüber ulcerogenen Mitteln. Diese Annahme wurde an durch PhenyJbutazon induzierten Ulcera durch direkten Vergleich der Aktivität von dibasischem Aluminiumhistidinat mit der eines Gemisches aus Aluminiumhydroxyd und Histidin nachgewiesen. Da diese Untersuchung die Charakterisierung der neuen Verbindung und ihre Unterscheidung von einem einfachen Gemisch aus Aluminiumhydroxyd und Histidin gestattete, soll sie nachstehend ausführlicher beschrieben werden.

Die verwendete Methode entsprach im allgemeinen der von B ο η f i 1 s et al. (Compt Rend. Soc, Biol„ 1954, 148,881).

Ratten des Stammes CFE der Rasse SPF wurden zu je zwei Tieren in einen Käfig gesetzt und während 15 Stunden hungern gelassen, wobei ihnen nur Wasser zugänglich war. Zum Zeitpunkt Null wurde den Ratten 80 mg/kg Phenylbutazon oral appliziert, und danach wurde die zu prüfende Zubereitung verabreicht. Die gleiche Behandlung wurde nach zwei Stunden wiederholt. Nach sechs Stunden wurden die Tiere durch Kehlenschnitt unter Chloroformnarkose getötet. Der bei der Prüfung durch Autopsie entnommene Magen wurde nach der Methode von Hanson und B r ο d i e (J. Appl. Physiol., 1950, 15, 291) präpariert Gastrische Läsionen wurden unmittelbar nach dem Entfernen der Mägen anhand einer willkürlichen Skala bestimmt, auf der Werte von 1 bis 7 auf Basis von Modellen aufgetragen waren, die durch mehrere Autoren vorgeschlagen worden sind (beispielsweise O s t e r I ο h et al., Arzneimittel-Forschung 1966, 16, 901). Die Zuordnung und Bestimmung der Läsionen wurde durch Personen vorgenommen, welche die an den Tieren durchgeführte Behandlung nicht kannten. Es wurde außerdem dafür Sorge getragen, eine einseitige Ausrichtung der Daten auszuschalten. Zu diesem Zweck erhielt jedes Tier eine Nummer, und der Schlüssel dafür wurde erst nach der Bestimmung angegeben. Es wurden Dosiswerte von 100 und 300 mg/kg für dibasisches Aluminiumhistidinat und 300 und 900 mg/kg für ein äquimolekulares Gemisch von Aluminiumhydroxyd und Histidin untersucht. Die Zubereitungen wurden vor der Verwendung durch ein Sieb gegeben (2900 Maschen/ cm²) und in destilliertem Wasser suspendiert.

Die Ergebnisse der Untersuchung sind in Tabelle 1 zusammengefaßt.

Tabelle 2 betrifft die Varianzanalysc, die entsprechend einer arithmetischen Berechnung für biologische Versuchswerte auf Basis zweier paralleler Linien durchgeführt wurde. Da der statistische Vergleich zu

befriedigenden Ergebnissen führte, wurde das Verhältnis der Aktivität von dibasischem Aluminiumhistidinat und dem Gemisch aus Aluminiumhydroxyd und Histidin berechnet und dafür ein Wert von 5,61 bei einer Vertrauensgrenze von 3,91 bis 8,03 für eine Wahrscheinlichkeit (P) von 0,05 festgestellt

Diese Ergebnisse zeigen, daß dibasisches Aluminiumhistidinat eine Aktivität besitzt, die etwa das 5fache der eines Gemisches von Aluminiumhydroxyd und Histidin beträgt

10 Gegenstand der Erfindung sind außerdem pharmazeutische Zubereitungen, die eine Verbindung der allgemeinen Formel (1) sowie ein pharmazeutisch geeignetes Trägermedium oder Verdünnungsmittel enthalten.

Diese pharmazeutischen Zubereitungen oder Präparate liegen vorzugsweise in einer für orale Verabreichung geeigneten Form vor, beispielsweise als Tabletten, Kapseln, Pulverpäckchen, flüssige Lösungen, Suspensionen oder Elixiere.

Tabelle 1

Vergleich der Aktivitäten von dibasischem Aluminiumhistidinat und eines äquimolaren Gemisches aus Aluminiumhydroxyd und Histidin zum Inhibieren von durch Phenylbutazon erzeugten akuten Ulcera

Ulcerogene Behandlung

Schutzbehandlung

Zweimal oral
verabreichte
Dosis
mg/kg

Zweimal oral verabreichte Dosis mg/kg	Anzahl der Tiere	Mittelwerte ± Stan dardabweichung der Bewertungspunkte, welche die Stärke der Ulkusbildung angeben
-	25	2,06 ± 0,228
-	25	5,70 ± 0,299
100	25	4,34 ±0,310
300	25	2,26 ± 0,260
300	25	5,10 ±0,252
900	25	3,56 ± 0,279

Phenylbutazon 80

Dibasisches Aluminiumhistidinat

Gemisch aus Aluminiumhydroxyd und Histidin Gemisch aus Aluminiumhydroxyd und Histidin

Tabelle 2

Varianzanalyse entsprechend einer 2 X 2-faktoriellen Berechnung für biologische Versuche anhand der Daten

gemäß Tabelle 1

Quelle der Variablen

Freiheitsgrad

Varian? Ergebnis

Wahrscheinlichkeit

Tage	4	7,7433	4,58	HS	< 0,01	= 5,61
Vergleich und Phenylbutazon	1	0,1408	< 1	NS	>0,05
gegen Anzahl der behandelten
Tiere
Arzneimittel	1	26,522.)	15,68	HS	< 0,01
Regression	1	81,902:5	48,43	HS	< 0,01
Ähnlichkeit (Parallelismus)	1	1,822:5	1,08	NS	>0,05
Anzahl X Tage	20	0,9533	< 1	NS	>0,05
Fehler	140	1,69 K!	-	-	-
HS = I lochsignifikant;
NS = Nichtsignifikant.
Aktivitälsverhältnis von —-	dibasischem	Aluminiumhistidinat

Gemisch aus Aluminiumhydroxyd und Histidin

(Verlrauensgrenzen: 3,91 bis 8,03 für P = 0,05)

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele verdeutlicht.

Beispiel 1

Frisch destilliertes Aluminiumisopropoxyd (20,42 g) und trockenes Isopropanol (200 ml) wurden in einem Dreihals-Rundkolben (500 ml), der mit einem mechanisehen Rührer, Thermometer und Rückflußkühler (mit aufgesetztem Calciumchloridrohr) versehen war, auf 40 bis 45°C erhitzt. Danach wurde mit L-Histidinbase (15,51 g) behandelt, fortgesetzt bei 50⁰C gerührt una während 10 Minuten bei 50⁰C stehengelassen. Danach wurde Wasser (3,6 g) tropfenweise zugesetzt. Die Temperatur erhöhte sich spontan auf 55 bis 6O⁰C. Der

entstandene, voluminöse weiße Niederschlag wurde während 2 Stunden bei 55 bis 60⁰C und dann während einer Stunde bei Raumtemperatur gerührt Das Produkt wurde auf einer Nutsche gewonnen urd 4 Stunden bei 50⁰C und 30 mm Hg getrocknet, und das trockene Produkt wurde zu einem feinen Pulver vermählen. Dabei- wurden 23 g dibasisches Aluminium-L-histidinat erhalten. Wassergehalt: 7,5%. Analysenwerte: gefunden (korrigierte Werte für das trockene Produkt): C: 33,04; N: 19,3; Al: 12,7%. Theoretisch erforderliche Werte für C₆Hi₀N₃U₄Al: C 33,49; N 19,54; Al 12,54%.

Beispiel 2

10,2 g Alum-niumisopropoxyd wurden in einem mit wirksamem Rührer versehenen Rundkolben geschmolzen, auf 80 bis 88° C gekühlt und mit L-Histidinbase (7,76 g), Isoprcpanol (10 ml) und danach mit entionisiertem Wasser (1,8 g) behandelt Das Rühren wurde während 5 Stunden bei 55 bis 60⁰C fortgesetzt und das Gemisch in einem Kristallisator bei 70⁰C unter 30 mm Hg getrocknet Das trockene Produkt wurde zu einem feinen Pulver vermählen. Es wurden 10,7 g dibasisches Aluminiumhistidinat mit einem Wassergehalt von 5,11% erhalten, das die gleichen physikalischchemischen Eigenschaften wie das Produkt gemäß Beispiel 1 aufwies. Analysenwerte, gefunden (korrigiert für das trockene Produkt): C 34,4; N 19,4; Al 12,1; Histidin 74%. Theoretisch erforderliche Werte für C₆H₁₀N₃O₄Al: C 33,49; N 19,54; Al 12,54; Histidin 71,65%. .

Beispiel 3

In einem 500-ml-Rundkolben wurden 200 ml Methanol unter Kühlen mit wasserfreiem Aluminiumchlorid (6,6 g) behandelt, und danach wurden tropfenweise unter Rühren L-Histidin (23,2 g) Natriunihydroxyd (6 g), Wasser (12,5 ml) und Methanol (50 ml) zugegeben. Der gebildete weiße Niederschlag wurde eine Stunde bei 6O⁰C gerührt, mit 50 ml Wasser behandelt und danach fortgesetzt 4 Stunden bei 6O⁰C gerührt Die abgekühlte Suspension wurde filtriert und das Produkt bei 50⁰C unter vermindertem Druck getrocknet Es wurden 13 g dibasisches Aluminium-L-hisiidinat erhalten.

Beispiel 4

Nach der in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrensweise und unter Verwendung von 20,42 g Aluminiumisopropoxyd, 200 ml Isopropanol, 15,51 g DL-Histidinbase und 3,6 g Wasser wurden 23 g dibasisches Aluminium-DL-histidinat erhalten. Das D-Histidinat kann in der gleichen Weise erhalten werden, wenn als Ausgangsmaterial D-Histidin verwendet wird.

Beispiel 5

Nach der in Beispiel 2 beschriebenen Verfahrensweise und unter Verwendung von geschmolzenem Aluminiumisopropoxyd (10,2 g), DL-Histidin (7,76 g), Isopropanol (10 ml) und Wasser(l,8 g) wurden 10 g dibasisches Aluminium-DL-histidinat erhalten. Das D-Histidinat kann in der gleichen Weise bei Verwendung von D-Histidin als Ausgangsmaterial hergestellt werden.

Beispiel δ

Nach der in Beispiel 3 beschriebenen Verfahrensweise und unter Verwendung von 6,6 g wasserfreiem Aluminiumchlorid, 200 ml Methanol, 23,2 g DL-Histidin, 6 g Natriumhydroxyd und \2J5 g Wasser wurden 12 g dibasisches Aluminium-DL-histidinat erhalten. Das D-Histidinat kann in der gleichen Weise erhalten werden, wenn von D-Histidin ausgegangen wird.

Claims

Patentansprüche:
1. Dibasisches Aluminiumhistidinat der Formel

CH,-CH-C

I N

NH,

O-Al

OH