DE3112333C2 - - Google Patents

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Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren für das Waschen von in Immunverfahren verwendeten festen ringförmigen Stücken, insbesondere von sogenannten EIA-Ringen, für deren Beschichtung mit einem Reagens, wie z. B. mit einer Antigen- oder Antikörperlösung, sowie für die Dosierung der Ringe.
Ein Verfahren zur photometrischen Untersuchung eines Reaktan­ ten, der in einem Reaktionsbehälter aufgenommen ist, der einen Ringkörper der gattungsgemäßen Art aufweist, ist bekannt (DE- PS 28 01 026). Verfahren dieser Art sind als sogenannte En­ zym-Immun-Verfahren bekannt.
Diese sogenannten EIA-Ringe dienen als feste Phase für den Einsatz bei Immunbestimmungen. Die EIA-Ringe müssen vor der Verwendung sensitiviert, d. h. mit einem Reagens be­ schichtet werden. Zur Erzielung eines guten Beschichtungser­ gebnisses der EIA-Ringe ist es nötig, daß die Ringe nach der Sensitivierung nicht berührt werden, um somit die Zuverlässigkeit des Ergebnisses der Be­ stimmungen nicht zu gefährden. Die EIA-Ringe müssen ins Reak­ tionsgefäß oder direkt in ein kombiniertes Reaktions- und Meß­ gefäß möglichst leicht dosiert werden können, ohne daß das am Ring befestigte Reagens beeinträchtigt wird.
Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Verfahren und eine Vorrichtung zu schaffen, mit denen die Handhabung von ringförmigen Stücken, insbesondere EIA-Ringen, beim Waschen, Beschichten und Dosieren mühelos und sicher ausgeführt werden kann.
Gelöst wird die Aufgabe gemäß der Erfindung beim Verfahren der eingangs genannten Art dadurch, daß die Ringe nacheinander in einem zu beiden Enden offenen, rohrförmigen und an der unteren Öffnung eine Verengung aufweisenden Behälterteil angeordnet werden, daß an das untere Ende des Behälterteils eine Einsaugspitze ange­ schlossen wird und an das andere Ende eine Vorrichtung, mit der durch die Einsaugspitze eine Waschlösung bzw. eine Beschich­ tungslösung in den Behälterteil eingesaugt und entsprechender­ weise daraus entfernt wird, und daß danach der die beschich­ teten Ringe enthaltende Behälterteil zu beiden Enden geschlos­ sen wird, bis das obere Ende des Behälterteils für die Dosie­ rung der Ringe zum Gebrauch derselben geöffnet und mit einer Dosiervorrichtung verbunden wird, wonach nach Entfernen der Einsaugspitze die Ringe mittels der Dosiervorrich­ tung, vorzugsweise mit Stufenbewegungen entsprechend der Do­ sierung und je einem Ring, aus dem die Verengung aufweisenden unteren Ende des Behälterteils hinausgeschoben werden.
Der Vorteil des Verfahrens besteht im wesentlichen darin, daß geeignetes Waschen und Beschichten sowie eine gute Dosierbar­ keit der Ringe erreicht wird.
Die Vorrichtung zur Ausführung des Verfahrens ist zur Lösung der Aufgabe dadurch gekennzeichnet, daß das untere Ende des Behälterteils innenseitig eine Verengung aufweist, die ein freies Fallen der Ringe aus dem Behälterteil verhindert, und für eine entfernbare Verbindung mit dem Behälterteil eine ein Verschlußmittel für die Spitze aufweisende Einsaugspitze vorgesehen ist, und daß für eine wechselweise Verbindung mit dem oberen Ende des Behälterteils eine Vorrichtung für das Waschen oder für die Beschichtung der Ringe und eine Vorrichtung für die Dosierung der Ringe und, für die Dauer der Lagerung oder Schüttelung des Behälterteils, ein Ver­ schlußpfropfen vorgesehen sind.
Die Vorrichtung kann vorzugsweise neben ihrer Verwendung im Enzym-Immun-Verfahren (EIA) auch bei Radio-, Fluoro- und Lumineszens- Immunverfahren oder solchen Immunverfahren, bei denen eine Markierung mit Viren stattfindet, verwendet werden.
Neben dem Behälterrohr besteht die zur Ausführung des Verfah­ rens verwendete Vorrichtung aus zwei Teilen, von denen man mit dem einen das Waschen und die Beschichtung der Ringe und mit dem anderen die Dosierung der Ringe in die Küvettenreihen aus­ führen kann. Die Vorrichtung kann dabei ein- oder mehrkanalig sein, je nach der Größe des Ringes und dem jeweiligem Dosie­ rungsbedarf. Die Vorrichtung bietet die Möglichkeit einer er­ folgreichen Ausführung des Verfahrens, zumal mit dieser die Ringe leicht, sicher und von der Hand unberührt übertragen werden können, d. h. es ist ein geeigneter Applikator für die Dosierung der Ringe sowie eine Beschichtungs- und Wasch­ apparatur für die Ausführung einer beherrschbaren Sensitivie­ rung bzw. Beschichtung der Ringe geschaffen worden, mit der sogar die Verwendung einer Kovalenzbildung zwischen dem Reagens und der festen Phase möglich wird.
Die Erfindung wird nachfolgend unter Bezugnahme auf die Zeich­ nungen eingehend beschrieben. Darin zeigt
Fig. 1 den Behälterteil als Seitenansicht und teilweise geschnitten dargestellt,
Fig. 2 den Behälterteil als Seitenansicht und als mit der Vorrichtung verbunden dargestellt, mit der Flüssigkeit in den Behälterteil eingesaugt wird,
Fig. 3 den Behälterteil als mit der Dosier­ vorrichtung verbunden, als Seitenansicht und als geschnitten dargestellt, und
Fig. 4 einen in eine Küvettenreihe eingeordneten EIA-Ring sowie eine Schiebevorrichtung für die Anbringung des Ringes in die richtige Lage in der Küvettenreihe dargestellt.
Aus der Fig. 1 geht der zylinderförmige bzw. rohrförmige, zu beiden Enden offene Behälterteil 3 hervor, dessen unteres Ende innenseitig eine derartige Verengung 4 aufweist, die das Fallen der EIA-Ringe 1 aus dem Behälterteil 3 verhindert. Die Verengung 4 kann ein aus der Wandung des Behälterteils ins Innere hervorragender ringförmiger Vorsprung, Flansch oder desgleichen sein. Mit dem unteren Ende des Behälterteils 3 ist an der Außenseite lösbar eine ein Verschluß­ mittel 6 aufweisende Einsaugespitze 5 verbunden. Das Verschlußmittel 6 besteht aus einer Verschlußkappe, die durch ein Verbindungsband 7 an der Einsaugspitze 5 be­ festigt ist. Für Verbindung mit dem oberen Ende des Behälterteils 3 ist ein Verschlußpfropfen 2 vorgesehen, mit dem der Behälterteil 3 z. B. für die Dauer seiner Auflagerung bzw. Schüttelung geschlossen werden kann.
Die Wasch- und Beschichtungsvorrichtung 8 ist eine Vorrichtung, mit der man Flüssigkeit in den Behälter­ teil 3 einsaugen und daraus entfernen kann. Die Vorrich­ tung 8 kann z. B. aus einer pipettenähnlichen Vorrichtung bestehen, die am unteren Ende einen Anschluß für das obere Ende des Behälterteils 3 aufweist, durch welchen Anschluß eine Verbindung zum Zylinderraum der Vorrich­ tung 8 hergestellt ist, wo ein eine Kolbenstange 11 aufweisender Kolben angeordnet ist. Nachdem die EIA-Ringe 1 gemäß der Fig. 1 nacheinander in den Behälterteil 3 verlegt worden sind und die Einsaugespitze 5, mit dem Verschlußpfropfen 6 gemäß der Fig. 2 geöffnet, ans untere Ende des Behälterteils 3 angebracht worden ist, und nachdem der Verschlußpfropfen 2 vom oberen Ende des Behälterteils 3 entfernt worden ist, kann der Behälterteil 3 mit Reibungs­ verbindung in den unteren Teil der Wasch- und Beschichtungs­ vorrichtung 8 gemäß der Fig. 2 geschoben werden. Dabei befindet sich der Kolben der Vorrichtung 8 in der unteren Lage. Gemäß der Fig. 2 kann aus dem Behälter 9 durch die Einsaugespitze 5 eine Flüssigkeit in den Behälterteil 3 mittels der Vorrichtung 8 eingesaugt werden, indem der Kolben der Vorrichtung 8 mittels der Kolbenstange 11 und des Knopfes 14 nach oben gezogen wird. Entsprechend erfolgt die Entleerung des Behälterteils 3 von Flüssigkeit dadurch, daß der Kolben mittels des Knopfes 14 und der Kolbenstange 11 in die untere Lage gedrückt wird. In dieser Weise kann die Beschichtung der EIA-Ringe z. B. mit einer Antigen- oder Antikörperlösung ausgeführt werden. Ebenso kann ein effektives Waschen der EIA-Ringe ausgeführt werden. Die EIA-Ringe können gut im Behälterteil 3 auf­ bewahrt werden, wenn der Behälterteil zu beiden Enden dicht verschlossen ist. Dabei kann sich im Behälterteil z. B. Be­ schichtungslösung oder irgendeine sonstige vom Gesichts­ punkt des Verfahrens erforderliche Lösung befinden. Der Behälterteil 3 paßt dicht an die Wasch- und Beschichtungs­ vorrichtung 8, so daß das Saugen der Lösung hygienisch und sicher ist, auch wenn die einzusaugende Lösung infektiös oder sonst schädlich für den Ausführer der Arbeit wäre.
Die Vorrichtung 10 für die Dosierung der EIA- Ringe geht aus der Fig. 3 hervor, wo der Behälterteil 3 mit Reibungsverbindung an den unteren Teil der Dosiervor­ richtung 10 angeschlossen ist. Innerhalb des Rahmenteils 15 der Dosiervorrichtung 10 ist eine Schiebestange 16 angeordnet, um die es im unteren Teil des Rahmenteils 15 eine Dichtung 17 gibt, deren Zweck ausschließlich die Erzeugung einer ausreichenden Reibung zwischen der Schiebe­ stange 16 und dem Rahmenteil 15 ist, so daß die Schiebe­ stange 16 im Verhältnis zum Rahmenteil 15 nur durch die Wirkung des Druckknopfes 18 verschoben werden kann. In der Fig. 3 befindet sich die Schiebestange 16 in der oberen Lage. Wenn der Druckknopf 18 nach unten gedrückt wird, kann der Schiebehebel 19 als von der Feder 20 gedrückt sich gegen die Verzahnung 21 der Schiebestange 16 drehen, und wenn der Druckknopf 18 weiter nach unten gedrückt wird, schiebt der Schiebehebel 19 mittels der Verzahnung 21 die Schiebestange 16 nach unten, und die Schiebestange 16 schiebt weiter vor ihr die EIA-Ringe 1 im Behälterteil 3. Eine Druckbewegung des Druckknopfes 18 kann zum Beispiel der Verschiebung eines Zahnabstandes mittels der Schiebe­ stange 16 entsprechen, wobei der Zahnabstand der Höhe eines EIA-Rings 1 entsprechen muß. Nach dem Drücken des Druckknopfes 18 bringt die Feder 22 den Druckknopf wieder in die obere Lage. Weil der Schiebehebel 19 mit einer Gelenkverbindung 23 am Stiel 24 des Druckknopfes befestigt ist, steigt auch der Schiebehebel 19 in die obere Lage. Wenn das obere Ende 25 des Schiebehebels 19 den Flansch 26 des Rahmenteils 15 der Dosiervorrichtung 10 trifft, dreht sich der Schiebehebel 19 los von der Verzahnung 21 der Schiebestange 16. Durch wiederholtes Drücken des Druck­ knopfes 18 kann man aus dem Behälterteil 3 EIA-Ringe z. B. in eine Küvette oder Röhre oder Küvettenreihe oder Röhren­ reihe usw. dosieren. Nach der Dosierung wird der Behäl­ terteil 3 von der Dosiervorrichtung 10 getrennt, und die Schiebestange 16 der Dosiervorrichtung wird in die obere Lage fertig für neue Dosierung geschoben. Die Dosier­ vorrichtung kann auch so hergestellt werden, daß sie mehrere EIA-Ringe auf einem Mal herausschiebt, wenn ein solcher Vorgang erforderlich ist. Der Zweck der Dosiervorrichtung 10 ist, die Dosierung der Ringe 1 so ausführen zu können, daß sie nicht mit der Hand berührt werden - so wie auch beim Beschichten und Waschen der Ringe. Die Apparatur kann selbstverständ­ lich auch automatisch ausgeführt werden, indem Elektronik­ bauteile für die Steuerung der mechanischen Teile eingesetzt werden, z. B. mit Hilfe vom Mikroprozessor.
Der Behälterteil 3 wird selbstverständlich je nach der Größe der zu dosierenden EIA-Ringe gewählt.
Die Apparatur weist außerdem einen Stößel 13 gemäß der Fig. 4 auf, mit dem der von der Dosier­ vorrichtung 10 dosierte EIA-Ring 1 bis zum Boden der Röhre, Küvette 12 oder eines sonstigen im Verfahren benutz­ ten Gefäßes sicher und ohne Beschädigung der Beschichtung des Ringes geschoben werden kann.

Claims (2)

1. Verfahren für das Waschen von in Immunverfahren verwende­ ten festen ringförmigen Stücken, insbesondere von sogenannten EIA- Ringen, für deren Beschichtung mit einem Reagens, wie z. B. mit einer Antigen- oder Antikörperlösung, sowie für die Dosierung der Ringe, dadurch gekennzeichnet, daß die Ringe nach­ einander in einem zu beiden Enden offenen, rohrförmigen und an der unteren Öffnung eine Verengung (4) aufweisenden Behälter­ teil (3) angeordnet werden, daß an das untere Ende des Behäl­ terteils eine Einsaugspitze (5) angeschlossen wird und an das andere Ende eine Vorrichtung (8), mit der durch die Einsaug­ spitze (8) eine Waschlösung bzw. eine Beschichtungslösung in den Behälterteil (3) eingesaugt und entsprechenderweise daraus entfernt wird, und daß danach der die beschichteten Ringe (1) enthaltende Behälterteil (3) zu beiden Enden geschlossen wird, bis das obere Ende des Behälterteils (3) für die Dosie­ rung der Ringe (1) zum Gebrauch derselben geöffnet und mit einer Dosiereinrichtung (10) verbunden wird, wonach nach Ent­ fernen der Einsaugspitze (5) die Ringe (1) mittels der Dosiervorrichtung (10), vorzugsweise mit Stufenbewegungen ent­ sprechend der Dosierung von je einem Ring, aus dem die Veren­ gung (4) aufweisenden unteren Ende des Behälterteils (3) hin­ ausgeschoben werden.
2. Vorrichtung zur Ausführung des Verfahrens nach Anspruch 1, die aus einem zu beiden Enden offenen rohrförmigen Behälter­ teil besteht, dadurch gekennzeichnet, daß das untere Ende des Behälterteils (3) innenseitig eine Verengung (4) aufweist, die ein freies Fallen der Ringe (1) aus dem Behälterteil (3) verhindert, und für eine entfernbare Verbindung mit dem Be­ hälterteil eine ein Verschlußmittel für die Spitze (6) auf­ weisende Einsaugspitze vorgesehen ist, und daß für eine wech­ selbare Verbindung mit dem oberen Ende des Behälterteils (3) eine Vorrichtung (8) für das Waschen oder für die Beschichtung der Ringe und eine Vorrichtung (10) für die Dosierung der Ringe und, für die Dauer der Lagerung oder Schüttelung des Behälterteils (3), ein Verschlußpfropfen (2) vorgesehen sind.
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