DE3214317A1 - Mikrotiterplatte - Google Patents

Description

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BEHR1NGWERKE AKTIENGESELLSCHAFT Hoe 82/B 00 7 - Ma ANR - 1 000 764 Dr.Ha/Bl.

Mϊkrotiterplatte

Die Erfindung betrifft eine Mikrotiterplatte, bei der sich Randbezirke und Mittelteil gleichmäßig erwärmen, wenn sie auf eine Unterlage mit höherer Temperatur aufgelegt wird, so daß kein Temperaturgradient zwischen Reaktions!ösungen in Gefäßen am Rand und solchen im Mittelteil entsteht. Diese Platte hat demnach. Eigenschaften, die den sogenannten Rahmeneffekt (edge effect) herkömmlicher Platten vermeiden.

Dieser Rahmeneffekt ist als Fehlerquelle im Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay CELISA) bekannt, wenn dieser auf Mikrotiterplatten ausgeführt wird (Denmark und Chessum, Med. Lab. Sei. (1978) ~55_, 227). Die Verfälschung des Testergebnisses besteht in einer Erhöhung der Färbintensitat in den Randvertiefungen der verwendeten Mikrotiterplatten, obwohl von der Testanlage her ein nahezu gleicher Extinktionswert in allen Vertiefungen zu erwarten wäre.

Diese typische Erhöhung der Färbintensitat ist nicht mit den allgemein als "Ausreißer" bezeichneten Einzelabweichungen zu verwechseln, die zufallsverteilt über die Mikrotiterplatte aufzutreten scheinen. Hier sind Fehler bei der Testdurchführung, der Plattenbeschichtung oder der Materialquälitat der Platte die Ursachen.

Der Rahmeneffekt dagegen wird durch ein Temperaturgefälle zwischen den Randvertiefungen und den übrigen Näpfchen der Mikrotiterplatte während der immunologischen Reaktionen und der Enzymreaktion des ELISA verursacht (Burt et al., ü. Immunol. Meth. (1979) 31, 231).

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Bei einer in den Randvertiefungen bis zu 1,6 C höheren Temperatur verlaufen dort temperaturabhängige Reaktionen wie die Antigen-Antikörper-Bindung oder eine Enzymreaktion schneller als in der übrigen Platte. Dies manifestiert sich in einer erhöhten Färbintensitat der betroffenen Näpfchen im ELISA.

Der Temperaturgradient zwischen Randvertiefungen und Plattenmitte entsteht durch die schnellere Erwärmung des Plattenrandes. Dies kann sowohl mit der Auflage der Platte auf einegut wärmeleitende Unterlage, beispielsweise dem Metallboden eines Brutschrankes, als auch mit der Wärmeisolierung der Plattenmitte durch das Luftpolster unter der Platte erklärt werden. Je höher die Inkubationstemperaturen und je kürzer die Inkubationszeiten, desto stärker ist normalerweise der Rahmeneffekt ausgeprägt. Durch Aufeinanderstapeln der Platten läßt sich der Rahmeneffekt mindern und durch blasenfreies Aufschwimmen der Mikrotiterplatte in einem Warmwasserbad oder Verwendung geeigneter Heizgebläse eliminieren.

Die beiden letztgenannten Möglichkeiten sind jedoch entweder schwierig durchzuführen oder technisch aufwendig (Oliver et al., J. Immunol. Meth. (1981) ¹Vl., 195). '

Die Erfindung hat sich die Aufgabe gestellt, eine Mikrotiterplatte, das heißt eine Vorrichtung, die im wesentlichen aus einem plattenförmigen Träger mit mehreren Gefäßen besteht, zu schaffen, die eine zeitlich gleichförmige Temperaturveränderung des Inhalts aller Gefäße gewährleistet, wenn die Vorrichtung auf eine Unterlage mit einer höheren Temperatur aufgebracht wird.

Es wurde nun überraschenderweise gefunden, daß die Entstehung eines Temperaturgradienten zwischen den Randbezirken und dem Inneren einer Mikrotiterplatte beim Erwärmen

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durch eine geeignete Formgebung des Plattenmaterials vermieden werden kann.

Gegenstand der Erfindung ist, daß die Form einer herkömmliehen Mikrotiterplatte so verändert wird, daß die Erwärmbarkeit der Randvertiefungen über den Plattenrand stark reduziert und gleichzeitig die Erwärmbarkeit der übrigen Plattenvertiefungen erhöht wird. Beide Wärmetransporteffekte wirken in der Weise zusammen, daß der Rahmeneffekt eliminiert wird.

Dies wird erfindungsgemäß durch die im folgenden näher beschriebenen oder ähnliche, wirkungsgleiche Formveränderungen einer herkömmlichen Mikrotiterplatte erreicht, wobei

Figur 1 eine Aufsicht auf eine erfindungsgemäße Platte,

Figur 2 die Ansicht von unten dieser Platte,

Figur 3 eine Seitenansicht dieser Platte und

Figur h den Schnitt IV - IV in der Figur 1 zeigt :

a) Der obere Plattenrand (2) der hikrotiterplatte wirdbis auf wenige Verbinduiigspunkte (3), die von den.gespitzten Enden von Stegen C5) gebildet werden, vom Plattenteil CO getrennt, so daß ein umlaufender Durchbruch C¹O entsteht;

b) gegebenenfalls sind diese senkrecht zur Plattenobel— fläche stehenden Stege C5) so hoch wie möglich gehalten, ohne die Stapelfähigkeit der Mikrotiterplatte zu beeinträchtigen. Die Stege können zwischen der ersten und zweiten, dritten und vierten, fünften und sechsten, siebten und achten, neunten und zehnten sowie elften und zwölften Reihe der Gefäße (8) angelegt sein, wie in den Figuren 1 und 2 dargestellt. Die Stege C5) können aber auch senkrecht zu den Gefäßreihen zwischen den Gefäßzeilen A bis H angeordnet sein;

c) gegebenenfalls werden Aussparungen (6), vorzugsweise kleine Kerben, an der Auflagekante des unteren Plattenrandes (7) so angebracht, daß sie sich zwischen den Stegen (5) gegenüberliegen.

Wirkungsweise und Verbesserungen

Der Durchbruch 4 reduziert die Wärmeübertragung des sich schnell erwärmenden Plattenrandes auf die Randgefäße.

Durch die Maßnahmen unter a, b und c wird auch bei übereinandergestapelten Platten ein schneller Abbau des Luftpolsters unterhalb jeder Platte erzielt(Fal1schachtprinzip für die kältere Luft). Hierdurch können sich die freistehenden und großflächigen Stege schneller erwärmen.

Durch die Maßnahme unter b) geben die erwärmten Stege die Wärme gleichmäßig an die jeweils benachbarten Gefäße ab, wobei die Erwärmung durch den Steg selbst schneller als über die Verbindungspunkte mit dem Plattenrand erfolgt. Der Resteinfluß des Plattenrandes wird durch die Abschrägung des Steges zum Plattenrand hin ausgeglichen.

· Die Summe dieser Maßnahmen el iminiert den Rahmeneffekt.

Die erfindungsgemäße Mikrotiterplatte ist verwindungsstabil, automatengerecht, stapelbar und beschriftbar.

Sie ist besonders für den Gebrauch in Wärmeschränken geeignet.

Claims (9)

1. 32H317

   Patentansprüche:

   ./ M i krot i terpl atte mit einem aufliegenden Rand und einem mit Gefäßen versehenen Mittelteil, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine gleichmäßige Temperaturveränderung des Inhalts aller Gefäße gewährleistet, wenn sie auf eine Unterlage mit höherer als der Temperatur der Platte aufgelegt wird.
2. 2. Mikrotiterplatte, insbesondere nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Rand und Mittelteil durch einen Durchbruch weltgehend voneinander getrennt und nur an einigen Stellen miteinander verbunden sind.
3. 3. Mikrotiterplatte, insbesondere nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß an der Plattenunterseite in einer Richtung verlaufende Stege angeordnet sind.
4. ^f. Mi krot i terpl atte, insbesondere nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß am aufliegenden Plattenrand Aussparungen vorhanden sind.
   20
5. 5. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, .daß der Durchbruch zwischen Rand und Mittelteil so nahe wie möglich an den Gefäßen am Rand angeordnet

   i st.
   25
6. 6. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2 und/oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß der Durchbruch zwischen Rand und Mittelteil zu Aussparungen erweitert ist.
7. 7. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Gefäße in Reihen angeordnet sind und zwischen jeweils zwei Reihen ein senkrechter Steg angebracht ist.

   - er -
8. 8. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2 und/oder 3,dadurch gekennzeichnet, daß die Enden der Stege gespitzt sind und Rand und Mittelteil verbinden.
9. 9. Mikrotiterplatte nach Anspruch 2 und/oder k, dadurch gekennzeichnet, daß die Aussparungen am Plattenrand sich zwischen den Stegen gegenüberliegen und kerbförmig ausgebildet sind.