DE3247608A1

DE3247608A1 - Teststreifen

Info

Publication number: DE3247608A1
Application number: DE19823247608
Authority: DE
Inventors: Wolfgang Reinhold Dr.rer.nat. 6842 Bürstadt Knappe; Anselm Dr.rer.nat. 6943 Birkenau Rothe; Heinz Friedrich Dr.rer.nat. 6700 Ludwigshafen Trasch
Original assignee: Boehringer Mannheim GmbH
Current assignee: Roche Diagnostics GmbH
Priority date: 1982-12-23
Filing date: 1982-12-23
Publication date: 1984-07-05
Also published as: CA1219797A; ATE22996T1; US4604264A; EP0113896B1; EP0113896B2; ES8501529A1; EP0113896A1; US4820489A; DE3367028D1; ES528322A0; JPS59120958A; JPH0782002B2

Description

BOEHRINGERMANNHEIMGMBH ' int.Nr. 2533

. 3-

Teststreifen

Testpapiere, das heißt mit Reagenzien imprägnierte Papierstreifen, werden in der analytischen Chemie seit langem zum Nachweis von anorganischen Ionen, organischen Substanzen und zur pH-Bestimmung in Flüssigkeiten und Gasen verwendet. Eine Weiterentwicklung sind die Teststreifen oder Teststäbchen, bei denen das imprägnierte Reagenzpapier auf einer als Griff dienenden Kunststoffolie befestigt ist. Diese gewinnen in der analytischen Chemie, wie der Produktkontrolle, der Wasser- und Abwasseruntersuchung und insbesondere in der klinischen Chemie bei der Untersuchung von Körperflüssigkeiten steigende Bedeutung. Bisher waren dabei die Reagenzien üblicherweise auf Papier imprägniert. Solche Teststreifen erlaubten eine rasche, aber nur semiquantitative visuelle Bestimmung, mittels entsprechender Farbvergleichsfeider. Die natürlichen Ungleichmäßigkeiten der Papiere und die dadurch bedingte ungleichmäßige Streuung des Lichts erschwerten eine quantitative, remissionsphotometrische Auswertung.

Mit dem Bedarf nach quantitativen Meßergebnissen unter j>5 Anwendung der Teststreifen auch auf die Blut- und Serenanalytik wurde zunehmend die Verwendung von Reagenzfilmen üblich, deren Hauptvorzug die hohe Gleichmäßigkeit der Reagenzienschicht ist. Durch die Verwendung von Reagenzienfilmen und remissionsphotometrische Auswertung der Farbreaktion ist es nunmehr möglich, mit Teststreifen Meßergebnisse in der Qualität der naßchemischen Methoden zu erzielen.

■'■<*.

Beispiele für Teststreifen auf Filmbasis sind beschrieben in der DE-AS 15 98 153, zur Bestimmung von vorzugsweise Glucose im Blut, oder in der DE-OS 31 18 381, in der ein Teststreifenaufbau beschrieben ist, der zur Bestimmung von Glucose in Harn die Verwendung eines solchen Reagenzienfilmes auch bei undosiertem Eintauchen*in die Probeflüssigkeit ermöglicht. In der DE-OS 31 30 749 schließlich werden Teststreifen zur Bestimmung von Blutparametern beschrieben, die zusätzlich zum Reagenzfeld - vorzugsweise au: Filmbasis - eine vorgeschaltete Erythrozytenabtrennung mittels eines Glasfaservlieses besitzen und eine Analyse direkt aus Vollblut erlauben.

Der Reagenzfilm ist bei diesen Teststreifen entweder direkt auf der als Griff dienenden Kunststoffolie angebracht oder befindet sich auf einer zusätzlichen Trägerfolie, die ihm die bei der Herstellung und Verarbeitung nötige Stabilität verleiht.

Bei Reagenzienfilmen, die im Vergleich zu den meist flauschigen und "offenen" Papieren eine glatte Oberfläche und einen nur geringen Anteil an Hohlräumen besitzen, finden sich jedoch aus eben diesen Gründen auch gewisse Nachteile.

So kann es bei Teststreifen mit relativ geschlossenem Aufbau, wie sie in DE-OS 31 30 749 beschrieben sind, Schwierigkeiten bereiten, einer sauerstoffverbrauchenden Reaktion den dafür nötigen Sauerstoff in der geforderten kurzen Reaktionszeit ausreichend rasch zuzuführen. Die dort beschriebenen Reaktionsschichten stehen nämlich nicht in direktem Kontakt mit der Luft, sondern werden auf ihrer Oberseite durch ihre sauerstoffundurchlässige, durchsichtige Trägerfolie von vornherein abgeschlossen und ebenfalls auf ihrer Unterseite nach Andruck der Reagenzienschicht auf das Blutabtrennvlies.

Um eine ausreichende Sauerstoffversorgung zu gewährleisten, ist es deshalb nötig, durch aufwendige Maßnahmen im Meßgerät ein zeitweises Wiederabheben der Reagenzienschicht vom Trennvlies vorzusehen. Dies übt zudem einen ungünstigen Einfluß auf die Qualität der Meßwerte aus.

Auch bei dem obenerwähnten Harnteststreifen gemäß DE-OS 31 18 381 ergaben sich zwei Phänomene, die auf die Eigenschaften von Reagenzienfilmen zurückzuführen sind. Bei diesen Harnteststreifen zur Bestimmung von Glucose wird der Reagenzienfilm auf seiner Trägerfolie über ein verzögert saugendes Papier mittels eines dünnen Abdecknetzes auf der Griffolie befestigt. Es zeigte sich, daß bei unsachgemäßer Handhabung bisweilen eine Luftblase zwischen Abdecknetz und Reagenzfilmoberfläche eingeschlossen blieb und eine Farbreaktion verhinderte. Andererseits konnte es vorkommen, daß beim Absaugen größerer Mengen überschüssigen Harns ins verzögernd saugende Papier an den Absaugkanten unschöne Farbränder entstanden, die zu FehlInterpretationen führten.

Die Luftblasenbildung konnte nur durch eine kostspielige Netzmittelbehandlung des Abdecknetzes verhindert werden, eine Lösung des Farbrandproblems war nur durch eine Beschränkung auf kleine Testfeldformate möglich.

Es wurde nun überraschend gefunden, daß sich die eben genannten Probleme einfach und vollständig durch die in den Ansprüchen näher beschriebenen Maßnahmen beheben lassen. Der Reagenzienfilm wird danach nicht auf eine feste

Trägerfolie, sondern auf eine als multifiles Gewebe oder 30

Vlies ausgebildete Trägerschicht, vorzugsweise aus Polyester oder Polyamid, beschichtet. Zu diesem Zweck wird eine möglichst konzentrierte Suspension beziehungsweise Dispersion der filmbildenden Kunststoffe, der notwendigen

Reagenzien, Pigmente sowie sonstiger Füll- und Hilfsstoffe 35

in geeigneten Lösungsmitteln, vorzugsweise Wasser, mit einer Rakel oder Düse in dünner Schicht (20 - 500 /U₅ vorzugsweise 50 - 200 ,u) auf das Gewebe aufgebracht und

getrocknet. Es ergeben sich trockene Filme von 10 - 200 ,u, vorzugsweise 15 - 100 ,u. Es ist kennzeichnend für die Erfindung, daß die Beschichtungsmasse im wesentlichen auf der Oberseite des Gewebes verbleibt, während ins Innere des Gewebes und an seine Unterseite je nach Auftragsmenge und Massenbeschaffenheit wenig bis überhaupt keine Beschichtungsmasse gelangt. Selbstverständlich sind auch andere Träger oder Gewebe aus anderen Rohstoffen wie Baumwolltuch, Vliese, Papiere usw. geeignet, solange sie den Anforderungen _an Gleichmäßigkeit, Saugvermögen, Durchlässigkeit usw. genügen.

Monofile Gewebe, deren Einbettung in Beschichtungsmassen in

der DE-OS 28 25 636 beschrieben wurde, sind für die 15

erfindungsgemäße Anwendung nicht geeignet. Einerseits schlägt die Beschichtungsmasse während der Beschichtung durchs Gewebe durch, so daß eine zusätzliche, später zu verwerfende Trägerfolie eingesetzt werden muß. Andererseits

tritt bei monofilen Geweben der beschleunigende Effekt bei 20

sauerstoffverbrauchenden Reaktionen nicht auf. Schließlich sind gleichmäßige Filme erst mit relativ hohen Schichtdicken möglich und besitzen eine untragbar lange Reaktionszeit und auch nicht den erfindungsgemäßen

typischen Unterschied zwischen Gewebeseite und Schichtseite. 25

Die für den Aufbau des Reagenzienfilms geeigneten Reagenzien, Filmbildner und Hilfsstoffe sind die gleichen, für Reagenzfilme gebräuchlichen, wie sie z.B. in den „ DE-AS 15 98 153, DE-OS 29 10 134 oder DE-OS 31 18 381 beschrieben sind.

Geeignete Filmbildner sind bevorzugt organische Kunststoffe, wie Polyvinylester, Polyvinylacetate, Polyacrylester, Polymethacrylsäure, Polyacrylamide,

Polyamide, Polystyrol, Mischpolymerisate, z.B. von Butadien und Styrol oder von Maleinsäureester und Vinylacetat, Cellulose und Cellulosederivate, jedoch können auch andere

filmbildende, natürliche und synthetische organische Polymere sowie Mischungen derselben bevorzugt in Form von wässrigen Dispersionen, verwendet werden. Die Filmbildner können auch in organischen Lösungsmitteln gelöst sein, z.B.

ein Copolymerisat aus Vinylchlorid und Vinylpropionat in Essigester.

Die für die Nachweisreaktion erforderlichen Reagenzien, Pigmente und sonstigen Hilfsstoffe, werden normalerweise direkt in die Dispersion gegeben. Sofern vorteilhaft, kann der gebildete Film aber mit ihnen auch imprägniert werden. Auch eine Vorimprägnierung der zugesetzten Pigmente mit den Reagenzien ist möglich. Die Verfahren lassen sich auch derart kombinieren, daß z.B. bestimme Bestandteile in die Dispersion gegeben werden und andere auf den Film nachimprägniert werden. Dadurch läßt sich eine gewisse, räumliche Trennung der Bestandteile erreichen, was zu stabileren oder reaktiveren Testen führen kann. Weiterhin läßt sich eine Trennung dadurch bewirken, daß auf eine erste Filmschicht eine zweite mit unterschiedlicher Zusammensetzung aufgebracht wird.

Sofern nötig, lassen sich Verdickungsmittel, Emulgatoren, Dispergiermittel, Pigmente, Weichmacher, Netzmittel usw., zusetzen.

Dispergiermittel, Emulgatoren und Verdickungsmittel dienen zum Herstellen und Stabilisieren der Dispersionen.

Pigmente, wie z.B. Titandioxid, Siliziumdioxid verbessern die Remissionseigenschaften von Filmen, indem sie für möglichst geringe Transparenz und erhöhte Remission der Filme sorgen. Dies ist insbesondere dann von Vorteil, wenn die so erhaltenen diagnostischen Prüfmittel

remissionsphotometrisch ausgewertet werden sollen. 35

Mit Weichmachern lassen sich die Eigenschaften der Filmbeschichtungsmassen sowie der Filme optimieren. Z.B.

werden ihre Standfestigkeit, ihre Viskosität, ihre Haftung auf der zu beschichtenden Unterlage unter anderem verbessert.

· Netzmittel werden eingesetzt, um eine bessere Benetzung des Films durch das Probengut zu erreichen. Sie können gleichzeitig auch Reaktionen katalysieren oder Rezepturen stabilisieren oder die Reaktionsfarbe brillanter und kontrastreicher machen.

Die hierin beschriebenen Teststreifen werden vorzugsweise beim Nachweis der Inhaltsstoffe von Körperflüssigkeiten, wie Harn, Blut, Serum,Stuhlsaft und Speichel eingesetzt, können jedoch in geeigreter Modifizierung auch in anderen wässrigen Flüssigkeiten wie Trinkwasser, Abwasser etc. und gegebenenfalls auch in organischen Lösungsmitteln, in denen sie unlöslich sind, eingesetzt werden.

Die erfindungsgemäß beschichteten Gewebe lassen sich in allen Fällen vorteilhaft einsetzen, in denen bisher eine mit einem Reagenzfilm beschichtete Folie eingesetzt wurde. Bevorzugt werden sie anstelle der Filme in Vorrichtungen gemäß DE-OS 31 18 381 und 31 30 749 verwendet.

Bei Vorrichtungen gemäß DE-OS 31 30 749 erhält man durch die Verwendung von Gewebe als Unterlage überraschend eine raschere Reaktion bei sauerstoffverbrauchenden Reaktionen,

möglicherweise weil durch die Gewebestruktur zusätzlich Sauerstoff bereitgestellt wird. Bei Vorrichtungen gemäß DE-OS 31 18 381 fließt ein eventueller Flüssigkeitsüberstand rascher und ohne Bildung von Farbrändern ab. Auch bei raschem Eintauchen oder ungenügendem Abstreifen ist der Kontakt zwischen Reagenzfilm und Abdecknetz so eng, daß sich keine störenden Luftblasen mehr ausbilden können. Die erfindungsgemäß beschichteten Gewebe lassen sich natürlich auch direkt auf die als Griff dienende Kunststoffolie aufkleben oder aufsiegeln, erfordern dann jedoch wie Teststreifen mit üblichen Reagenzfilmen auf Trägerfolien ein sorgfältiges Abstreifen überschüssiger Testlösung, da diese sonst auf der glatten Oberfläche in Tröpfchen zurückbleibt und zu fleckigen Reaktionen führt. Unterlegung mit einem verzögert saugfähigem Material bietet insofern keinen Vorteil, da die Flüssigkeit nur sehr langsam durch die Kunststoffschicht durchdringt.

Im Vergleich zu den auch heute noch überwiegend verwendeten Teststreifen mit imprägniertem Papier, bieten die filmbeschichteten Gewebe folgende Vorteile:

Durch die Bestandteile von Beschichtungen (kolloidale

Verdickungsmittel., Dispersionen) und relative Lösungsmittelarmut im Vergleich zu Tränklösungen können in homogener Lösung miteinander unverträglicher Reagenzien über mehrere Stunden hinweg nebeneinander

stabil bleiben.
30

Durch die Verwendung von pigmentierten Beschichtungsmassen ist für die remissionsphotometrische Auswertung ein Hintergrund

mit einem Weißgrad zu erzielen, der durch Tränkung 35

eines Papiers nicht erreicht werden kann.

Im Gegensatz zu imprägnierten Papieren, bei denen die Inhomogenität des Papiers eine photometrische

ORIGINAL·

*■■ 10-

Auswertung stört, ist das beschichtete Gewebe homogen,(da die Schicht im wesentlichen auf der Oberseite liegt und die gleiche Homogenität aufweist wie ein auf einer Folie aufgetragener Film. So sind kürzere Reaktionszeiten erzielbar, da ein dünner Film verglichen mit einem saugfähigen Träger (Papier) mit nur einem Bruchteil der Dicke mit Substrat beschickt wird, somit rasch reagiert und praktisch die ganze entstandene Reaktionsfarbe zum Meßergebnis beitragen kann. Andererseits besteht die Möglichkeit einer vorgeschalteten Reaktion, indem das Gewebe vor der Beschichtung mit einem zusätzlichen Reagenz getränkt wird oder die Testlösung über einen oder mehrere saugfähige Träger auf das Gewebe und den Reagenzf iliri übertragen wird.

BAD ORIGINAL

Beispiel 1

Herstellung eines Teststr,eifens zum Nachweis von Glucose im Blut

35 KU Glucoseoxidase

200 KU Peroxidase

15 ml 0,5 m Phosphatpuffer pH 5

0,3 g Na-Alginat

25 g Polyvinylpropionat-Dispersion 5o% in Wasser

0,5 g Tetramethylbenzidin (3,3',5,5')

0,2 g Phenylsemicarbazid

1 g Dioctylnatriumsulfosuccinat

6 ml Methoxyäthanol

20 g Titandioxid
35 ml Wasser

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,1 mm 20

Spaltbreite auf ein 150 ,u dickes multifiles Polyamid-Gewebe (181 F 892 Schweizer Seidengaze-Fabrik) beschichtet und getrocknet. Das so erhaltene beschichtete Gewebe wird danach mit einer durchsichtigen Abdeckfolie verbunden, so daß die Abdeckfolie auf dem Reagenzfilm aufliegt. Anschließend wird ein 1 cm breiter Streifen dieses beschichteten Gewebes mit der Gewebeseite nach unten entsprechend Abb. 1 auf einem Plastikstreifen befestigt, auf dem bereits ein 15 mm breites Glasfaservlies, Dicke 1,5 mm, Faserdicke ca. 2 /U, aufgebracht ist, so

OU /

daß das freie Ende des beschichteten Gewebes noch 6 mm über das Vlies reicht. Dann wird in 6 mm breite Teststreifen geschnitten.

Bringt man nun 15 ,ul Vollblut auf den Probenauftragsbezirk 2a entsprechend Abb. 1» so durchdringt innerhalb 30 bis 60 Sekunden der Plasmaanteil das gesamte Glasfaservlies auch unterhalb der durchsichtigen Folie, während die Erythrozyten im Bereich 2a

ORIGINAL

festgehalten werden. Durch Drücken auf die Abdeckfolie kommt nun die Reagenzschicht über die Gewebeschicht mit dem abgetrennten Plasma in Berührung und wird gleichmäßig durchfeuchtet. Die im Plasma enthaltene Glucose reagiert innerhalb von 1-2 Min. in Abhängigkeit von ihrer Konzentration unter Entwicklung einer mehr oder weniger kräftigen Blaufärbung.

Die photometrische Messung geschieht vorzugsweise in einem Remissionsphotometer, dessen Meßkopf sich erst nach einer bestimmten Inkubationszeit (Plasmaabtrennung) auf das Testfeld senkt und mit dem damit erzeugten Druck den Kontakt zwischen Abtrennvlies und Reagenzgeweberückseite herstellt. Bei einer Reaktionszeit von 60 Sekunden und

einer Meßwellenlänge von 630 nm erhält man die in Abb. 2, Kurve 1 dargestellte Meßkurve, Kurve 2 zeigt die Meßwerte, bei denen der Film direkt auf die Abdeckfolie als Trägerschicht aufgebracht ist und nicht auf ein Gewebe.

Der Unterschied von Kurve 1 und Kurve 2 zeigt deutlich, daß Abstufungen zu höchsten Glucosekonzentrationen erst durch den erfindungsgemäßen Aufbau ermöglicht werden. Die dabei erfolgende stärkere Reaktion, möglicherweise durch

Sauerstoffzufuhr aus dem Inneren des Gewebesjwar völlig 25

unerwartet, da eine einfache Rechnung ergibt, daß der ursprünglich in den Gewebehohlräumen vorhandene Sauerstoff zur Deckung des Sauerstoffbedarfs der Reaktion bei weitem nicht ausreicht. Außerdem ergab sich durch den erfindungsgemäßen Aufbau eine deutliche Verringerung der

Reaktionszeit.

Die durchsichtige Abdeckfolie kann, im Gegensatz zu der in der DE-OS 31 30 749 gezeigten Vorrichtung, entfallen, da die Reagenzschicht durch die darunterliegende Gewebeschicht ausreichend stabilisiert ist, kann jedoch aus Sicherheitsgründen zusätzlich vorhanden sein, um eine Berührung oder Beschädigung der Reagenzschicht zu verhindern.

⁵ '' ^P "^A-n ORIGINAL

Legende zu Abb.

1 Trägerfolic

2 Glasfaservlies

3 Abdeckfolie

4 Reagenzfilm

5 Gewebeschicht

6 Befestigung

Beispiel 2

Bestellung eines Teststreifens zum Nachweis von Glucose im Harn

20 KU Giucoseoxidase 80 KU Peroxidase 5 ml Im Ci tratpuff er pH -ir

0,13 g Na-Alginat

13 g Polyvinylpropionat-Dispersion 5o%ig in Wasser

o,375 g Tetramethylbenz idin (3,3',5,5')

0,1 g 1-Phenylsemicarbazid

1 g Dioctylnatriumsulfosuccinat

5 ml Methoxyäthanol

10 g Kieselgel

12 ml Wasser

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,1 mm

Spaltbreite auf ein 350 ,u dickes Polyester-Vlies (Dupont/Remey 2o33) beschichtet und getrocknet. Der so erhaltene beschichtete Träger wird wie in der DE-OS 31 18 381 beschrieben, über einem verzögert saugenden Papier auf einer als Griff dienenden Kunststoffolie mit einem netzmittelunbehandelten, dünnen Gewebe befestigt und zu Teststreifen verarbeitet. (Abb. 3).

BAD

Taucht man die Streifen in glucosehaltige Harne, so ergeben sich auch bei nachlässiger Handhabung fleckenlose und randfreie Reaktionsfarben.

Legende zu Abb. 3

1 Trägerfolie ί

2 saugfähiges Papier

3 Gewebeschicht

4 Reagenzfilm j

5 Abdecknetz

6 Klebeverbindung
Beispiel 3

Herstellung eines Teststreifens zum Nachweis von Cholesterin im Blut

2,5 KU Cholesterinoxidase

1,5 KU Cholesterinesterase

so KU Peroxidase

10 mg Gallussäure

0,5 g Tetramethylbenzidin (3.3'.5.5')

0,3 g Dioctylnatriumsulfosuccinat

1,5 ml Aceton

6,5 g Polyvinylpropionat-Dispersion 50°<;ig in Wasser

5 g Titandioxid

10 g Cellulose

15 ml Phosphatpuffer 0,5M, pH 7

20 ml Wasser
3o

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,15 mm Spaltbreite auf ein 200 ,u dickes multifiles Polyester-Gewebe (2 F 777 Schweizer Seidengaze-Fabrik) beschichtet und getrocknet.
5

Der so erhaltene beschichtete Träger wird, wie in Beispiel 1 beschrieben, zu einem Teststreifen verarbeitet. Die Reaktion mit cholesterinhaltigem Blut geschah wie in Beispiel 1 und ergab nach 100 Sekunden Reaktionszeit eine

ausgezeichnete Abstufung über den gesamten relevanten Konzentrationsbereich.

BAD ORIGINAL

Beispiel 4

Herstellung eines Teststreifens zum Nachweis ° von Triglyceriden im Blut

50 KU Peroxidase

20 KU Cholesterinesterase

50 KU Glycerinkinase

10 KU Glycerophosphat-Oxidase

20 g Polyvinylpropionat-Dispersion 50%ig in Wasser

20 g Cellulose

0,2 g Na-Alginat

10 g Titandioxid

0,68 g Tetramethylbenzidin (3,3',5,5')

0,30 g Dioctylnatriumsulfosuccinat

1,5 ml Aceton

25 ml Phosphatpuffer o,2M, pH 7,8

10 ml Wasser

0,2 g Adenosintriphosphat

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,2 mm Spaltbreite auf ein 210 /U dickes Baumwollgewebe

beschichtet und getrocknet. Der so erhaltene beschichtete 25

Träger wird, wie in Beispiel 1 beschrieben, zu einem Teststreifen verarbeitet. Die Reaktion mit triglyceridhaltigem Blut geschah wie in Beispiel 1 und ergab nach 120 Sekunden Reaktionszeit eine ausgezeichnete

Abstufung über den gesamten relevanten 30

Konzentrationsbereich.

Beispiel 5

Herstellung eines Teststreifens zum Nachweis von Harnsäure im Blut

40 KU Peroxidase

1 KU Uricase

18 g Polyvinylpropionat-Dispersion 5o% in Wasser

0,25 g Na-Alginat

0,5 g nichtionogenes Netzmittel

0,05 g EDTA-Na₂

20 g Kieselgur

20 ml Phosphatpuffer 0,2m, pH 7

0,4 g Primaquin-diphosphat

18 ml Wasser
15

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,2 mm Spaltbreite auf ein 200 ,u dickes multifiles Polyester-Gewebe (2 F 777 Schweizer Seidengaze-Fabrik) beschichtet und getrocknet.
2o

fit

0,2	g	ml	4-Aminoantipyr in
0,2	g	nichtionogenes Netzmittel
in	50	Wasser

wird ein dünnes Filterpapier (597 NF-Ind., Schleicher § Schüll) getränkt und getrocknet.

Es werden Teststreifen, wie in Beispiel 1 beschrieben, hergestellt, die zusätzlich zwischen Abtrennvlies und Reagenzgewebeunterseite eine Lage Aminoantip/rinpapier erhalten.

Die Reaktion mit harnsäurehaltigem Blut geschah wie in Beispiel 1 und ergab nach 120 Sekunden Reaktionszeit eine ausgezeichnete Abstufung über den gesamten relevanten Konzentrationsbereich.

Beispiel 6

Herstellung eines Teststreifens zum Nachweis von y"-Glutamyltransferase im Blut

1,0 g	N-Methy!anthranilsäure
2,5 g	Glycylglycin
0,85 g	EDTA-Na₇
0,2 g	Gluatamyl-p-phenylendiamin-3-carbonsäure
20 g	Polyvinylpropionat-Dispersion 50%ig in FLO
0,2 g	Na-Alginat
0,35 g	Dioctylnatriumsulfosuccinat
1,0 ml	Methanol
S g	Titandioxid
8 g	Cellulose
15 ml	Tris-Puffer, pH 7,6
15 ml	Wasser

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,15 mm Spaltbreite auf ein 250 ,um dickes multifiles Polyamid-Gewebe (1093 Verseidag-Industrie-Textilien GmbH) beschichtet und getrocknet.

Mit 250 mmol/1 K,[Fe(CN).] wird ein Teebeutelpapier der Fa. Schöller § Hösch, 12 g/cm Flächengewicht imprägniert und 5 Minuten bei 30⁰C getrocknet. Es werden Teststreifen wie in Abb. 1 beschrieben hergestellt, die zusätzlich zwischen Abtrennvlies und Reagenzgewebeunterseite eine Lage des Oxidationspapiers erhalten.

Die Reaktion mit Gamma-GT-haltigen Blut geschah wie in Beispiel 1 und ergab nach 120 Sekunden Reaktionszeit eine ausgezeichnete Abstufung über den gesamten relevanten

Konzentrationsbereich.

Beispiel 7

Herstellung eines Teststreifens zum Nachweis von Bilirubin im Blut

0,2 g 2-Methoxy-4-nitrobenzoldiazoniumtetra£luoroborat 1,5 g Metaphosphorsäure

1,5 g Diphenylphosporsäure 0,2 g Dioctylnatriunsulfosuccinat 5 g Kieselgel

1 g Cellulose

7,5 g Polyvinylidenchlorid-Dispersion (Diofan 217 D,

BASF) 40Ug in Wasser 15 g Quellmittel (Bentone EW, National Lead) 2,5%ig in Wasser

mm

werden zu einer homogenen Masse verarbeitet und mit 0,2 Spaltbreite auf ein 200 ,um dickes multifiles Polyester-Gewebe (2 F 777 Schweizer Seidengaze-Fabrik) beschichtet und getrocknet.

Der so erhaltene beschichtete Träger wird wie in Beispiel 1 beschrieben zu einem Teststreifen verarbeitet. Die Reaktion

mit bilirubinhaltigem.Blut geschah wie in Beispiel 1 und ergab nach 60 Sekunden "Reaktionszeit eine ausgezeichnete Abstufung über den gesamten relevanten Konzentrationsbereich.

- Leerseite

Claims

Patentansprüche

Teststreifen bestehend aus einer Reagenzien enthaltenden Filmschicht und einer als Griff dienenden Kunststoffolie, dadurch gekennzeichnet, daß der Reagenzfilm sich überwiegend auf einer Seite einer als multifiles Gewebe oder Vlies ausgebildeten Trägerschicht befindet.
2. Teststreifen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Gewebe oder Vlies aus Polyester, Polyamid, Baumwolle oder Cellulose besteht.
3. Teststreifen nach einem der Ansprüche 1-2, dadurch gekennzeichnet, daß die trockene Filmschicht eine Dicke von 10 - 200 ,u hat.
4. Teststreifen nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, 20

daß die Filmschicht eine Dicke von 15 - 100 #u hat.
5. Teststreifen nach einem der Ansprüche 1-4, dadurch gekennzeichnet, daß sich zwischen der Griffolie und der Reagenzschicht eine zusätzliche saugfähige Schicht befindet.
6. Teststreifen nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Griffolie, saugfähige Schicht, Trägerschicht

und Filmschicht mittels eines dünnen Netzes, welches 30

neben dem Schichtpaket auf der Trägerfolie befestigt ist, verbunden sind.
7. Teststreifen nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß Griffolie und saugfähige Schicht miteinander verbunden sind und die Trägerschicht, auf der sich die Filmschicht befindet, neben der

-K--5-

saugfähigen Schicht über eine Kante mit der Griffolie verbunden ist, so daß die Trägerschicht die saugfähige Schicht zumindest teilweise lose bedeckt.
8. Teststreifen nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß sich oberhalb der Filmschicht noch eine Abdeckschicht befindet.
9. Teststreifen nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Abdeckschicht durchsichtig und mit der Filmschicht verbunden ist.
10. Verfahren zum Herstellen von Teststreifen gemäß einem der Ansprüche 1-9, dadurch gekennzeichnet, daß eine Dispersion bzw. Lösung der den Reagenzfilm bildenden Bestandteile in einem geeigneten Lösungsmittel auf eine Seite der Trägerschicht aufgebracht und getrocknet wird, worauf diese in an sich bekannter

Weise mit den übrigen Komponenten des Teststreifens 20

verbunden und gegebenenfalls in entsprechend kleinere Einheiten zerschnitten wird.
11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet,

daß ein Teil der Reagenzien nachträglich in den 25

getrockneten Film imprägniert wird.
12. Verwendung von mit Reagenzfilmen beschichteten Geweben oder Vliesen zur Herstellung von Teststreifen.