DE3934366A1 - Vakzine zum schutz vor hiv-virusinfektionen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als diagnostikum und immuntherapeutikum - Google Patents

Vakzine zum schutz vor hiv-virusinfektionen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als diagnostikum und immuntherapeutikum

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Description

Gegenstand der Erfindung sind Vakzine zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen, ein Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung.
Bisherige antivirale Arzneimittel, denen auch eine Wir­ kung gegen HIV-Viren zugesprochen wird, haben den Nach­ teil, daß sie ein meist geringes antivirales Wirkungs­ spektrum besitzen, welches mit einer relativ hohen Toxi­ zität verbunden ist. Viele dieser Substanzen wirken gegen eine virale Thymidinkinase oder eine virale Polymerase. Jedoch ist bereits während der Therapie mit vielen dieser Substanzen eine Resistenzbildung der infizierenden Viren beobachtet worden.
Zur Gruppe der Substanzen, bei denen eine Wirkungen gegen HIV-Viren festgestellt wurde, gehört Foscarnet (Phosphono­ formiat). Diese Substanz wirkt als Hemmstoff der viralen reversen Transkriptase, ist jedoch wegen seiner in klini­ schen Versuchen ermittelten Toxizität nicht für die Pro­ phylaxe oder Therapie von Retrovirus-Infektionen geeignet (B. Öberg, "Antiviral effects of phosphonoformiate (PFA, Foscarnet Sodium)", Pharm. Ther. 19 (1983) p. 387-415.
Ein weiterer Hemmstoff der reversen Transkriptase ist die Substanz Suramin. Sie ist jedoch aufgrund ihrer Toxizität für den Säugetierorganismus ebenfalls nicht für eine Pro­ phylaxe oder Therapie von HIV-Virusinfektionen geeignet (H. Mitsuya et al. "Suramin Protection of T-Cells in vitro against Infectivity and Cytopathic Effect of HTLV- III", Science 226 (1984), p. 172-174).
Die weitere Entwicklung führte dann zu Hemmstoffen der reversen Transkriptase, die weniger toxisch auf den Säugetier-Organismus sind. Dazu gehören Stoffe wie Dex­ transulfat und Pentosanpolysulfat, die nachweislich in vivo einen inhibierenden Effekt auf HIV I-Viren zeigen. Dies wird in den Offenlegungsschriften DE 36 01 136 und EP 02 93 826 beschrieben.
Bisherige Bemühungen, Mittel zur Prophylaxe und Therapie von HIV-Infektionen zu entwickeln, konzentrieren sich daher auf eine Hemmung der reversen Transkriptase des HIV I-Virus.
Neben der chemotherapeutischen Behandlung von HIV-Infek­ tionen besteht prinzipiell die Möglichkeit der Gen- oder Immuntherapie. Die Gentherapie umfaßt das Einschleusen von Teilen viraler Nukleinsäuren in menschliche Zellen, insbesondere in die Zielzellen des HIV-Virus, beispiels­ weise die CD4 positiven Zellen des Immunsystems. Durch Bildung einer "antisense" RNA, d. h. einer zur messenger RNA (m-RNA) komplementären RNA, kann dann die virale m-RNA neutralisiert werden und somit die Weitervermehrung des Virus unterbunden werden. In einer anderen Form kön­ nen auch direkt Oligonukleotide oder mit ihnen chemisch verwandte Strukturen, die zur m-RNA komplementär sind, eingesetzt werden. Bei der Immuntherapie werden nach der Infektion Antigene gegeben, von denen eine Unterstützung der Immunantwort gegen HIV erwartet wird.
Um eine weitere Ausbreitung der AIDS Epidemie zu verhin­ dern, wäre es jedoch dringend erforderlich, eine Vakzine zum Schutz vor HIV-Infektionen zu entwickeln. Das Haupt­ problem hierbei ist die hohe Variabilität der HIV-Viren: eine Schutzimpfung soll und muß alle möglichen Virusvari­ anten erfassen. Ein Weg dazu ist, durch Vergleich mög­ lichst vieler und evolutionär weit entfernter HIV-Virus­ varianten, konservierte Bereiche in den viralen Antigenen festzustellen, die dann als Peptide im Menschen die Bil­ dung von protektiven Antikörpern hervorrufen können. Al­ ternativ können die Peptide in einem anderen Organismus zur Bildung von Antikörpern eingesetzt werden, so daß die Antikörper direkt dem Menschen als Schutz gegeben werden. Neben konservierten Peptiden muß eine wirkungsvolle Vak­ zine aber auch solche Peptide erfassen, die von sehr divergenten Stämmen abstammen.
In der älteren, aber nicht vorveröffentlichten EP 89 710 057.4 wird eine HIV-2-Virusvariante, nämlich HIV-2D205 beschrieben, die aus dem entsprechenden Virusisolat HIV-2D205 kloniert werden kann. Das Virusisolat HIV-2D205 ist gemäß Budapester Vertrag unter der Nummer ECACC V 87 122 304 hinterlegt worden. Ebenfalls beschrieben wer­ den die RNA und die davon abgeleiteten DNAs sowie die Proteine der Virusisolate.
Bei der bisherigen Entwicklung einer Vakzine gegen HIV- Virusinfektionen ergibt sich die Schwierigkeit, daß es zur Zeit kein geeignetes Tiermodell für die Krankheit gibt. Deshalb kommt die Entwicklung von Impfstrategien, beispielsweise gegen die Eigenschaft des Virus, die Zu­ sammensetzung seiner Proteinhülle zu verändern und seine eigenen Gene in das Erbmaterial des Wirtes einzubauen, nur langsam voran. Weiterhin muß die Vakzine einen aus­ reichenden Schutz gegen die vollständige Palette der bisher gefundenen zahlreichen HIV-Varianten gewährlei­ sten. Der Impfstoff selbst darf aber auch nicht das Ri­ siko einer HIV-Infektion bergen.
Bei der weiteren Sequenzierung des HIV-2D205-Virus und anschließend durchgeführten Stammbaumanalysen wurde jetzt überraschenderweise gefunden, daß HIV-2D205 genetisch gleich weit von den bisher beschriebenen HIV-2-Stämmen und den Affenviren SIVmac und SIVsm entfernt ist. HIV­ 2D205 ist somit ein gemeinsamer Vorläufer der HIV-2/ SIVmac/SIVsm-Gruppe und dieser evolutionär sehr nahe und somit ein sehr altes Virus.
Daher bietet sich dieses Virus als Ausgangsstoff zur Herstellung einer Vakzine, eines Gen- oder Immuntherapeu­ tikums mit breitem Schutzspektrum gegen die Viren dieser Gruppe an. Gleichzeitig könnte sich HIV-2D205 aufgrund seiner engen Verwandtschaft zu den Affenviren besonders gut zur Etablierung eines Tiermodells eignen. Für die Etablierung eines Tiermodells wird HIV-2D205 auf geeig­ nete Primaten (z. B. Rhesusaffen) übertragen und die Etablierung der Infektion und gegebenenfalls das Auftre­ ten von Symptomen beobachtet. Die Etablierung eines Tier­ modells mit HIV-2D205 als Virus erlaubt zugleich die Testung der hergestellten Vakzine, Gentherapeutika oder Immuntherapeutika.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, eine Vakzine zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen zur Verfügung zu stellen, die ein möglichst breites Wirkungsspektrum gegen verschiedene Typen der HIV-2/SIV-Gruppe besitzt und die Etablierung eines zur Entwicklung des Impfstoffs nötigen Tiermodells ermöglicht.
Diese Aufgabe wird dadurch gelöst, daß die Vakzine aus dem Virus HIV-2D205 hergestellt werden.
Eine bevorzugte Ausführungsform ist eine Vakzine, die zum therapeutischen Einsatz vor der Infektion geeignet ist. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform ist, daß die Vak­ zine als Immuntherapeutikum zum Einsatz nach der Infek­ tion geeignet ist und ebenfalls ein breites Varianten­ spektrum abdeckt.
In einer weiteren Ausführungsform besteht die Vakzine aus den Peptiden
 1. LFETSIKPCVKL
 2. ESCHDHYWD
 3. RFRYCAPPG
 4. LLRCNDTNYSGF
 5. STWFGFNGTRAENRYIYWH
 6. DNRTIISLN
 7. NELDRFGLAESLLE
 8. PLVPTGSENLKSL
 9. PLSPRTLNAWVKL
10. EEKKFGAEVVPGFQALSEGCTPYEINQMLNCV
11. GLQKCVRMYNPTNILD
12. FQSYVDRFYKSLRAEQTD
13. QNANPDCKLVLKGL
14. NPTLEEMLTACQG
15. GGPGQKARLMAEALKE
16. ARQCRAPRRQGCWKCGK
oder Kombinationen derselben.
Weiterhin ist auch ein Verfahren zur Herstellung einer Vakzine zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen aus dem Virus HIV-2D205 sowie die Verwendung des Virus HIV-2D205 zur Herstellung einer Vakzine Gegenstand der Erfindung.
In einer weiteren Ausführungsform wird das Virus in ein geeignetes Wirtstier übertragen und dort vermehrt. Die gebildeten Antikörper werden sodann nach entsprechender Aufarbeitung, wie dies auch im Stand der Technik für andere Impfstoffe bekannt ist, als Passiv-Impfstoff gegen HIV-Virusinfektionen verwendet. Als Wirtstiere können insbesondere geeignete Affenarten verwendet werden, aber auch Tiere, die immunisiert werden können, ohne krank zu werden (z. B. Kaninchen) (Filice et al., Nature 335, 366- 369, 1988).
Auch humane monoklonale Antikörper gegen HIV-2D205 bieten sich als möglicher Schutzmechanismus an.
In einer weiteren Ausführungsform wird in einem geeigne­ ten Vektor DNA, von der eine zu der viralen m-RNA komple­ mentäre RNA vollständig oder partiell transkribiert werden kann, in menschliche Zellen des Immunsystems transfiziert und so in den Menschen gebracht. Die virale m-RNA wird so­ mit kompetitiv vom weiteren Vermehrungscyclus ausgeschlos­ sen. Desgleichen können synthetische Oligonukleotide zur Neutralisierung der viralen m-RNA angewendet werden.
Für die Differentialdiagnostik werden ausgewählte Be­ reiche der DNA von HIV-2D205 herangezogen, die bei dem Prototyp HIV-2ROD entweder gar nicht vorkommen oder er­ heblich abweichen (mehr als 30%). Von diesen Bereichen werden Peptide oder Nukleinsäuren für die Diagnostik nach den üblichen Methoden hergestellt (Markierung mit radio­ aktiven Isotopen, Immunfluoreszenztest, ELISA, etc.). Ein Bereich, der bei HIV-2D205 einzigartig ist, ist z. B. eine 54 Basenpaare (bp) Insertion im Überlappungsbereich der beiden offenen Leserahmen gag und pol mit der Sequenz
AACCCAGCAGAGGGCATGACACCTCGGGGGGCGACACCATCTGCGCCCCCTGCA.
Andere sehr variable Bereiche sind neben dem Hüllprotein env die Gene rev und vif.
Bisherige Untersuchungen des HIV-2D205-Virus, einem Iso­ lat einer asymptomatischen Ghanesin, zeigten Wachstum auf Lymphocyten ohne zytopathische Effekte und ein gutes Wachstum auf Makrophagen (Kühnel, H. et al., Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A. 86, p. 2383-2387 (1989)).
Bei der weiteren Untersuchung des HIV-2D205-Virus wurde gefunden, daß der Klon 7817 Basenpaare (bp) eines provi­ ralen Genoms ausgehend von dem linken "long terminal repeat" (LTR) enthält. Der Klon besitzt folgende virale Gene vollständig: "gag" für die Kernproteine des Virus, "pol" für die Integration und Replikation (Protease, re­ verse Transkriptase, Integrase), den Infektivitätsfaktor "vif", das für HIV-2 und die Affenviren SIVmac und SIVsm typische Gen "vpx", das für schnelles Wachstum verant­ wortliche Gen "vpr" und die beiden ersten Exons der posi­ tiven Regulatorgene "tat" und "rev". Der für das äußere Hüllprotein kodierende Bereich ist zu 4/5 im Klon enthal­ ten, die Sequenz des negativ regulierenden Faktors "nef" zur Hälfte insofern als er mit der rechten LTR überlappt und die linke und rechte LTR identisch sind.
Die Sequenz wurde verglichen mit den bisher bekannten HIV und SIV Sequenzen (siehe Tabelle 1). Überraschenderweise wurde gefunden, daß die Nukleotidhomologie des gesamten Klons HIV-2D205 zu den bereits bekannten HIV-2-Sequenzen nur 76,2-76,8% beträgt, während die Homologie der anderen HIV-2 Sequenzen untereinander mit 87,0-89,3% weit größer ist. Die Homologie zu SIVsm und SIVmac be­ trägt 76,4 bzw. 75,0%, d. h. HIV-2D205 ist gleich weit von diesen beiden Affenvirus-Sequenzen entfernt wie von HIV-2. Die Homologie zu SIVAGM und HIV-1 liegt im glei­ chen Rahmen wie für die übrigen HIV-2 Isolate.
Sequenzvergleiche einzelner genetischer Abschnitte von HIV-2D205, HIV-2ROD, SIVsm und SIVmac zeigten, daß die Variabilität im Nukleotid-Bereich von 4,6% (für R) bis zu 35,9% (für rev exon 1) und im Aminosäure-Bereich 12,8% (für gag) bis zu 47,6% (für rev exon 1) reicht (siehe Tabelle 2) .
Trotz dieser Variablilität waren funktionell relevante Sequenzen oder Proteincharakteristika wie Hydrophilie oder Ladung in hohem Grade erhalten.
Der sequenzierte Teil des externen Glycoproteins (gp) des HIV-2D205 unterschied sich zwar um 33% von dem des HIV- 2ROD, hatte aber dasselbe Muster von konservierten und variablen Bereichen wie die anderen HIV-2 und SIVsm/SIVmac Sequenzen (siehe Fig. 2). Alle Cystein-Reste, die in den externen Glycoproteinen des HIV-2ROD gefunden wurden, wa­ ren erhalten. Abweichungen in den externen Glycoproteinen beruhen auf dem Austausch einzelner Aminosäuren und ge­ ringfügiger Deletionen oder Insertionen meist in den va­ riablen Regionen. Zusätzlich wurde eine große Anzahl ver­ änderter Glycosylierungsstellen beobachtet. Bei dem exter­ nen gp von HIV-2D205 sind lediglich 13 von 21 potentiellen N-Glycosylierungsstellen des entsprechenden gp von HIV- 2ROD enthalten, was die Bedeutung der Glycosylierung bei der Erzeugung der Hüllenvariabilität unterstreicht.
Durch Immunpräzipitation viraler Proteine aus infizierten Zellen und anschließender Analyse mit Hilfe der SDS-Poly­ acrylamid Gelelektrophorese wurde gefunden, daß die äuße­ ren Hüllproteine des HIV-2D205-Virus größere Molekularge­ wichte besitzen als die des HIV-2ROD-Typs.
Der Vorläufer des Hüllproteins bildet bei HIV-2D205 im Gegensatz zu den anderen HIV-2 und SIVmac/SIVsm Stämmen kein Dimer (siehe Fig. 3).
Die Dimerbildung, die für eine korrekte Prozessierung der Hüllproteinvorläufer dieser Virusgruppe, im Gegensatz zu den HIV-1 Viren, notwendig sein soll, ist also entweder eine relativ neue Entwicklung innerhalb der HIV-2/SIVmac/ SIVsm Gruppe oder HIV-2D205 stellt einen eigenständigen Virustyp dar. Für den letzteren Punkt spricht die Einord­ nung von HIV-2D205 innerhalb des phylogenetischen Stamm­ baums der HIV/SIV Viren (Fig. 4). Der Stammbaum basiert auf der Nukleotidvariation im 3′-Teil des HIV-2D205. Da­ rin ist zu erkennen, daß sich HIV-2D205 um 24,8% vom HIV-2 Prototyp HIV-2ROD unterscheidet und um 26,1% bzw. 26,4% von SIVsm und SIVmac. Dieser phylogenetische Ab­ stand stimmt gut überein mit den durch Sequenzvergleiche direkt bestimmten Abweichungen in der Nukleotidsequenz (Tabelle 1). Nach der Stammbaumanalyse wird das HIV-2D205 Virus einem gemeinsamen Vorläufer der Typen HIV-2/SIVsm/ SIVmac mit einer Divergenz von 8,6% zugeordnet. Es wird daher die Bezeichnung HIV-2ALT für HIV-2D205 vorge­ schlagen.
Es ist dem Fachmann bekannt, daß die Pathogenität eines Virus mit zunehmender Adaptationszeit an seinen Wirt abnimmt. So ist zum Beispiel das Virus SIVsm aus sooty mangabey nicht pathogen für diese Affenart, wird es aber in eine andere Affenart neu eingebracht, z. B. in die Makaken, so wird es für diese Art pathogen. HIV-2D205 stammt aus einer asymptomatischen Person, macht keinen zytopathischen Effekt auf Lymphocyten und ist ein relativ altes Virus. Es könnte sich also bei diesem Virus um einen nicht pathogenen Subtyp aus der HIV-2 Gruppe han­ deln. Es ist deshalb ebenso Bestandteil dieser Erfindung, HIV-2D205 oder Antigene, Peptide oder Nukleinsäuren da­ von, für die differentielle Diagnostik zur Unterscheidung zwischen Infektionen des Typs HIV-2D205 und solchen des Prototyps HIV-2ROD einzusetzen. Das Virus HIV-2D205 eignet sich daher auch zur Herstellung von Gen-, Immun­ therapeutika und Diagnostika.
Durch Vergleichen der Aminosäuresequenzen der Proteine von HIV-2D205 mit den Aminosäure-Consensus-Sequenzen, die für die einzelnen Gene aus allen bereits veröffentlichten HIV-2 und SIVmac/SIVsm Sequenzen abgeleitet wurden, erge­ ben sich für den vorhandenen env-Bereich 6 konservierte Bereiche mit mindestens 9 100%ig konservierten Aminosäu­ ren, für gag 11 Bereiche mit mindestens 13 100%ig kon­ servierten Aminosäuren (Fig. 5). Peptide aus diesen Bereichen bieten sich vorzugsweise für eine Vakzine mit breitem Wirkungsspektrum an, besonders, wenn die Vakzine noch aus einer Kombination dieser Peptide besteht. Es handelt sich dabei um folgende Peptide:
 1. LFETSIKPCVKL
 2. ESCDKHYWD
 3. RFRYCAPPG
 4. LLRCNDTNYSGF
 5. STWFGFNGTRAENRYIYWH
 6. DNRTIISLN
 7. NELDRFGLAESLLE
 8. PLVPTGSENLKSL
 9. PLSPRTLNAWVKL
10. EEKKFGAEVVPGFQALSEGCTPYEINQMLNCV
11. GLQKCVRMYNPTNILD
12. FQSYVDRFYKSLRAEQTD
13. QNANPDCKLVLKGL
14. NPTLEEMLTACQG
15. GGPGQKARLMAEALKE
16. ARQCRAPRRQGCWKCGK
Diese Peptide werden synthetisch hergestellt und wenn vorteilhaft chemisch modifiziert. Diese Peptide sowie kürzere bis zu 7 Aminosäuren lange Unterpeptide davon sind ebenso Bestandteil dieser Erfindung wie ihre modifi­ zierten Formen. Weiterhin sind auch Peptide aus konstan­ ten Bereichen anderer Gene von HIV-2D205 Bestandteil dieser Erfindung, sofern die Abweichung von der Consensus- Sequenz nicht mehr als 20% beträgt.
Ebenso werden die sehr abweichenden Proteinbereiche (wie z. B. rev (aa 2-11), vif (aa 186-202), env (aa 2-23; 118-204;, etc.) für die Vakzine-Herstellung als geeignet angesehen, da bei ihnen die Induktion von Mechanismen angenommen wird, die die natürliche (und erfolgreiche) Abwehr gegen HIV-2D205 bedingen.
Die gleichen Bereiche wie für die Vakzine gelten auch für die Gen- und Immuntherapie. Von konstanten Bereichen er­ hofft man sich ein möglichst breites Spektrum an Virusva­ rianten, das durch die Therapeutika erfaßt wird. Die weni­ ger konstanten Bereiche könnten gerade die speziellen Im­ munantworten verursachen, die die Viren in Schach halten.
Für die Differentialdiagnostik kommen Peptide oder Nuk­ leinsäuren in Frage, die möglichst unterschiedlich von dem Prototyp HIV-2ROD sind. Solche sind neben der einzig­ artigen 54 bp Insertion (s. o.) im gag/pol Überlappungs­ bereich besonders in den Genen rev und vif zu finden.
Durch die verwandtschaftliche Nähe zu den Affenviren und ausgehend von dem Grundsatz, daß Vakzine aus Vorstämmen eine breitere Schutzwirkung entfalten können ist HIV­ 2D205 besonders eeignet zur Herstellung von Vakzinen zum Schutz vor HIV-Infektionen. Dieser Virus kann im Affen als geeignetem Wirt vermehrt werden, und die entstandenen Antikörper können als Vakzine für eine Anwendung beim Menschen Verwendung finden. Die Vakzine schützt damit vor der Infektion eines möglichst breiten Spektrums von Virusvarianten.
Weiterhin ist es möglich Peptidteste oder PCR-Tests auf der Basis des HIV-2D205 einzusetzen, mit deren Hilfe man HIV-2D205 von anderen HIV-Viren unterscheiden kann.
Im folgenden werden die Figuren sowie die Tabelle be­ schrieben:
Tabelle 1 zeigt die Nukleotidsequenzhomologie zwischen HIV und SIV-Viren in Prozent. Die Sequenzen wurden ver­ glichen unter Benutzung von MikrogenieTM-Sequenz Software der Fa. Beckmann.
Tabelle 2 zeigt die erhaltenen Sequenzen der genetischen Elemente des Nukleotid- und Aminosäurebereichs.
Fig. 1 zeigt die Analyse der deduzierten Aminosäurese­ quenz des ORF-Y (open reading frame) der Positionen 1851 bis 1651 in dem unteren Bereich der HIV-2D205-Sequenz. a) zeigt die Aminosäurenausrichtung der putativen Proteine des ORF-Y verschiedener HIV-2-Stränge, SIVsm und SIVmac. b) zeigt die Profile der deduzierten Proteine des ORF-Y von HIV-2D205 unter Benutzung des MikrogenieTM-Analyse­ programms von Beckmann.
Fig. 2 zeigt die Aminosäuresequenz der externen Glyco­ proteine der Viren der HIV-2/SIVsm/SIVmac-Gruppe. Der se­ quenzierte Klon HIV-2D205 enthielt nur 75% des externen Glycoproteins. Die potentiellen N-Glyosylationsstellen sind unterstrichen. Die erhaltenen Cysteinstellen sind mit einem Sternchen versehen.
Fig. 3 zeigt einen Größenvergleich der externen Glyco­ proteine des HIV-2ROD mit denen des HIV-2D205. 35S-Cy­ stein angereicherte Proteine von Zellen wurden mit HIV- 2ROD (Spalte 1 und 2) und HIV-2D205 (Spalte 3 und 4) in­ fiziert, mit HIV-2 positivem Serum immunopräzipitiert und mit einem 8,5%igen SDS-Polyacrylamidgel aufgetrennt. Das externe Glycoprotein von HIV-2ROD (gp 125) und seine Vorstufe (gp 140), die dimere Form des gp 140 (gp 300) und die Positionen der molekularen Größenangaben sind in Dalton angegeben. Bei HIV-2D205 infizierten Zellen ist die ein Dimer kennzeichnende Bande nicht zu erkennen. Auch nach Behandlung mit Castanospermin, Spalte 4, einem Inhibitor der Glukosidase 1, tritt die dimere Form nur bei HIV-2ROD, Spalte 2, auf. Weiterhin bemerkenswert ist, daß das externe Glycoprotein und seine Vorstufe bei HIV-2D205 größer sind als bei HIV-2ROD.
Fig. 4 zeigt den Evolutionsstammbaum minimaler Länge, der den Zusammenhang des HIV-2D205 mit den anderen HIV-/ SIV-Subtypen zeigt. Der Stammbaum wurde erstellt durch einzelne Basensubstitutionen im 3′-Bereich der HIV-2D205- Sequenz unter Benutzung von PAUP (Smith, T.F. et al., Nature 333, 573-575 (1988)) und der Version 3,21 des PHYLIP bootstrapping alogarythmus.
Fig. 5 zeigt die Aminosäuresequenzen, abgeleitet von den einzelnen Genen der HIV-2D205, 7 bzw. HIV-2ROD Sequenz, wurde mit den Aminosäure-Consensus-Sequenzen verglichen, die aus allen bereits sequenzierten HIV-2 und SIVmac/SIVsm Sequenzen abgeleitet wurden. Unter den von der Consensus- Sequenz abweichenden Aminosäuren von HIV-2D205, 7 (5a) bzw. HIV-2ROD (5b) wurde ermittelt, welcher Prozentsatz mit der HIV-2 Consensus-Sequenz identisch ist (schwarze Balken), welcher mit der SIVmac/SIVsm Consensus-Sequenz identisch ist (graue Balken) und welcher Prozentsatz neuen Aminosäuren entspricht (helle Balken).
Tabelle 1
Nukleotid Sequenzhomologie zwischen HIV und SIV (in %)
Tabelle 2
Erhaltene Sequenzen der genetischen Elemente (Nukleotid-/Aminosäure-Bereich)

Claims (14)

1. Vakzine zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen, dadurch gekennzeichnet, daß sie aus dem Virus HIV-2D205 (ECACC V 87 122 304) hergestellt wird.
2. Vakzine nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie zum therapeutischen Einsatz vor der Infektion geeignet ist.
3. Vakzine nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeich­ net, daß sie als Immuntherapeutikum zum Einsatz nach der Infektion geeignet ist und ein breites Varianten­ spektrum abdeckt.
4. Vakzine nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeich­ net, daß sie aus den Peptiden  1. LFETSIKPCVKL
 2. ESCDKHYWD
 3. RFRYCAPPG
 4. LLRCNDTNYSGF
 5. STWFGFNGTRAENRYIYWH
 6. DNRTIISLN
 7. NELDRFGLAESLLE
 8. PLVPTGSENLKSL
 9. PLSPRTLNAWVKL
10. EEKKFGAEVVPGFQALSEGCTPYEINQMLNCV
11. GLQKCVRMYNPTNILD
12. FQSYVDRFYKSLRAEQTD
13. QNANPDCKLVLKGL
14. NPTLEEMLTACQG
15. GGPGQKARLMAEALKE
16. ARQCRAPRRQGCWKCGKoder Kombinationen dieser besteht.
5. Vakzine nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeich­ net, daß sie bis zu 7 Aminosäuren lange Unterpeptide enthält.
6. Vakzine nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeich­ net, daß Peptide aus konstanten Bereichen andere Gene von HIVD205, deren Abweichung von der Consensus-Se­ quenz 20% ist oder Kombination derselben enthal­ ten sein können.
7. Vakzine nach Anspruch 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß die abweichenden Proteinbereiche rev (aa 2-11), vif (aa 186-202) und env (aa 2-33); 118-204 etc.) für die Vakzineherstellung geeignet sind.
8. Verfahren zur Herstellung einer Vakzine nach den An­ sprüchen 1 bis 7 zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen aus dem Virus HIV-2D205.
9. Verfahren nach Anspruch 8 zur Herstellung einer Vak­ zine zum therapeutischen Einsatz nach der Infektion.
10. Verwendung des Virus HIV-2D205 zur Herstellung einer Vakzine zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen.
11. Verwendung nach Anspruch 10 zur Herstellung einer Vak­ zine zum therapeutischen Einsatz nach der Infektion.
12. Verfahren zur Herstellung einer Vakzine zum Schutz vor HIV-Virusinfektionen, dadurch gekennzeichnet, daß das Virus HIV-2D205 in einen Affen implantiert, in diesem vermehrt und die gebildeten Antikörper als Impfstoff verwendet werden.
13. Verwendung von HIV-2D205 in einem Tiermodell für AIDS und zur Differenzierung zwischen pathogenen und apatho­ genen HIV-Infektionen, die mit den bisherigen diagno­ stischen Tests als HIV-2 diagnostiziert werden und nicht unterschieden werden können.
14. Verwendung nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß zwischen Infektionen des Typs HIV-2D205 und HIV-2 Infektionen, die durch den Prototyp HIV-2ROD defi­ niert sind, diferenziert werden kann.
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