DE69629520T2

DE69629520T2 - Verfahren zur Herstellung Amylase-resistenter körniger Stärke

Info

Publication number: DE69629520T2
Application number: DE69629520T
Authority: DE
Inventors: Yong-Chen Somerville Shi; Peter T. Plainsboro Trzasko
Original assignee: National Starch and Chemical Investment Holding Corp
Current assignee: Brunob II BV
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-05-20
Publication date: 2004-06-24
Anticipated expiration: 2016-05-21
Also published as: EP0747397B1; AU715194B2; AU715194C; EP0747397A3; US5593503A; US5902410A; CA2178128A1; DE69629520D1; JPH0912601A; DK0747397T3; CA2178128C; ES2206530T3; ATE247669T1; EP0747397A2; AU5227196A; JP2779345B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer resistenten körnigen Stärke mit hohem Ballaststoffgehalt. Die vorliegende Erfindung beinhaltet insbesondere die Herstellung einer resistenten körnigen Stärke durch ausgewählte Hitze-Feuchtigkeits-Behandlung von Stärke mit hohem Amylosegehalt und ferner die Verwendung dieser resistenten körnigen Stärke in Lebensmittelprodukten.
Stärke, ein komplexes Kohlenhydrat, besteht aus zwei Arten von Polysaccharidmolekülen, nämlich Amylose, ein meist lineares und flexibles Polymer aus D-Anhydroglucose-Einheiten, die durch α-1,4-D-glucosidische Bindungen verknüpft sind, und Amylopektin, ein verzweigtes Polymer aus Amyloseketten, die durch α-1,6-D-glucosidische Bindungen verknüpft sind. Stärke wird hauptsächlich im Dünndarm durch das Enzym α-Amylase verdaut. α-Amylase hydrolysiert α-1,4-glucosidische Bindungen und hydrolysiert daher die Amylosefraktion von Stärke fast vollständig zu einfachen Zuckern. α-Amylase hydrolysiert die α-1,6-D-glucosidischen Bindungen nicht, was zu einer weniger vollständigen Hydrolyse der Amylopektinfraktion führt.
Es ist bekannt, dass bestimmte Stärkeverarbeitungsvorgänge zu der Transformation von Stärke in eine gegenüber Amylase resistente Stärke, die einfach als resistente Stärke bekannt ist, führen. Resistente Stärke wird im Dünndarm nicht durch Amylase verdaut, sondern geht in den Dickdarm, wo sie sich nach Berichten in der Forschungsliteratur ähnlich wie Ballaststoffe verhält. Resistente Stärke hat einen reduzierten Brennwert, da sie sich der Verdauung widersetzt, und ist wahrscheinlich ein Faktor zur Verhinderung von Divertikulose und Dickdarmkrebs.
Resistente Stärke (RS) wurde in der Literatur in drei Kategorien eingeteilt: RS1 – physikalisch unzugängliche Stärke (z. B. Stärke, die in ein Protein oder eine Fasermatrix eingebettet ist, z. B. Stärke, die in einem ganzen Korn gefunden wird); RS2 – intakte verdauungsresistente native Stärkekörner (z. B. ungekochte Kartoffel- oder Bananenstärke) und RS3 – retrogradierte verdauungsresistente Stärke (siehe Englyst und Cummings, "New Developments in Dietary Fiber", Planum Press, NY 1990).
Zur Herstellung von resistenter Stärke wurden verschiedene Verfahren beschrieben. Viele dieser Verfahren involvieren den oben beschriebenen retrogradierten RS3-Typ; dies folgt der allgemeinen Auffassung, dass resistente Stärke gebildet wird, wenn die Amylosefraktion von Stärke nach der Gelatinierung von Stärke retrogradiert oder rekristallisiert wird. Die Theorie besteht darin, dass sich die flexiblen linearen Amylosemoleküle nach Gelatinierung selbst zu dichten linearen Konfigurationen anordnen, die Helices oder Kugeln bilden, die viele der α-1,4-Glucosidbindungen für α-Amylase unzugänglich machen.
US-A-5,051,271 offenbart einen nicht verdaubaren Füllstoff mit Lebensmittelqualität und geringem Kaloriengehalt, der von Stärke abgeleitet ist, und ein Verfahren zur Herstellung desselben. Das Verfahren beinhaltet die Retrogradation von Stärke, gefolgt von einer enzymatischen oder chemischen Hydrolyse, um die amorphen Regionen der retrogradierten Stärke zu verringern oder zu entfernen.
WO 90/15147 beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von gereinigter resistenter Stärke durch Abkühlen einer gekochten Stärkepaste unter Bildung eines Gels, Homogenisieren des Gels in Wasser, Wegverdauen der nicht resistenten Teile mit α-Amylase und Trocknen des restlichen nicht umgewandelten Teils bei niedriger Temperatur.
US-A-5,281,276 beinhaltet ein Verfahren zur Herstellung resistenter Stärke aus Stärken mit hohem Amylosegehalt durch Gelatinieren einer Stärkeaufschlämmung, enzymatisches Entfernen der Stärke und Isolieren des Stärkeproduktes durch Trocknung oder Extrusion.
Das vollständige Dokument der Chemical Abstracts, Band 119, Nr. 21, 1993, Abstract Nr. 224596, offenbart eine Hitze-Feuchtigkeits-Behandlung zur Herstellung von resistenter Stärke. Die Stärken, die als Proben III und IV dieses Dokuments bezeichnet sind, werden hergestellt, indem Maisstärke mit hohem Amylosegehalt in einem Wasserüberschuss suspendiert wird. Da die Stärken gemäß diesem Dokument in Gegenwart eines Wasserüberschusses in einem Autoklaven hitzebehandelt werden, werden sie ausgekocht, so dass sie keine Stärken mehr mit im wesentlichen körniger Natur sind.
Cereal Chemistry, Band 68, Nr. 6, 1991, Seiten 589–596 offenbart eine enzymresistente Stärke aus Gerste mit hohem Amylosegehalt. Der Gesamtfeuchtigkeitsgehalt der verwendeten Stärke ist 83,3 Gew.%, bezogen auf das Gewicht des Gemisches aus Stärke und Wasser. Außerdem ist die in diesem Dokument genannte Stärke keine körnige Stärke.
Alle oben beschriebenen Verfahren beinhalten Dispergieren und Gelatinieren von Stärke in großen Überschussmengen an Wasser, gefolgt von einer Retrogradation unter Verwendung von Enzymen oder Säuren, was zu einer resistenten Stärke des RS3-Typs führt. Diese Verfahren können arbeitsintensiv, zeitaufwendig sein und zu geringen Ausbeuten führen; der hohe Wassergehalt führt zu einer teuren Trocknungsstufe.
Native Stärkekörner haben eine gewisse Kristallinität und es ist bekannt, dass sie gegenüber einer Enzymverdauung partiell resistent sind. Es ist auch bekannt, dass eine Hitzebehandlung die Eigenschaften von Stärke verändern kann. Allerdings gibt es keine Offenbarung über die Herstellung von resistenter körniger Stärke mit hohem Gesamtballaststoffgehalt aus Stärke mit hohem Amylosegehalt.
Es wurde ein neuer anderer Ansatz entwickelt, um eine resistente körnige Stärke mit hohem Ballaststoffgehalt herzustellen. Ein Verfahren zur Herstellung einer resistenten körnigen Stärke, die einen Gesamtballaststoffgehalt, wie er durch das Verfahren von Prosky et al., Journal of Association of Official Analytical Chemists (AOAC), 68, 677 (1985) gemessen wird, von mindestens 12% hat, umfasst Erhitzen einer Stärke mit hohem Amylosegehalt, die einen Amylosegehalt von mindestens 40 Gew.% hat, unter einer Kombination von Feuchtigkeits- und Temperaturbedingungen, dass die Stärke in körnigem Zustand bleibt und doppelbrechend ist, wobei der Gesamtfeuchtigkeitsgehalt der Stärke 10– 80 Gew.%, bezogen auf das Gewicht des Gemisches aus Stärke und Wasser, ist und die Temperatur zwischen 60 und 160°C liegt.
Die Erfindung umfasst ferner resistente körnige Stärke, die mit der oben beschriebenen Hitze-Feuchtigkeits-Behandlung hergestellt wird und die einen Gesamtballaststoffgehalt von mindestens 12% und vorzugsweise mindestens 20 Gew.% hat.
Die vorliegende Erfindung betrifft ferner Lebensmittelprodukte, die die resistente körnige Stärke mit hohem Ballaststoffgehalt, die nach der hier beschriebenen Hitze-Feuchtigkeits-Behandlung hergestellt wird, enthalten.
Der Ausdruck "resistente Stärke", wie er in dieser Anmeldung verwendet wird, ist als Gesamtballaststoffgehalt (TDF = total dietary fiber content) definiert, wie er nach dem Verfahren von Prosky et al., Journal of Association of Official Analytical Chemists (AOAC), 68, 677 (1985), das nachfolgend noch beschrieben wird, gemessen wird, definiert.
Die Stärken, die bei der Herstellung von Amylase-resistenter körniger Stärke verwendet werden, können eine beliebige verschiedener Stärken sein, nativ oder umgewandelt. Es wurde festgestellt, das insbesondere Stärke mit hohem Amylosegehalt, d. h. Stärke, die mindestens 40 Gew.% Amylose enthält, zur Verwendung in dieser Erfindung am geeignetesten ist.
Es ist gut bekannt, dass Stärke aus zwei Fraktionen besteht, wobei die Molekülanordnung in der einen linear und in der anderen verzweigt ist. Die lineare Fraktion von Stärke ist als Amylose bekannt und die verzweigte Fraktion ist als Amylopektin bekannt. Stärken aus verschiedenen Quellen, z. B. Kartoffeln, Mais, Tapioca und Reis, usw., sind durch unterschiedliche relative Verhältnisse der Amylose- und Amylopektin-Komponente charakterisiert. Es wurden einige Pflanzenspezies genetisch entwickelt, die durch ein großes Übergewicht der einen Fraktion gegenüber der anderen charakterisiert sind. Es wurden z. B. bestimmte Maisvarietäten, die normalerweise etwa 22 bis 28% Amylose enthalten, so weiter entwickelt, dass eine Stärke mit über 40% Amylose erhalten wird. Die Hybridvarietäten wurden als Mais mit hohem Amylosegehalt oder als Amylomais bezeichnet.
Maishybride mit hohem Amylosegehalt wurden entwickelt, um natürlicher Weise Stärke mit hohem Amylosegehalt bereitzustellen; diese sind etwa seit 1963 im Handel erhältlich. Geeignete Stärken mit hohem Amylosegehalt, die hier verwendbar sind, sind beliebige Stärken mit einem Amylosegehalt von mindestens 40 Gew.% und vorzugsweise mindestens 65 Gew.%. Obgleich Maisstärke mit hohem Amylosegehalt besonders geeignet ist, umfassen andere Stärken, die verwendbar sind, die, die von einer Pflanzenspezies stammen, die Stärke mit hohem Amylosegehalt produziert oder veranlasst werden kann, diese zu produzieren, z. B. Mais, Erbsen, Gerste, Weizen, Kartoffeln, Tapioca und Reis.
Das in der vorliegenden Erfindung verwendbare Stärkematerial kann auch Mehl mit hohem Amylosegehalt umfassen, wobei die Stärkekomponente des Mehls mindestens 40 Gew.% Amylose enthält. Der Ausdruck Stärke, wie er hier in der Anmeldung verwendet wird, soll Mehl umfassen und wenn auf den hohen Amylosegehalt von Mehl in der Anmeldung und den Ansprüchen Bezug genommen wird, so soll dieser den Amylosegehalt der Stärkekomponente des Mehls bezeichnen (z. B. 40 Gew.% Amylose, bezogen auf die Stärkemenge im Mehl). Ein solches Mehl umfasst typischerweise Protein (8 bis 13 Gew.%), Lipide (2 bis 3 Gew.%) und Stärken (85 bis 90 Gew.%), die den spezifizierten hohen Amylosegehalt enthalten.
Eine andere nützliche Stärke mit hohem Amylosegehalt ist eine im wesentlichen reine Stärke, die aus einer Pflanzenquelle extrahiert wurde und die einen Amylose-Extendergenotyp hat, wobei die Stärke weniger als 10 Gew.% Amylopektin umfasst. Diese Stärke, die als das Stärkebasismaterial einsetzbar ist, stammt von einer Pflanzenzüchtungspopulation, insbesondere Mais, die eine genetische Kombination an Keimplasmaselektionen ist; sie umfasst mindestens 75 Gew.% Amylose, gegebenenfalls mindestens 85% (d. h. normale Amylose, wenn eine Messung durch Butanolfraktions-/Ausschlusschromatographie-Techniken durchgeführt wird. Die Stärke umfasst außerdem weniger als 10 Gew.%, gegebenenfalls weniger als 5% Amylopektin und außerdem 8–25% Amylose mit niedrigem Molekulargewicht. Die Stärke wird vorzugsweise in im wesentlichen reiner Form aus dem Korn einer Stärke-tragenden Pflanze, die einen rezessiven Amyloseextendergenotyp verbunden mit zahlreichen Amyloseextender-Modifizierungsmittelgenen hat, extrahiert. Diese Stärken und das Verfahren zu ihrer Herstellung sind in US-A-5,300,145 beschrieben.
Die in der vorliegenden Erfindung verwendete Stärke kann eine unmodifizierte oder eine modifizierte sein. Chemisch-modifizierte Stärken umfassen die Umwandlungsprodukte, abgeleitet von einer beliebigen der zuerst genannten Grundlagen, z. B. Stärke, hergestellt durch hydrolytische Wirkung von Säure und/oder Hitze; oxidierte Stärken, hergestellt durch Behandlung mit Oxidationsmitteln wie Natriumhypochlorit; Fluiditätsstärken oder dünnsiedende Stärken, hergestellt durch Enzymumwandlung oder milde Säurehydrolyse; und derivatisierte und vernetzte Stärken.
Bei der Herstellung der resistenten körnigen Stärke der vorliegenden Erfindung ist es notwendig, dass die Ausgangsstärke eine spezifizierte Menge an Wasser oder einen spezifizierten Feuchtigkeitsgehalt hat und auf eine definierte Temperatur erhitzt wird. Durch Behandeln der Stärken unter diesen Bedingungen wird eine körnige resistente Stärke, die einen hohen Gesamtballaststoffgehalt hat, wie er nachfolgend noch beschrieben wird, hergestellt werden.
Der Gesamtfeuchtigkeits- oder Wassergehalt der Stärke, die erhitzt werden soll, wird in einem Bereich von 10–80 Gew.%, vorzugsweise 20–45 Gew.% und bevorzugter von 30–40 Gew.%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Stärke, liegen. Es ist wichtig, dass dieser relative Feuchtigkeitslevel während der Erhitzungsstufe aufrechterhalten wird.
Die Stärke mit spezifiziertem Feuchtigkeitsgehalt wird bei einer Temperatur von 60–160°C und vorzugsweise von 90–120°C erhitzt. Obgleich die am stärksten erwünschte Temperatur leicht in Abhängigkeit von der besonderen Stärke und dem Amylosegehalt variieren kann, ist es wichtig, dass die Stärke in körnigem Zustand bleibt und ihr Doppelbrechungsmerkmal nicht verliert. Auch die Erhitzungszeit kann in Abhängigkeit von der verwendeten Stärke, ihrem Amylosegehalt, dem gewünschten Level des Gesamtballaststoffgehalts wie auch der Feuchtigkeitsmenge und der Erhitzungstemperatur variieren. Typischerweise wird die Erhitzungszeit 0,5 bis 24 h und vorzugsweise 1 bis 4 h betragen.
Die wünschenswertesten Bedingungen zur Behandlung von Stärke unter Erhalt eines hohen Levels an Gesamtballaststoffen sind so, dass die körnige Struktur der Stärke nicht zerstört wird und die Körner noch doppelbrechend sind. Allerdings kann es einige Bedingungen geben, z. B. hohe Feuchtigkeit und hohe Temperatur, bei denen das Stärkekorn teilweise gequollen sein kann, die Kristallinität aber nicht vollständig zerstört ist. Unter diesen Bedingungen wurde das Stärkekorn noch nicht vollständig zerstört und es kann noch eine Erhöhung im Gesamtballaststoffgehalt gemäß der vorliegenden Erfindung erreicht werden. Dementsprechend umfasst der Ausdruck "körnige Stärke", wie er hier verwendet wird, Stärke, die ihre körnige Struktur vorwiegend beibehält und eine gewisse Kristallinität hat.
Nach der Hitzebehandlung kann die Stärke an der Luft trocknen gelassen werden, um Gleichgewichts-Feuchtigkeits-Bedingungen zu erreichen, oder sie kann unter Verwendung eines Flash-Trockners oder anderer Trocknungsmittel getrocknet werden.
Das resultierende Stärkeprodukt, das unter definierten Bedingungen wie oben beschrieben erhitzt wurde, wird noch eine körnige Struktur haben, wie es durch sein Doppelbrechungsmerkmal deutlich wird, wenn es unter dem Mikroskop betrachtet wird. Das körnige resistente Stärkeprodukt wird einen Gesamtballaststoffgehalt von mindestens 12% und vorzugsweise mindestens 20 Gew.% haben. Die Menge an Gesamtballaststoff oder der resistente Stärkegehalt wird unter Verwendung eines Standardverfahrens bestimmt, das von Prosky et al., Journal of Association of Official Analytical Chemists (AOAC), 68, 677 (1985), das unten beschrieben wird, bestimmt. Der Level des Ballaststoffgehalts der Stärke wird in Abhängigkeit von den verwendeten Bedingungen wie auch vom besonderen Stärkeausgangsmaterial variieren.
Das resultierende körnige Stärkeprodukt ist auch durch die Einsetz-Schmelz-Temperatur (onset melting temperature) von mindestens etwa 90°C charakterisiert, wie sie durch Differential-Scanning-Kalometrie (DSC) unter Verwendung des unten beschriebenen Verfahrens gezeigt wird.
Das körnige resistente Stärkeprodukt der vorliegenden Erfindung kann Lebensmitteln zugesetzt werden, um zu den Gesamtballaststoffen, die in den Lebensmitteln vorliegen, beizutragen. Typische Lebensmittelprodukte, denen das Stärkeprodukt als Ballaststoffergänzung zugesetzt werden kann, umfassen Cerealien, z. B. gebrauchsfertige, gepuffte oder expandierte Cerealien und Cerealien, die vor dem Essen gekocht werden; Backwaren wie Brot, Kräcker, Kekse, Muffins, Rolls, Konditorwaren und andere Ingredienzien auf Kornbasis; Pasta; Getränke; gebratene und beschichtete Lebensmittel, Snacks; usw.
Die Menge an körniger resistenter Stärke und Ballaststoff, die zugesetzt werden kann und in einem gegebenen Lebensmittel verwendet werden kann, wird zum großen Ausmaß durch die Menge bestimmt, die vom funktionellen Standpunkt toleriert werden kann. Mit anderen Worten, die Menge an körniger resistenter Stärke und an Faser (bzw. Ballaststoffen), die allgemein verwendet wird, wird so hoch sein, wie es bei der organoleptischen Beurteilung des Lebensmittels akzeptabel ist. Im allgemeinen kann die körnige resistente Stärke in Lebensmittelanwendungen mit etwa 0,1 bis 50 Gew.% des Lebensmittels und insbesondere von 1 bis 25 Gew.% verwendet werden.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele weiter erläutert, wobei alle Teile und alle Prozentangaben Gewichtsteile bzw. Gewichtsprozente sind und alle Temperaturen in °C sind, wenn nichts anderes angegeben ist.
Die folgenden Testverfahren wurden bei der Beurteilung der verschiedenen resistenten Stärkeprodukte, die gemäß der Erfindung hergestellt wurden, eingesetzt.
A. Bestimmung des Gesamtballaststoff-Gehalts
Das folgende Verfahren umreißt das Prosky-Verfahren zur Bestimmung des Ballaststoffes oder der resistenten Stärke in Lebensmitteln nach Prosky et al., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 68, 677 (1985).
Reagenzien:

(a) Ethanol 95% Vol./Vol., technische Qualität.
(b) Ethanol 78%. Gebe 207 ml H₂O in einen 1 l-Kolben. Verdünne mit 95%igem EtOH zum entsprechenden Volumen, mische und verdünne, wenn notwendig, erneut mit 95%igem EtOH auf das entsprechende Volumen. Mische.
(c) Aceton, zur Analyse.
(d) Phosphatpuffer, 0,05 M, pH 6,0. Löse 0,875 g wasserfreies dibasisches Natriumphosphat (Na₂HPO₄) (oder 1,097 g Dihydrat) und 6,05 g monobasisches Na-Phosphat-Monohydrat (NaH₂PO₄) (oder 6,8 g Dihydrat) in 700 ml H₂O. Verdünne mit H₂O auf 1 l. Prüfe den pH mit einem pH-Meter.
(e) Termamyl (hitzestabile alpha-Amylase)-Lösung – Nr. 120 L, Novo Laboratories, Inc., Wilton, Connecticut 06897. Kühl halten.
(f) Protease. Nr. P-5380, Sigma Chemical Company. Kühl halten.
(g) Amyloglucosidase. Nr. A-9268; Sigma Chemical Company. Kühl halten. Alternativ ist ein Kit, der alle drei Enzyme (vorgetestet) enthält, von Sigma Chemical Company, Katalog Nr. KR-185 erhältlich.
(h) Natriumhydroxidlösung, 0,171 N. Löse 6,84 g NaOH, ACS in ca. 700 ml H₂O in einem 1 l-Kolben. Verdünne mit Wasser auf das entsprechende Volumen.
(i) Phosphorsäurelösung, 0,205 M. Löse 23,6 g H₃PO₄, ACS (85%) in H₂O in einem 1 l-Kolben. Verdünnte mit H₂O zum entsprechenden Volumen.
(j) Celite C-211, mit Säure gewaschen. Fisher Scientific Company.

Verfahren:
Um den Beitrag von Reagenzien zum Rest zu messen, werden durch das ganze Verfahren Blindproben laufen gelassen.
Eine Probe wird homogenisiert und über Nacht bei 70°C im Vakuumofen getrocknet, im Exikator abgekühlt und auf 0,3 bis 0,5 mm (mesh) trocken gemahlen.
Wiege zweimal 1 g Proben, auf 0,1 mg genau, in 400 ml-Erlenmeyer-Kolben. Die Probengewichte sollten nicht um mehr als 20 mg differieren. Gebe 50 ml Phosphatpuffer, pH 6,0, in jeden Kolben. Prüfe den pH und stelle ihn, wenn notwendig, ein. Gebe 0,1 ml Termanyllösung hinzu. Bedecke den Kolben (bzw. den Becher) mit Aluminiumfolie und gebe ihn 15 min in ein siedendes H₂O-Bad. Schüttle leicht in 5 min-Intervallen. Erhöhe die Inkubationszeit, wenn die Anzahl der Kolben im siedenden Wasserbad es schwierig macht, dass die Inhalte der Kolben eine Innentemperatur von 100°C erreichen. Verwende ein Thermometer, um sicherzustellen, dass 100°C in 15 min erreicht wird. Insgesamt 30 min im H₂O-Bad sollten ausreichend sein.
Kühle die Lösungen auf Raumtemperatur, stelle den pH durch Zusatz von 10 ml 0,171 N NaON-Lösung auf pH 7,5 ± 0,1 ein.
Setze 5 mg Protease zu. (Protease wird durch einen Spatel denaturiert, so dass es vorteilhaft sein kann, unmittelbar vor der Verwendung mit ca. 0,1 ml Phosphatpuffer eine Enzymlösung herzustellen und die erforderliche Menge zu pipettieren).
Bedecke den Kolben mit Aluminiumfolie. Inkubiere 30 min bei 60°C unter kontinuierlichem Rühren, kühle ab, setze 10 ml 0,205 M H₃PO₄-Lösung zur Einstellung des pHs auf 4,5 ± 0,2 hinzu. Gebe 0,3 ml Amyloglucosidase hinzu, bedecke mit Aluminiumfolie und inkubiere 30 min bei 60°C unter kontinuierlichem Rühren. Füge 280 ml 95%iges Ethanol, das auf 60°C vorerwärmt ist, hinzu.
(Messe das Volumen vor dem Erwärmten). Lasse es sich bei Raumtemperatur über 60 min ein Präzipitat bilden.
Wiege einen Tiegel, der Celite enthält, auf 0,1 mg genau, befeuchte und verteile das Celitebett im Tiegel unter Verwendung eines 79%igen EtOH-Stroms aus einer Waschflasche. Lege einen Sog an, um Celite als flache Matte auf eine Glasfritte zu ziehen. Halte den Sog aufrecht und führe das Präzipitat aus der Enzymverdauung in den Tiegel über.
Wasche den Rückstand der Reihe nach mit drei 20 ml Portionen von 78%igem EtOH, zwei 10 ml Portionen von 95%igem EtOH und zwei 10 ml Portionen Aceton. Mit einigen Proben kann sich Gummi bilden, der Flüssigkeit einschließt. Wenn dies der Fall ist, breche die Oberfläche mit einem Spatel auf, um die Filtration zu verbessern. Die Zeit zur Filtration und des Waschens wird von 0,1 bis 6 h pro Probe variieren, wobei der Durchschnitt 1,2 h ist. Lange Filtrationszeiten können vermieden werden, indem das Absaugen während der Filtration sorgfältig unterbrochen wird.
Trockne den Tiegel, der den Rückstand enthält, über Nacht bei 70°C im Vakuumofen oder bei 105°C im Luftofen. Kühle den Exsikkator und wiege auf 0,1 mg genau. Subtrahiere Tiegel- und Celite-Gewicht, um das Gewicht des Rückstands zu bestimmen.
Analysiere den Rest aus der Probe aus einem Satz von Duplikaten auf Protein und Asche. Subtrahiere die Werte für Protein und Asche vom Rückstand, um die Gesamtballaststoffe (TDF) oder die Menge an resistenter Stärke zu erhalten.
Bestimmung der TDF (%):
Bestimmung der TDF (%):
B. Differenzial-Scanning-Kalorimetrie (DSC)
Das folgende Verfahren wurde verwendet, um Differential-Scanning-Kalorimetrie (DSC)-Daten zu erhalten. DSC-Messungen wurden bei jeder der Proben mit einem Perkin-Elmer DSC-4-Gerät durchgeführt, das mit einer 3600 Thermoanalysendatenstation und einem Diagrammauftragegerät 2 von Perkin-Elmer (Perkin-Elmer Corporation, Instrument Division, Norwalk, Connecticut) ausgestattet war. Stärkeproben mit etwa 10 mg wurden genau in einer Perkin-Elmer-Schale aus rostfreiem Stahl gewogen. Es wurden etwa 40 mg entionisiertes Wasser zugegeben und dann wurde die Schale dicht verschlossen und über Nacht bei 4°C äquilibrieren gelassen. Das DSC-Scanning wurde von 20° bis 180°C mit einer Heizgeschwindigkeit von 10°C/min durchgeführt. Eine leere Schale stellte die Referenzprobe dar.
BEISPIEL I
Eine 1400 g-Probe der Stärke Hylon^(R) VII (Feuchtigkeitsgehalt 10,6%), ein Produkt der National Starch and Chemical Company, die etwa 70 Gew.% Amylose enthielt, wurde in einen Ross-Mischer, einen Zweifach-Planetenmischer mit Standardschaufeln (Produkt von Charles Ross and Son Company) gegeben. Sechshundert (600) ml Wasser wurden der Probe zugesetzt, der Mischer wurde geschlossen und die Stärke und das Wasser wurden bei Raumtemperatur 10 min gemischt. Dieses lieferte eine Probe mit einem Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 37,4 Gew.%. Die Temperatur wurde bei fortgesetztem Mischen auf 100°C erhöht und für einen bestimmten definierten Zeitraum bei dieser Temperatur gehalten und dann auf 30°C abgekühlt. Die Probe wurde aus dem Mischer genommen und luftgetrocknet. In der gleichen Weise wurden mehrere identische Stärkeproben auf einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 37,4 Gew.% präpariert. Die Proben wurden alle auf 100°C erhitzt und für variierende Zeiträume von 0,5 bis 6 h bei dieser Temperatur gehalten. Die Proben wurden auf den Gesamtballaststoffgehalt (TDF) unter Verwendung des Prosky-Verfahrens und auf die Daten der Differenzial-Scanning-Kalorimetrie (DSC) analysiert, wobei die vorstehend beschriebenen Verfahren angewendet wurden. Die in der folgenden Tabelle 1 angegebenen Resultate zeigen, dass TDF von 12,0% auf 38,1 und 41,9% nach einer Hitzebehandlung von einer bzw. vier Stunden anstieg. Die Einsetz-Schmelz-Temperaturen To (Temperaturen, bei denen das Schmelzen einsetzte), erhöhten sich von 67,6 auf 89,4 bzw. 92°C. Auch angegeben sind die Spitzentemperaturen Tp und die Schlusstemperaturen Tc.
Tabelle 1 Eigenschaften der hitzebehandelten Hylon VII (37,4% Wasser, 100°C) über variierende Zeiträume
BEISPIEL II
Proben der Stärke Hylon VII (70% Amylosegehalt) wurden wie in Beispiel I so präpariert, dass sie variierende Wassergehalte hatten. Alle Proben wurden für 4 h auf 100°C erhitzt und wie Beispiel I auf die TDF- und DSC-Eigenschaften analysiert, wie es in Tabelle 2 gezeigt ist.
Tabelle 2 Eigenschaften der hitzebehandelten Stärke (100°C, 4 h) mit variierendem Wassergehalt
Die Resultate zeigen die signifikante Erhöhung beim TDF oder der resistenten Stärke, wenn Stärke mit einer definierten Wassermenge, insbesondere mit 37,4%, hitzebehandelt wird.
BEISPIEL III
Verschiedene Stärkeproben mit variierenden Mengen an Amylose wurden unter den in der folgenden Tabelle 3 angegebenen Bedingungen in der Weise, wie es in Beispiel I beschrieben ist, hitzebehandelt. Die Proben waren Hylon V, ein Stärkeprodukt von National Starch and Chemical Company, das einen hohen Amylosegehalt von etwa 50% hat; Hylon VII, ein anderes Produkt von National Starch and Chemical Company, das einen Amylosegehalt von 70% hat; und VJR-Stärke, die einen hohen Amylosegehalt (normal) 78,3% und Amylose mit niedrigem Molekulargewicht, 18,7% hat, hergestellt wie nachfolgend näher beschrieben wird und außerdem in US-A-5,300,145 beschrieben ist.
Tabelle 3 Vergleichende Hitzebehandlung verschiedener Stärken
BEISPIEL IV
Eine Probe der Fluiditätsstärke (dünn-siedend, Säure-umgewandelt) Hylon VII (70% Amylose), ein Produkt von National Starch and Chemical Company), wurde entsprechend dem in Beispiel I beschriebenen Verfahren präpariert. Die Probenstärke hat einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 37% und wurde auf 100°C erhitzt und für 2,5 h bei dieser Temperatur gehalten. Die hitzebehandelte Stärke wurde beurteilt und hatte einen Gesamtballaststoffgehalt (TDF) von 36,8%, was deutlich besser war als die unbehandelte Probe derselben Stärke, die einen TDF von 21,3% hatte.
BEISPIEL V
Eine chemisch modifizierte Stärke mit hohem Amylosegehalt wurde wie folgt hergestellt, hitzebehandelt und beurteilt. Eine VJR-Stärke, ein Produkt von National Starch and Chemical Company, die in Beispiel III beschrieben wurde und einen Gehalt von 78,3% hochmolekularer Amylose (normal) und 18,7% Amylose mit niedrigem Molekulargewicht hatte, wurde mit 0,98 Gew.% Octenylbernsteinsäureanhydrid unter den folgenden Bedingungen modifiziert. VJR-Stärke (3000 g) wurde in 4500 ml Wasser aufgeschlämmt und der pH der Aufschlämmung wurde mit 3% NaOH auf 7,6 erhöht. Während der pH bei 7,5 bis 7,6 gehalten wurde, wurden 29,44 g Octenylbernsteinsäureanhydrid unter Rühren zugesetzt. Als die Reaktion kein Alkali mehr verbrauchte, wurde der pH der Aufschlämmung unter Verwendung von HCl auf 5,5 eingestellt und die Stärke wurde dann filtriert und luftgetrocknet.
Die veresterte Stärke, die einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 37% hatte, wurde wie in Beispiel I bei 100°C bei einer Erhitzungszeit von 2,5 h hitzebehandelt. Die hitzebehandelte modifizierte Stärke wurde beurteilt und es wurde festgestellt, dass sie einen Gesamtballaststoffgehalt (TDF) von 37,5% hatte. Dieser war deutlich besser als er von einer Probe derselben modifizierten Stärke gezeigt wurde, die nicht hitzebehandelt worden war und einen TDF von 25,9% hatte.
BEISPIEL VI

Eine Probe der Stärke Hylon VII (70% Amylose) wurde wie in Beispiel I präpariert und hitzebehandelt (37% Wasser, 100°C, 6 h) und als Ingredienz in Hafermehlcookies beurteilt. Testrezeptur - Hafermehl-Cookies

Ingredienzien	Menge, %
A.
Baka-Snak	1,75
Teststärke	6,00
schnellkochender, gewalzter Hafer	21,65
Brauner Zucker	14,10
Mehl	13,20
Kristallzucker	11,70
Natriumhydrogencarbonat	0,40
B.
Butter oder Margarine	21,00
Eier	10,20
	100%

Herstellung:

1. Mische alle Ingredienzien von A zu einer gleichmäßigen Konsistenz
2. Rühre die Butte von B cremig
3. Setze die trockene Mischung von A und die leicht geschlagenen Eier zur Butter. Mische zur einheitlichen Konsistenz.
4. Tropfe Teelöffelfüllungen auf ein nicht gefettetes Kuchenblech. Backe 10 bis 12 min bei 190,56°C (375°F).

Die hergestellten Cookie-Produkte, die die resistente Stärke der vorliegenden Erfindung enthielten, waren ein akzeptabel Produkt und hatten eine stärkere Ausbreitung als ein Kontrollrezept, das mit verstärkt gewalzten Haferflocken hergestellt worden war, sowie einen geeigneten Geschmack.
BEISPIEL VII

Eine Probe der Stärke Hylon VII (70% Amylose) wurde in der gleichen Weise wie in Beispiel I präpariert und erhitzt (37% Wasser, 100°C), allerdings in zwei Zyklen, wobei das Produkt nach jedem Heizzyklus auf 30°C abgekühlt wurde; danach erfolgte eine Flash-Trocknung. Dieses Produkt wurde als Ingredienz in Kräcker formuliert. Testrezeptur – Kräcker

Ingredienzien	Menge, %
A.
Soft-A-Silk-Kuchenmehl	51,19
Teststärke	10,26
Kristallzucker	4,52
Natriumbicarbonat	0,82
Calciumphosphat	0,82
Salz	0,51
Mehl aus gemälzter Gerste	0,92
B.
Shortening	7,70
C.
Wasser	20,00
Maissirup mit hohem Fructosegehalt	1,95
Ammoniumbicarbonat	1,28
Natriumbisulfat	0,03
	100,00

Herstellung:

1. Vermische unter Verwendung eines Küchenmischers (mit Schaufelbefestigung) die Ingredienzien A trocken.
2. Füge das Shortening von Teil B zu und mische 2 min bei Geschwindigkeit Nr. 1.
3. Mische C bis zur vollständigen Dispersion.
4. Gebe C langsam in den Mischer und mische 10 min bei Geschwindigkeit Nr. 2.
5. Walze den Teig mit einem Rondo-Sheeter zu einer Dicke von 1 mm.
6. Schichte viermal aufeinander und walze zu einer Enddicke von 1 mm.
7. Schneide in gewünschte Stücke und backe 8 min bei 425°C.

Der hergestellte Kräcker, der die resistente Stärke der vorliegenden Erfindung enthält, war im Vergleich zu Produkten, die unter Verwendung von Hylon VII Haferkleie, raffinierter Haferfaser und einer Kontrolle mit Soft-A-Silk-Mehl anstelle der Teststärke hergestellt worden war, vorteilhaft. Der Kräcker mit der resistenten Teststärke hatte einen guten Geschmack und ein gutes Aussehen.
BEISPIEL VIII
Die Verwendung der körnigen resistenten Stärke der vorliegenden Erfindung in heißen Cerealien und ihre Beurteilung erfolgten wie folgt. Fünf (5) g der Stärke Hylon VII mit hohem Amylosegehalt (70% Amylose), die wie in Beispiel I präpariert und hitzebehandelt worden war (37,4% Feuchtigkeit, erhitzt für 4 h auf 100°C) und die einen Gesamtballaststoffgehalt (TDF) von 41,9 hatte, wurde zu einer Packung mit 35 g Quakers Heiß-Instantcerealien, Apfel und Zimt, gegeben. Zu der vermischten Cerealien-Mischung wurden dann 126 g siedend heißes Wasser gegeben. Es wurde eine zusätzliche Cerealien-Mischung in der gleichen Weise hergestellt; diese enthielt aber 11 g Stärkeprobe und 145 g heißes Wasser.
Die hergestellten Cerealienproben wurden beobachtet und im Geschmack untersucht und mit Kontrollproben, die dieselbe Cerealienpackung umfassten, wobei die Stärke mit einer gleichen Menge Haferflocken ersetzt war, verglichen. Die Cerealien, die die körnige resistente Stärke enthielten, waren im Vergleich zu den Kontrollen etwas dünner in der Textur und hatten ein akzeptables Feeling im Mund und ein akzeptables Aroma.
BEISPIEL IX

Es wurde ein typischer heller Kuchen hergestellt, der die körnige resistente Stärke der vorliegenden Erfindung enthielt und somit einen Kuchen mit erhöhtem Ballaststoffgehalt lieferte; er hatte die folgende Rezeptur: Kuchenrezeptur

Ingredienz	Menge, %
Zucker	237
Shortening	64
Vanille	1,5
Instant Pure-Flo F	10,5
Kuchenmehl	156,6
Stärke/Ballaststoff-Probe	7,4
NFDM	14
Backpulver	5,5
Salz	3,5
ganze Eier	100
Wasser	120
Öl	110
insgesamt	830

Der Kuchen wurde so, wie es im Folgenden beschrieben wird, hergestellt, wobei die in Beispiel I präparierte Stärke mit hohem Amylosegehalt, Hylon VII, mit einem Gesamtballaststoffgehalt (TDF) von 41,9% verwendet wurde. Ein weiteres Kuchenbeispiel wurde unter Verwendung von 7,7 g Stärke/Ballaststoff-Probe, die die VJR-Stärke von Beispiel III mit einem Gesamtballaststoffgehalt (TDF) von 42,3% war, formuliert. Ein Kontrollkuchen wurde unter Verwendung derselben Rezeptur allerdings ohne die Stärke/Ballaststoffprobe hergestellt (es wurde dieselbe Menge an Kuchenmehl verwendet, um Stärke/Ballaststoff zu ersetzen und insgesamt 830 g zu erhalten).
Andere Kuchen wurden hergestellt, indem zweimal die Menge der Stärke/Ballaststoff-Probe a) 14,8 g der Stärke Hylon VII (149,2 g Kuchenmehl) und b) 15,4 g VJR-Stärke (148,6 g Kuchenmehl) verwendet wurde.
Die Kuchen wurden wie folgt hergestellt. Das Shortening wurde in eine Mischschüssel gegeben und leicht geschlagen. Der Zucker wurde zugesetzt und die Mischung wurde vermischt, bis sie gleichmäßig und hell war. Vanillin wurde dann zugesetzt. Ein trockenes Gemisch aus der Stärke, NFDM, Backpulver und Salz wurde hergestellt. Die Hälfte des trockenen Gemisches wurde zu den Eiern, Wasser und Öl gegeben und den nassen Ingredienzien zugemischt. Das restliche trockene Gemisch wurde zugesetzt, gemischt und für 2 min bei mittlerer Geschwindigkeit vermischt. Die hergestellte Rezeptur wurde dann gebacken und die resultierenden Produkte wurden betrachtet und wie folgt beurteilt:
Die Resultate zeigten, dass akzeptable Kuchen mit geeignetem Geschmack unter Verwendung der zugesetzten körnigen resistenten Stärke/des Ballaststoffs der Erfindung hergestellt wurden.
BEISPIEL X
Unter Verwendung des resistenten Stärkematerials der vorliegenden Erfindung wurden wie folgt Pasta-Produkte hergestellt.
Eine Probe der Stärke Hylon VII wurde wie in Beispiel I beschrieben bei 100°C für 2,5 h hitzebehandelt. Die Probe wurde bei einer Eingabetemperatur von 79,44°C (175°F) und einer Ausgangstemperatur von 65,56°C (150°F) flash-getrocknet. Die Probenstärke wurde in den zwei nachfolgend angegebenen Formulierungen hergestellt:
Die Ingredienzien wurden wie folgt zu geformten Pasta-Produkten geformt. Wasser wurde zu dem Mehl und der Stärke gegeben, das Ganze wurde vermischt und in ein Teigmaterial übergeführt; dieses wurde dann unter Bildung der geformten Pasta-Produkte durch einen Extruder geführt. Die Produkte wurden in einem Ofen mit 48,89°C (120°F), Trockenthermometer, und 37,78°C (100°F), Feuchtkugeltemperatur, zu einem Feuchtigkeitsgehalt von etwa 7% getrocknet. Die Pasta wurde dann in siedendem Wasser 8 min lang gekocht. Die gekochten Produkte wurden bezüglich Aussehen, Festigkeit und Geschmack beurteilt und es wurde festgestellt, dass sie akzeptabel waren.
BEISPIEL XI
Ein Sportgetränk wurde hergestellt, indem 5,96 g der Stärke Hylon VII, hergestellt wie in Beispiel I (TDF 41,9%), zu 946 g Gatorade-Fruchtpunch gegeben wurden. Das Getränkeprodukt wurde auf 85°C (185°F) erhitzt und heiß in einen Getränkebehälter gefüllt. Die Getränke wurden dann bis zur Beurteilung in einem Kühlschrank gelagert. Ein anderes Getränk wurde in ähnlicher Weise unter Verwendung von 6,19 g VJR-Stärke, die wie in Beispiel III hergestellt worden war (TDF 40,34%) hergestellt.
Die Produkte wurden beurteilt und zeigten ein gewisses Absetzen von Partikeln und daher war Schütteln und Vermischen notwendig, um die Partikel zu suspendieren. Die Getränke mit dem zugesetzte Stärkeballaststoff zeigten im Vergleich zur Kontrolle, die das Getränk ohne zugesetzte Stärkeprodukt war, kein nachteiliges Aroma oder nachteiliges Feeling im Mund. Die Resultate zeigen, dass die Stärkeprodukte in Getränken des viskosen Typs einsetzbar sind.
BEISPIEL XII
Dieses Beispiel erläutert die Herstellung von essfertigen extrudierten gepufften Cerealien (auch als direkt-expandierte Cerealien bezeichnet), die hitzebehandelte Stärken mit hohem Amylosegehalt, welche durch das Verfahren von Beispiel I (Hylon VII) und Beispiel III (VJR) hergestellt wurden, enthalten. Die Stärken wurden in die folgenden Cerealienrezepturen eingearbeitet:
Die Ingredienzien für die Kontrolle wurden abgewogen, in einen Glaskolben mit einem Fassungsvermögen von einer Gallone gegeben, dieser wurde verschlossen und für 3 h auf Walzen mit 100 U/min gestellt, um ein ausreichendes Vermischen sicherzustellen. Rezepturen (1000 g), die die Stärken enthielten, wurden in der gleichen Weise hergestellt, wobei ein Teil des Maismehls ersetzt wurde. Die Cerealien-Mischung wurde unter Verwendung eines Werner- und Pflenderer-ZSK-30-Corotations-Doppelschnecken-Extruders (ölgeheizte Zylinder) entweder mit einer Acrison, Modell Nr. 104, volumetrischen Beschickungsvorrichtung oder einer Zeromax, Modell Nr. E-2, Beschickungsvorrichtung extrudiert.

Die Extruderbedingungen waren wie folgt:

Zylinderlänge	7 (L/D = 21)
Schneckenkonfiguration	SC 7-20A*
Schneckengeschwindigkeit	350 U/min
Düsendurchmesser	3 mm
Trockenbeschickungsrate	13 kg/h
Feuchtigkeit der gesamten Beschickung	17%
Zylindertemperatur	80/150/140°C

Cerealienrezepturmischungen wurden unter Anwendung der obigen Verfahrensbedingungen in den Extruder eingeführt. Nachdem die Gleichgewichtsbedingungen erreicht waren (Einheitlichkeit der austretenden Extrudate und konstante Drehmomentablesungen), wurden Proben ausgestanzt (unter Verwendung einer automatischen sich drehenden Stanzvorrichtung) und unter Verwendung von Skala-Messinstrumenten wurde ihre Expansion gemessen. Proben wurden dann für 2 bis 5 min in einem Narco-Ofen mit mechanischer Konvektion bei 200 bis 210°C getoastet. Die Proben wurden bezüglich der Massedichte und der Expansion beurteilt. Proben, die hitzebehandelte Stärken enthielten, lieferten im Vergleich zu der Kontrolle eine ähnliche Expansion und eine ähnliche Massedichte (siehe Tabelle).

Claims

Verfahren zur Herstellung einer resistenten körnigen Stärke, die einen Gesamtballaststoffgehalt, wie er durch das Verfahren von Prosky et al., Journal of Association of Official Analytical Chemists (ADAC) 68, 677 (1985) gemessen wird, von mindestens 12% hat, umfassend: Erhitzen einer Stärke mit hohem Amylosegehalt, die einen Amylosegehalt von mindestens 40% hat, unter einer Kombination von Feuchtigkeits- und Temperaturbedingungen, dass die Stärke in körnigem Zustand bleibt und doppelbrechend ist, wobei der Gesamtfeuchtigkeitsgehalt der Stärke 10 bis 80 Gew.%, bezogen auf das Gewicht des Gemisches aus Stärke und Wasser, ist und die Temperatur zwischen 60 und 160°C liegt.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 20 bis 45 hat.
Verfahren nach Anspruch 2, wobei die Stärke bei einer Temperatur von 90 bis 120°C erhitzt wird.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt Maisstärke ist.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt chemisch modifiziert ist.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 30 bis 40 Gew.% hat und das Erhitzen bei einer Temperatur von 90 bis 120°C erfolgt.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt einen Amylosegehalt von mindestens 65 Gew.% hat.
Verfahren nach Anspruch 7, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 20 bis 45 hat und das Erhitzen bei einer Temperatur von 90 bis 120°C erfolgt.
Verfahren nach Anspruch 8, wobei das körnige Stärkeprodukt einen Gesamtballaststoffgehalt von mindestens 20% hat.
Verfahren nach Anspruch 9, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 30 bis 40 Gew.% hat.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt im wesentlichen reine Stärke ist, die aus einer Pflanzenquelle mit einem Amyloseextendergenotyp extrahiert wurde, wobei die Stärke weniger als 10% Amylopektin, bestimmt durch Butanolfraktionierungs-/Ausschluss-Chromatographie-Messung, umfasst.
Verfahren nach Anspruch 11, wobei die Stärke mit hohem Amylosegehalt einen Gesamtfeuchtigkeitsgehalt von 20 bis 45 hat und das Erhitzen bei einer Temperatur von etwa 90 bis 120°C erfolgt.
Resistentes körniges Stärkeprodukt, das durch das Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche hergestellt wurde.
Resistentes Stärkeprodukt, das einen Gesamtballaststoffgehalt, wie er durch das Verfahren von Prosky et al., Journal of Association of Official Analytical Chemists (AOAC) 68, 677 (1985) gemessen wird, von mindestens 20% hat, einen Amylosegehalt von mindestens 40 Gew.% hat und eine DSC-Einsetz-Temperatur von mindestens etwa 90°C hat, wobei die Stärke körnig und doppelbrechend ist.
Stärkeprodukt nach Anspruch 14, wobei der Amylosegehalt mindestens 65% ist.
Lebensmittelprodukt, das die resistente Stärke nach einem der Ansprüche 13 bis 15 umfasst.
Lebensmittelprodukt nach Anspruch 16, wobei das Lebensmittelprodukt eus der Gruppe bestehend aus Cerealien, Brot, Kräckern, Keksen, Kuchen, Pasta, Getränken, gebratenen und beschichteten Lebensmitteln und Snacks ausgewählt ist.