WO1993000106A1

WO1993000106A1 - Preparation a usage externe contenant de la cyclosporine

Info

Publication number: WO1993000106A1
Application number: PCT/JP1992/000798
Authority: WO
Inventors: Katsuo Komiya; Rie Igarashi; Mitsuko Takenaga; Akira Yanagawa; Yutaka Mizushima; Tateo Nishimura; Toshitaka Kudo; Kunio Ando
Original assignee: Ltt Institute Co., Ltd.
Priority date: 1991-06-27
Filing date: 1992-06-22
Publication date: 1993-01-07
Also published as: US5504068A; HU9300654D0; NZ243297A; EP0547229A1; AU2000592A; FI930836A; SK11993A3; IE922045A1; IL102236A0; FI930836A0; EP0547229A4; KR930702014A; MX9203448A; JPH05310591A; PT100622A; CA2090417A1; HUT67178A

Description

明細書

シクロスポリン含有外用薬剤

技術分野

本発明は、シクロスポリンを薬効成分として含む外用薬剤に関するものである。この外用薬剤には、ェマルジヨンタイプ及び非ェマルジヨンタイプの外用薬剤が包含される。

本明細書で言うシクロスポリンは、シクロスポリン群抗生物質の 1つ又は複数の混合物を指称するものである, のシクロスポリンについては、例えば、特開平 2— 1 7 1 2 7号公報に詳述されている。

背景技術

シクロスポリンは、免疫抑制剤として、腎移植を含む臓器移植の分野において広く使用されてきたことは良く知られている。また、シクロスポリンは単に臓器移植だけではなく、自己免疫反応を主要な病因とする種々の疾患に有効であることが次第に明らかにされてきた。シクロスポリンの関節炎に対する有効性は、既に多くの論文に記載されていることからみて確実である。その他、シクロスポリンが適用されたリ、適用が提案されている自己免疫疾患としては、関節炎以外に、自己免疫血液疾患、慢性気管支喘息、全身性エリテマトーデス、多発性筋炎、強皮症、ゥェゲネル症候群、重症筋無力症、尋常性乾癬、自己免疫性腸疾患（漬瘍性大腸炎、クローン病）、サルコィドーシス、多発性硬化症、若年性糖尿病、ブドウ膜炎、乾癬性関節炎、糸球体腎炎などがある。

上記のように、シクロスポリンは、臓器移植時での拒絶反応阻止及び自己免疫疾患治療に大きく貢献しているが、長期にわたリ経口投与した場合には、しばしば腎臓に重大な障害が起こることが知られていて、この腎毒性がこれまでシクロスポリンの広範な適用を阻んできた。しかし. 自己免疫疾患の中には、外用薬剤が適用可能な皮膚、眼ないし関節に病変が生ずる場合も多い。外用薬剤が適用可能な疾患の場合には、腎臓に障害が起こる可能性をはらむ全身投与は、危険が大きすぎるので避ける方が賢明である。病巣が真皮層に限局されている際は、局所の表皮を通じて薬物を送リ込んだ方が、薬物の量が節減できることに加え、局所的な薬物濃度上昇にともなう薬効の増強と全身的な副作用の低減が期待できるからである。つまリ、外用薬剤は、シクロスポリンのドラッグ ·デリノくリー ' システム（d r u g d e l i v e r y s y s t e m ： D D S ) として、最も合理的な形態である。

一方、シクロスポリンは、水溶性の薬効物質や、低分子量の薬効物質の場合とは異なリ、これを治療効果にすぐれ外用薬剤に製剤化することは非常に困難である。その理由の 1つは、シクロスポリンは、その分子量が 1 2 0 0を起える大環状ポリぺプタイドであリ、皮膚の角質層を透過し難く、真皮層の病巣部に到達することが非常に困難であることにある。その理由の他の 1つは、シクロスポリンは水不溶性でぁリ、しかもそれを溶解する有機溶媒が制約されていることにある。シクロスポリンを溶解する有機溶媒としては、エタノールゃィソプロパノール等の低級アルコールが一般に用いられているが、これらの低級アルコールは、高い濃度で外用薬剤に用いると、皮膚に対して強い刺激性を示し、安全な外用薬剤を得ることができない。一方、外用薬剤中の低級アルコール濃度を抑えると、シクロスポリンの外用薬剤中での均一分散性が悪くなリ、治療効果にすぐれた外用薬剤が得られなくなる。

これまでにシクロスポリン軟膏を臨床応用した研究報告から読み取れることは、シクロスポリンを 1 0%配合させた場合でも、医薬的に有効だったリ無効だったリして、その薬理効果に再現性のないことである。また処方例が記載されていても実際の薬理効果が不明な場合もある。例えば、特開平 2— 1 7 1 27号公報では、シクロスポリン及び炭素数 1 2〜24のモノ又はポリ不飽和脂肪酸又は不飽和アルコール、例えばバタセン酸、バクセニルアルコール、リノール酸、リノレイルアルコール、リノレン酸、リノレニルアルコール、エライジン酸、エライジンアルコール、エル力酸又はエル力アルコールを必須成分として含む組成物が開示されている。この組成物は、種々の皮膚疾患に有効であると述ベられているが、しかしながら、その薬理効果に関して、この公報の記載では、具体的に明らかにされず単に皮虜浸透性についてシクロスポリンの濃度値が挙げられているのみであリ、例えば乾せん性疾患に対してどの程度の改善が得られるかについての具体的な数値は一切記載されていない。

皮廣疾患については数種の症例がぁリ、これらについてシクロスポリンが有効であるとされている文献が多く知られている。

例えば、アトピー性皮虜炎については、以下の文献がある。「A c t a . D e r m. V e n e r o l . 」 S u p p l . 144、 1 3 6 ~ 1 3 8 ( 1 989) では、シクロスポリンを 10重量％含むアルコール性油状ゲルを用いて薬理効果があつたとしている。又、「A r c h. D e r m. 」 1 25 ; 5 70 ( 1 98 9) では、同じくシクロスポリンを 1 0 J画 0798

4

重量％含むアルコール性油状ゲルを用いて効果があつたとしている。接蝕皮膚炎については、以下の文献がある。「Ar c h. D e r ma t o - 1 J 1 25 ： 56 8 ( 1 9 8 9 ) では、ヒトの DNCBテストに使用して、効果がなかったとしている。「C o n t a c t D e r ma t i t i s」 1 9、 129〜 1 32 ( 1 988) では、 3種の処方即ち L a b r a f i 1 (ポリオキシル一 5—ォレエ一ト、ォリーブ油及びェタノール）中の 10 %シクロスポリン、ヒマシ油中の 5 %シクロスポリン及び 20 %プロピレンダリコールを含むヒマシ油中の 5 %シクロスポリン及ぴ 20 %プロピレンダリコールを含むヒマシ油中の 5 %シクロスポリンについて検討したが、結果は不満足なものでぁリ、さらに良い媒体を見出す必要があると記載している。「C o n t a c t D e r m— a t i t i s」： 155 - 1 56 (1 98 9) では、 3種の処方即ちオリーブ油中 0. 1、 1及び 1 0 %のシクロスポリンを使用したが、全く効果がなかったことを報告している。乾せんに対する薬理効果ついては、以下の文献がある。「C l i n. R e s . 」 34、 1 007 A ( 1 986 ) によれば、シクロスポリンの濃度及ぴその処方は、明らかにされていないが、乾せんの治療には局所的に用いて有効ではないとしている。「L a n c e tJ 丄、 806 (1 987) では、 2重量⁰ /₀のシクロスポリン（軟膏ベース）は、プラセボと同じ効果しかなかったとしている。「J . Am e r . A c a d. D e r m a t o 1. J 1 8、 378— 3 79 (1 988) によれば、 5%のシクロスポリンを含むオリーブ油溶液は、基剤としたオリーブ油単独の場合と変わらなかったとしている。「J . Ame r . Ac a d. D e r m a ΐ o 1. 」 22、 1 26— 1 27 ( 1 9 90) によれば、 1 0 %シクロスポリン、 43 %ォリーブ油、 1 0%エタノール、 30%ポリオキシル一 5—ォレエ一ト及び 7 %コ口ィド状シリカよリなるゲルを使用したが、効果がなかったとしている。「B r i t . J . D e r m. 」、 1 1 3〜 1 14 ( 1 9 90) は、軟膏ベース中 5重量⁰ /₀のシクロスポリンを使用したが、効果がなかったことを報告している。

また円形脱毛症については、以下の文献がある。「L a n c e t」 803〜804 ( 1 986 ) では、 2 %シクロスポリン油性溶液にょリ、効果があったことが報告されている。「 L a n c e t」、 9 7 1〜 9 72 ( 1 986 ) によれば、油中 5% (w/v) のシクロスポリンを使用して効果があつたとしている。しかし、「A c t a . D e r m. V e n e r e o 1. 」 6 9、 252— 253 (1 98 9)によれば、 1 0%のシクロスポリンを含む油状製剤を使用したが、無効であつたとしている又、男性脱毛症については、「 J . Am e r . A c a d. D e r m a t o し」 22、 25 1〜253 ( 1 98 9) によれば、処方は明らかでないが、 5 %のシクロスポリンを使用して効果があつたとされている。上述の文献から見る限リ、シクロスポリンが、皮虜疾患に局所的に用いた場合に、有効であるのかどうかを判断するのはかなリ困難である。そして、たとえ有効であるとしても、満足すべき効果を得るには、かなリ多量のシクロスポリンを使用しなければならないことが分かる。対象とする皮膺疾患に対して外部よリ適用したシクロスポリン製剤が有効でないか又はその薬理効果が不満足な場合は、配合成分の種類及びその用量が不適切であることによる場合が多く、従来提案された処方ではシクロスポリンの外用薬剤としての有効利用の目的は達成できていない。発明の開示

本発明の第 1の目的は、シクロスポリンを、対象とする皮膚疾患に対して常に有効に作用させるために有用なかつ安全性の高いシクロスポリン含有外用薬剤を提供することにある。

本発明の他の目的は、低級アルコール濃度が低く抑制された安全性の高いシクロスポリン含有外用薬剤を提供することにある。

本発明のさらに他の目的は、低級アルコールを含まない安全性の高いシクロスポリン外用薬剤を提供することにある。

本発明者らは、シクロスポリンの皮膚浸透性又は角質層透過性にすぐれかつ皮膚刺激性の少ない、安全性の高いシクロスポリン含有外用薬剤を開発すべく鋭意研究を重ねた結果、本発明を完成するに至った。

本発明によれば、（a ) シクロスポリン、（b ) シクロスポリンを溶解させるための有機溶剤、（c ) 2 5 °Cで液状を示す全炭素数 8以上の脂肪酸と一価アルコールのエステル及び Z又は 2 5 °Cで液状を示すァルカノールァミン、（d ) 2 5 °Cで固体状を示す油性物質及び（e ) 界面活性剤からなり、該シクロスポリンの含有量が 0 . 1〜 1 -0重量％の範囲にあリ、該脂肪酸と一価アルコールのエステル及ぴノ又はアルカノールァミンの含有率が 1〜1 5重量。 /₀の範囲にあることを特徴とするシクロスポリン含有外用薬剤が提供される。

また、本発明によれば、（a ) シクロスポリン、（b ) 低級アルコール、（ c ) 2 5でで液状を示す脂肪酸エステル及び Z又は 2 5 °Cで液状を示すアルカノールァミン、（d ) 2 5 °Cで固体状を示す油性物質及び ( e ) 界面活性剤からなリ該シクロスポリンの含有量が 0 . 1〜 1 0 重量％の範囲にあり、低級アルコールの含有量が 2〜 1 5重量％の範囲にあリ、該脂肪酸エステル及び/又はアルカノールァミンの含有量が 1 〜 1 5重量％の範囲にあることを特徴とするシクロスポリン含有外用薬剤が提供される。

従来、文献において提案されて来た外部適用のシクロスポリン製剤と比較して本発明のシクロスポリン含有外用薬剤は、その組成において異るのはいうま？もないが、少ない量のシクロスポリンの使用にょリその目的を有効に達成することが特徴である。

また本発明によるシクロスポリン含有外用薬剤は、以下のような特徴を有する。

1 . 治療効果が優れていること。

2 . 安定性が高いこと。即ち、外用薬剤中でシクリスポリンの分離及び結晶析出などの変化を起こさず、かつシクロスポリンと配合成分との間の化学変化を起こさない。

3 . 塗布性が良いこと。

4 . シクリスポリンが均一に分散していること。

5 . 安全性にすぐれていること。

本発明の外用薬剤において処方を決定するための各配合成分の選択及ぴそれらの配合成分の量比は重要な因子である。例えば外用薬剤の形態が軟膏である場合には、軟膏の薬理効果、軟膏の生物活性及び軟膏としての物理化学的安定性の面から検討しなければならない。従来の考えからは、通常、高級飽和脂肪酸や、ォレイン酸、 1 2—ヒドロキシステアリン酸等の脂肪酸が軟膏基剤の一つとして使われる。これらの脂肪酸の内で、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸などは, アルカリ、主として苛性カリと併用してセッケンを形成し、配合医薬品の乳化を助けるために使用される。

しかし、これらの脂肪酸をそのまま又は力リセッケンの形態でシクロスポリン含有外用薬剤の軟膏基剤として使用しても、シクロスポリンの乳化に対してはほとんど効果がなく、薬理効果のある外用薬剤を得ることはできず、むしろ軟膏の安定性が損なわれてしまう。

発明を実施するための最良の形態

本発明の外用薬剤は、その薬効成分として、シクロスポリンを含有する。シクロスポリンの含有割合は、 0 . 1〜 1 0重量⁰ /₀、好ましくは 1 〜7重量％でぁる。本発明の外用薬剤は、このような低いシクロスポリン濃度においても、すぐれた治療効果を示す。

本発明の外用薬剤は、シクロスポリンのための有機溶媒を含有する。この有機溶媒としては、常温（2 5 °C) で液状を示し、かつシクロスポリンに対して溶解性を示すものが用いられる。このような有機溶媒には、脂肪族アルコール及ぴ多価アルコール脂肪酸エステルが包含される。

脂肪族アルコールとしては、常温で液状を示すものであれば低級アルコール及ぴ高級アルコールを問わず使用可能である。また、アルコールは、直鎖又は分岐鎖アルコールであることができ、さらに、不飽和結合を有していてもよい。本発明で好ましく用いられる脂肪族アルコールの具体例としては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノーノレ等の低級ァノレコールの他、ォクチルァノレコーノレ、ノニノレアルコール、デシルアルコール、 2—ォクチルドデカノール、 2， 6 - ジメチル一 4—ヘプタノール、ォレイルアルコール等が挙げられる。分岐鎖を有する高級アルコールは、シクロスポリンの有機溶剤として好適のものである。

多価アルコール脂肪酸エステルとしては、次の一般式で表わされる二価アルコール脂肪酸エステルが好ましく用いられる。

R ^ O O R ^ H

前記式中、 R ¹は炭素数 4〜 1 2、好ましくは 6〜 1 0のアルキル基を示し、 R ²は炭素数 2〜4のアルキル基を示す。

多価アルコール脂肪酸エステルの具体例としては、例えば、プロピレングリコール力プリル酸エステル、プロピレングリコールカプリン酸ェステル、ブチレングリコール力プリル酸エステル、ブチレングリコール力プリン酸エステル、グリコールブチレート、プロピレングリコーブチレ一ト等が挙げられる。

前記した有機溶剤は、単独又は混合物の形で用いられる。有機溶剤を混合物の形で用いる場合、その混合物には低級アルコールを 5〜 6 0重量％、好ましくは 1 0〜5 0重量％程度含有させるのがよい。

有機溶剤の配合割合は、シクロスポリン 1重量部に対して 0 . 5〜 1 0重量部、好ましくは 1〜 5重量部の割合である。有機溶剤としては、低級アルコール、特にエタノールの使用が好ましい。この低級アルコールは、シクロスポリンに対する溶剤として作用する他、シクロスポリンの皮膚浸透を促進させる作用を示す。

シクロスポリンの皮膚浸透を促進させる点からは、低級アルコールの配合割合は、全外用薬剤に対して、 2重量。 /₀以上に規定するのがよい。また、低級アルコールは、その濃度が高くなると、皮膚刺激性が強くなることから、その全外用薬剤中の濃度は、 1 5重量％以下に規定するのがよい。シクロスポリンの皮膚浸透性の向上及び皮膚に対する低刺激性の点からは、全外用薬剤中の低級アルコール濃度は、 3〜6重量％にするのが好ましい。

本発明の外用薬剤においては、その貯蔵安定性の点からは、沸点 1 6 0 °C以上、好ましくは 1 8 0 °C以上の難揮発性の有機溶剤を用いることも好ましいことである。このような難揮発性有機溶剤としては、炭素数が 8以上の高級脂肪族アルコールや、二価アルコール脂肪酸エステルを挙げることができる。

本発明の外用薬剤は、常温で液状を示す一価アルコールの脂肪酸エステル及ぴ Z又はアル力ノールアミンを含有する。一価アルコールの脂肪酸エステルおいて、その全炭素数は 8以上、好ましくは 1 2以上である。

—価アルコールの脂肪酸エステルにおいて、その一価アルコール成分は、炭素数 1〜2 2、好ましくは 2〜 1 8の直鎖状又は分岐鎖状の脂肪族アルコールであることができる。また、その脂肪酸成分は、炭素数 4 〜 2 2、好ましくは 6〜1 8の直鎖状又は分岐鎖状の一価又は二価脂肪酸であることができる。これらの脂肪族アルコール及び脂肪酸は、不飽和結合を有していてもよい。一価アルコール成分の具体例としては、ェタノ一ノレ、プロノくノ一ノレ、イソプロノノーノレ、ブタノーノレ、へキサノール、ォクタノール、イソォクタノール、ドデカノール、ミリスチルアルコール、イソドデカノール、セチルアルコール、へキサデシルアルコール、 2—ェチルへキシルアルコール、 2—オタチルドデカノール等が挙げられる。脂肪酸成分としては、酪酸、オクタン酸、ノナン酸、カプル酸、力プリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノレン酸、リノール酸、エル力酸等の一価脂肪酸の他、コハク酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、ァゼライン酸、セバシン酸、ドデカン二酸等が挙げられる。好適な一価アルコールの脂肪酸エステルとしては、例えば、ェチルミリステート、イソプロピルミリステート、イソトリデシルミリステート、イソプロピルラウレート、イソプロ.ピルカプリレート、イソプロピルパルミテート、イソプロピルプチレート、アミルブチレート、ォクチルブチレート等の一価脂肪酸エステルの他、コハク酸ジェチル、コハク酸ジイソプロピル、アジピン酸ジェチル、アジピン酸ジイソプロピル、アジピン酸ジイソォクチル、アジピン酸ジォクチル、ァジピン酸ジデシル、アジピン酸デシルイソォクチル、ァゼライン酸ジェチル、ァゼライン酸ジイソプロピル、ァゼライン酸ジイソオタチル、セバシン酸ジェチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジブチル、セパシン酸ジォクチル等が挙げられる。本発明においては、特に、炭素数が 8以上の一価又は二価脂肪酸の低級アルコールエステルの使用が好ましい。

アルカノールァミンの具体例としては、ジエタノールァミン、トリエタノールァミン、イソプロパノールァミン、ジイソプロパノールァミン、トリイソプロパノールァミン、ジブタノールアミン、トリブタノールァミン等が挙げられる。謂画 ₀₇₉₈

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前記した常温で液状を示す一価アルコールの脂肪酸エステル及びアルカノールァミンは、有機溶剤に溶解したシクロスポリンの皮膚浸透性を向上させる作用を有するとともに、有機溶剤と混合し、有機溶剤に溶解したシクロスポリンを固体状油性物質中に均一に分散させる作用を示すこれらの化合物の配合量は、全外用薬剤に対し、 1〜1 5重量％、好ましくは 3〜1 0重量％の割合である。また、これらの化合物は、有機溶剤 1重量部に対し、 2〜5重量部、好ましくは 2 . 5〜4重量部の割合で用いるのがよい。本発明の外用薬剤は、常温で固体状を示す油性物質を含有する。本明細書で言う固体状には、半固体状が含まれる。油性物質には、アルコール、脂肪酸、エステル、トリダリセライド、ワックス、ワセリン等が包含される。アルコールとしては、例えば、パルミチルアルコール、ステァリルアルコール、エイコシルアルコール、グリセリン、ポリグリセリン等が挙げられる。脂肪酸としては、例えばパルミチン酸、ステアリン酸、ォレイン酸、ァラキン酸、ベヘン酸、モンタン酸、メリシン酸、セバシン酸等が挙げられる。エステルとしては、ブチルステアレート、へキシルラウレー卜、ミリスチルミリステート、ドデシルォレエート、 2 —オタチルドデシルミスリステート、へキシルデシルォクタノエ一ト、セチルラクテート、カプリル酸グリセリル、カプリン酸グリセリル等が挙げられる。トリグリセライドとしては、天然由来の動物質及び植物質のものを各種用いることができる。これらは一般に油脂と称されるもので工業的に広く入手可能である。多くの種類の植物油、牛脂、肝油、ラノリン、ラード等が挙げられるが、好適には植物油、特にオリーブ、椿油、大豆油、菜種油、コーン油、ひまし油、サフラワー油等を使用することができる。また、近年アレルギー及び悪性腫瘍等に対する作用が注目されているエイコサペンタデカノィン酸を豊富に含む脱臭された魚油も使用できる。

油性物質の配合量は特に制約されず、所望される外用薬剤の性状に応じて適当な量を配合するが、一般的には、有機溶媒と常温で液状を示す一価アルコール脂肪酸エステル及び/又はアルカノールァミンとの合計量 1重量部に対し、 1〜 1 0重量部、好ましくは 2〜 8重量部である。本発明の外用薬剤は、界面活性剤を含有する。界面活性剤としては、陰イオン性、陽イオン性、非イオン性及び両性の各種界面活性剤が使用可能であるが、皮膚に対する低刺激性の点から、非イオン性界面活性剤が有利に用いられる。非イオン性界面活性剤としては、エチレンォキシド系界面活性剤、ポリヒドロキシ系界面活性剤、高分子系界面活性剤等が包含される。エチレンォキシド系界面活性剤としては、例えば、高級アルコールのエチレンォキシド付加物、高級脂肪酸のエチレンォキシド付加物、アルキルフエノールのエチレンォキシド付加物、脂肪酸ァミンのエチレンォキシド付加物、脂肪酸アミドのエチレンォキシド付加物、多価アルコールのエチレンォキシド付加物、エチレンォキシド/プロピレンォキシドブロック共重合体等が挙げられる。ポリヒドロキシ系界面活性剤としては、例えば、グリセリンモノ脂肪酸エステル、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、エタノールァミンの脂肪酸アミド及びそれらのアルキレンォキシド付加物等が挙げられる。本発明においては、特に、ポリオキシェチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリルモノ脂肪酸エステル、ポリオキシプロピレンモノ脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルコールエーテル等が有利に使用される。これらの界面活性剤は、単独又は混合物の形で用いられる < 界面活性剤の配合量は特に制約されず、所望される外用薬剤の性状に応じて適当な量を配合する。一般的には、外用薬剤が非ェマルジヨンタイブ場合、全外用薬剤中 5〜5 0重量。 /₀、好ましくは 2 0〜4 5重量％であリ、ェマルジヨンタイプの場合には、 1〜2 0重量％、好ましくは 5〜1 5重量。 /₀である。

本発明の外用薬剤は、必要に応じ、充填剤、シクロスポリンの溶解助剤、増粘剤、着色剤、芳香剤、水、流動パラフィン、スクァラン、乳化安定剤、殺菌剤、防力ビ剤等を含有することができる。充填剤としては、有機系及び無機系の微粉末が用いられる。この充填剤の粒径は、通常、 0 . 1〜2 0 /i m、好ましくは 0 . 5〜 1 0 mである。充填剤の好適な例としては、シリカ、アルミナ、チタニア、樹脂粉末、ケィ酸塩粉末、クレー粉末、セピオライト粉末、モンモリロナイト粉末、含フッ素マイ力粉末、ヒドロキシプロピルセルロース粉末等が挙げられる。シクロスポリンの溶解助剤としては、エチレングリコール、プロピレングリコール、イソプレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等のアルキレングリコールゃポリアルキレングリコールが用いられ、その含有量は有機溶剤 1重量部に対し、 0 . 2〜 5重量部の割合である。アルキレングリコールは、シクロスポリンの皮浸透を促進させる作用も示す。本発明の外用薬剤は、ェマルジョン又は非ェマルジョンの形態で用いられる。本発明の外用薬剤を非ェマルジョンの形態に製剤化する場合、次の成分組成であることが好ましい。

(a ) シクロスポリン

0. 1〜 1 0重量％、好ましくは 1〜 7重量％

(b) 有機溶媒

1〜 40重量％、好ましくは 2〜 20重量％

( c ) 常温で液を示す一価アルコールの脂肪酸エステル及び/又はァルカノ一ルァミン

1〜 1 5重量％、好ましくは 3〜 1 0重量％

(d) 常温で固体状を示す油性物質

20〜 80重量％、好ましくは 35〜 6 0重量％

(e) 界面活性剤

5〜 50重量％、好ましくは 20〜4 5重量％

( f ) 充填剤

0〜 1 5重量％、好ましくは 5〜： L 0重量％

前記非ェマルジョンタイプの外用薬剤において、有機溶媒として低級アルコールを単独で用いる場合、その含有量は、 2〜 1 5重量％、好ましくは 3〜 1 0重量％の範囲にするのがよく、また、界面活性剤の含有量は、 20〜45重量％、好ましくは 20〜40重量％の範囲にするのがよく、さらに、油性物質の含有量は、 3 5〜6 0重量％、好ましくは 40〜 55重量％の範囲にするのがよい。界面活性剤としては、 HLB が 8〜 1 5、好ましくは 9〜 1 2のものが用いられる。 92/00798

1 6 . 前記非ェマルジヨンタイプの外用薬剤は、シクロスポリンめ有機溶剤溶液と、常温で液状を示す一価アルコールの脂肪酸エステル及び又はアルカノ一ルァミンを混合し、得られた混合液に、油性物質と界面活性剤を添加混合し、次いで必要に応じ、充填剤を添加し、均一に混合することによリ調製することができる。 . 本発明の外用薬剤をェマルジョンの形態に製剤化する場合、次の成分組成であることが好ましい。

(a ) シクロスポリン

0. 1〜： L 0重量％、好ましくは 1〜 7重量％

(b) 有機溶媒 1〜 20重量％、好ましくは 2〜 1 2重量％

(c) 常温で液状を示す一価アルコールの脂肪酸エステル及び Z又はァノレ力ノーノレアミン

1〜 1 5重量％、好ましくは 3〜1 0重量％

(d) 常温で固体状を示す油性物質 1 0〜 3 5重量％、好ましくは 1 5〜3 0重量。 /₀

(e) 界面活性剤 1-20重量％、好ましくは 5〜 1 5重量％

(f ) 充填剤

0- 1 0重量。 /₀、好ましくは 0. 1〜5重量⁰ /₀ (g) 精製水

3 0〜 75重量％、好ましくは 40〜 5 0重量％前記ェマルジヨン形態の外用薬剤を製造するには、前記成分（_a) 〜 ( f ) を加温下で混合して液状油性混合物 Aを作リ、この混合物 Aに、撹拌下、加温した精製水 Bを添加混合する。精製水 Bの添加割合は、混合物 Aと精製水 Bとの合計量に対し、 3 0 〜 7 5重量％の割合である。精製水 Bには、あらかじめ、シクロスポリンの皮膚浸透助剤、粘度調節剤や、殺菌剤、アルカノールァミン等の水溶性物質を溶解させることができる。シクロスポリンの皮膚浸透助剤としては、例えば、エチレングリコーノレ、プロピレングリコール、ブチレングリコール等のアルキレングリコールが用いられる。粘度調節剤としては、ポリエチレングリコーノレ、ポリプロピレンダリコール等のポリアルキレングリコール；グリセリン等の多価アルコール；カルボキシビ二ルポリマー等の水溶性ポリマ一が用いられる。ェマルジヨン形態の外用薬剤は、油/水型及び水/油型のものであることができる。油 _/ /水型の外用薬剤の場合、界面活性剤としては、 H L B 9 〜 1 8を有する界面活性剤が好ましく使用され、水 /油型の場合、 H L B 2 〜 8を有する界面活性剤が好ましく使用される _c ェマルジヨン形態の外用薬剤に対しては、必要に応じ、流動パラフィンゃグリセリン、ヮセリン等の粘稠な油性物質を混合することもできる。本発明の外用薬剤の投与に当っては、外用薬剤を直接に 1 日数回例えば 1 〜 3回患部に塗布するか、あるいはパッチ、プラスター、パップ等の形態に加工し、これを同様に 1 日数回患部に適用することができる。適用 E数は該当する疾患の重篤度によリ適宜増減することができる。本発明の外用薬剤においては、シクロスポリンを溶解した有機溶剤溶液が液状の一価アルコール脂肪酸エステル及びノ又はアル力ノールァミンとの混合物の形で油性物質中に均一に分散している。従って、本発明 8

の外用薬剤は、高い皮膚浸透性を有し、これを病巣部の皮膚に塗るだけで、自己免疫あるいはアレルギー性の皮膚疾患に対してすぐれた治療効果を発揮する。また、本発明の外用薬剤は、皮膚刺激性のないあるいは皮膚刺激性の低いものであリ、安全性の点でも非常にすぐれている。本発明のシクロスポリン含有外用薬剤は、各種皮膚疾患の治療剤例えばアトピー性皮膚炎、乾せん、接蝕皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、円形脱毛症等の治療に著効を示す。さらに、本発明の外用薬剤は、他の皮膚の疾患、例えば熱傷の治療にも有効に用いることができる。さらに、皮膚を移植した場合、移植した皮膚が移植箇所に生着するのを助けるために使用することができる。

実施例

次に本発明を実施例によリさらに詳細に説明する,

実施例 1

外用薬剤成分として以下のものを用いた。

シクロスポリン

9 5 %ェタノール 3重量％イソプロピルミリステート 5重量％オリーブ油 4 8重量％ポリオキシエチレン（5)グリセリルモノステアレート 3 5重量％微粉末状シリカ（エアロジル 2 0 0 ) 8重量％次に、前記したイソプロピルミリステート、ポリオキシエチレン（5 ) グリセリルモノステアレートそしてオリーブ油を 5 0 °Cに加温下撹拌しながら混合し均質な溶液にした。この加温溶液に、エタノールにシクロスポリンを溶解させた溶液を添加混合した。次に、得られた 30〜35 °Cの混合物に、エア口ジルを添加撹拌して軟膏を得た。

実施例 2

外用薬剤成分として以下のものを用いた。

シクロスポリン 1重量％

9 5 %ェタノール 5重量％イソプロピルミリステート 5重量％ォリーブ油 47重量％ポリオキシエチレン（5) グリセリルモノォレート 35重量％微粉末状シリカ（エアロジル 200) 7重量⁰ /₀ 次に、前記成分を用い、実施例 1と同様にして外用薬剤を調製した。実施例 3

外用薬剤成分として以下のものを用いた。

シクロスポリン 2重量％

9 5 %ェタノール 1 0重量％イソプロピルミリステー卜 5重量％椿油 44重量％ポリオキシエチレン（5)グリセリルモノステアレート 32¾量⁰ /₀ 微粉末状シリカ（エアロジル 200) 7重量％次に、前記成分を用いて実施例 1と同様にして外用薬剤を得た。

実施例 4

モルモットを用い、その皮膚にジニトロフルォロベンゼン（DNFB) を塗布して感作させた後、再度 DNF Bを塗布する。この DNFBの塗布にょリ、その皮膚には、強い皮膚アレルギー反応が現われる。この反応に対する本発明の薬剤の効果を調べた。

H a r t 1 e y系雄性モルモット（体重 40— 500 g) を用い、感作 3日前に、予めシクロホスフアミド（200mg/k g) を腹腔内に投与したモルモットの片耳に、 50 / 1の 10 %DNF B (アセトン：オリ一ブ油 = 1 ： 1の混合液に溶解）を塗布した。 8日後、前以て脱毛した両側腹に 0. 5%又は0. 1 %のDNFB (アセトン：ォリーブ油 =4 ： 1の混合液に溶解）を 20 μ 1塗布し、接触性皮膚アレルギー反応を誘発させた。

両側腹部の対応する位置に、抗原を塗布し、次に実施例 1で示した本発明の外用薬剤（シクロスポリン（CP) 含有量、 0. 1 %、 1 %及び 10%) をそれぞれ 50 1塗布した。この塗布は、 1 日 2回 8時間の間隔をおいて行った。特に、最初の塗布は、抗原である DNFBを塗布し風乾後直ちに行った。

アレルギー反応の判定は、抗原塗布後 24時間目、 48時間目及ぴ 7 2時間目に以下の基準に従って行った。 4 =赤く腫れ上がつている、 3 =赤い、 2 =ピンク色、 1 =ピンク色のスポット及び 0 =変化なし。その結果を表 1に示す。表 1に示した数値は、平均値土標準誤差（S E) を示す。

統計処理は、 s t u d e n t ' s t— t e s tで行い、危険率 pが pく 0. 05のとき有意差ぁリとした。

0. 5 %の DNF Bの塗布の場合は、次の通リであった。塗布後 24 時間目から 48時間目にかけて、最も強いアレルギー反応が生じた。シクロスポリンを 0. 1 %含む軟膏では、反応をかなリ抑えたが、有意差はなかった。一方、シクロスポリンを 1 %含む軟膏では、 24時間目のアレルギー反応を著しく抑え（pく 0. 0 1) 、 48時間目、 72時間目についても同様に有意に抑制した。又、シクロスポリンを 1 0%含む軟膏では、 1 %含む軟膏と同様に、有意な抑制が認められた。なお、軟膏基材のみでは反応を全く抑制できなかった。その結果を表 1に示す。

ネ pく 0.05 ** pく 0.01

0. 1 %の DNF Bの塗布の場合は、次の通リであった。塗布後 48 時間目に最も強いアレルギー反応が生じた。シクロスポリンを 0. 1 % 含む外用薬剤では、 24時間目の反応を著しく抑制した（p < 0. 0 1) 、 48時間目、 72時間目についても同様に有意に抑制した。シクロスポリンを 1 %及び 1 0°/。含む外用薬剤については、 0. 1 %含む外用薬剤と同じく何れも有意な抑制が認められた。なお、外用薬剤の基剤のみ T/JP92/00798

2 2

では、反応を全く抑制でき'なかった。この結果を表 2に示す _c 表 2

* Ρ < 0. 05 ** ρ < 0.01 実施例 5 本発明の外用薬剤の臨床上の効果を示す。 (症例 1 ) 2 7才の男性。アトピー性皮膚炎。 3才からアトピー性皮膚炎にかかリ、 8才時に一時寛解したが、 2 2才ょリ再度出現。これまで、各種のステロイド軟膏を使用したが、殆ど有効でなかった。本発明の 1 0 %シクロスポリン含有軟膏を使用したところ、塗布後 4〜5時間目から痒みが消失し、その後 1 日 2回の塗布で、 3日目からアトピー性皮膚炎特有の苔せん化した皮疹は、全く消失した。 (症例 2 )

6才の男児。アトピー性皮膚炎。 3才時よリアトピー性皮膚炎を発症。経口剤として、ァゼプチン、ザジデン及びリザベン、軟膏としてリンデロン V、口コルテン及びメサデルムを投与したが、効果が認められなかつた。本発明の 5 %シクロスポリン含有軟膏を使用したところ、塗布後 5時間以内に痒みが全く消失し、 2 4時間以内に塗布部のそう痒、紅斑、湿潤びらん面が消失した。

(症例 3 )

5 2才の男性。乾せん性関節炎、湿潤を伴い、境界が明瞭でしかも表面に鱗屑を付着した紅斑面に、本発明の 1 %シクロスポリン含有軟膏を使用したところ、 2 4時間後に A u s p i t z現象が改善し、 3 3目には、紅斑面も劇的に消失した。

実施例 6

本発明の外用薬剤の有効性を示すために、表 3に示す成分組成の軟膏を作リ、その薬効を実施例 4と同様にして評価した。その結果を表 3に示す。

表 3 含有量（w t %)

成分実験番号

*比較例を示す

比較例

以下のシクロスポリン含有外用薬剤を調製した。

( i ) シクロスポリン 5 w t %含有ひまし油懸濁物。

(Π) 20 w t %プロピレンダリコール含有ヒマシ油中にシクロスポリン 5 w t %を懸濁した液剤。

(iii) シクロスポリン 1 0重量⁰ /₀、ォリーブ油 43重量⁰ /₀、エタノール 1 0重量⁰ /₀、ポリエキシエチレン（ 5 ) ォレエート 7重量⁰ /₀及びコロィド状ニ酸化珪素 3 0重量％からなる軟膏。

以上の外用薬剤の薬効を実施例 4と同様にして評価したところ、いずれも有意な薬効を示さなかった。

実施例 7

外用薬剤成分として以下のものを用いた。

シクロスポリン 5重量％ 9 5 %ェタノール % イソプロピルミリステート 7重量％椿油 4 0重量％ポリォキシエチレン（5)グリセリルモノステアレート 4 1重量％微粉末状シリカ（エアロジル 2 0 0 ) 5重量％次に、前記成分を用いて実施例 1と同様にして外用薬剤を得た < 実施例 8

外用薬剤成分として以下のものを用いた。

シクロスポリン %

9 5 %ェタノール - 5重量％イソプロピルミリステート 7重量％椿油 . 3 9重量％ポリォキシエチレン（5)グリセリルモノステアレート 3 9重量⁰ /₀ 微粉末状シリカ（エアロジル 2 0 0 ) 5重量⁰ /₀ 次に、前記成分を用いて実施例 1と同様にして外用薬剤を得た。

実施例 9 実施例 7及び実施例 8で得た各外用薬剤を、密封した状態で、相対湿度 7 5 %、温度 4 0 °Cで 6力月間保存した後、保存後の薬剤中のシク口スポリンの含有率を測定した。その結果、薬剤中のシクロスポリン含有量は、保存前と保存後において殆んど変化がなく、本発明の薬剤においては、シクロスポリンは安定に保持されることが確認された。

実施例 1 0

シクロスポリン 5 0 g、 2—ォクチルドデカノー 0 g、ミリスチン酸ィソプロピル 3 0 g、ミリスチン酸ィソトリデシル 2 0 g、モノォレイン酸ポリオキシエチレン（2 0 ) ソルビタン 1 0 g、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（5 ) グリセリル 5 0 g、モノステアリン酸ソノレビタン 1 0 g、セタノール 3 0 g、セバシン酸ジェチル 4 0 g、オリーブ油 3 0 gを 8 0 °Cに加温溶解する（混合物 A) 。一方、プロピレングリコール 3 0 g、ジイソプロパノールァミン 2 0 g、カノレボキシビニルポリマー 2 g、パラヒドロキシ安息香酸メチル 1 g、ラヒドロキシ安息香酸プロピル 1 gに精製水 5 9 6 m 1を加え、約 8 2 °C以上に加温する（混合物 B ) 。両者が所定の温度に到達したなら、混合物 Aを徼しく撹拌しながら混合物 Bを少しずつ加えて乳化する。加え終わったら、加温を停止し、室温で撹拌しながら 6 0〜 5 5 °Cで精製水を加えて全侔を l k gとする。全体を放置、脱泡後に溶器に充填する。

この処方においては、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（5 ) グリセリルは、 2 . 0重量％のポリオキシエチレン（2 ) セチルエーテルに、モノステアリン酸ソルビタンは同様のスクヮラン S Kに、及ぴセタノールは同様のベへニルアルコールに置換することができる。一方、混合物 Bの精製水は、全量を流動パラフィンに置換することができる。実施例 1 1

シクロスポリン 50 g、エタノール 50 g、イソプロピルミリステート 50 g、ポリエチレングリコール（400) 50 g、セバシン酸ジェチル 30 g、ォリーブ油 80 g、モノステアリン酸ポリオキシエチレン (5) 30 g、モノステアリン酸ポリエチレングリコール（40) 30 g、モノステアリン酸ソルビタン 20 gを混合して、加温溶解する（混合物 A) 。一方、ポリエチレングリコール 50 g、ジイソプロパノールァミン 20 g、カルボキシビュルポリマー 1 0 g、パラヒドロキシ安息香酸メチル 1 g、パラヒドロキシ安息香酸プロピル 1 gを約 5 28 m l の精製水に加温溶解する（混合物 B) 。混合物 Aを激しく撹拌しながら混合物 Bを少しずつ加えて、乳化する。混合物 Bを加え終わったら、精製水を添加して全量を 1 k gとする。

この処方においては、ジィソプロパノールァミンを同様のトリエタノールァミンに置き換えることができる。

実施例 1 2

シクロスポリン 50 g、ォリーブ油 50 g、ォクチルアルコール 1 0 0 g、ミリスチン酸イソプロピル 30 g、ミリスチン酸イソトリデシル 25 g、モノォレイン酸ポリオ^シエチレン（20) ソルビタン 20 g、モノステアリン酸ポリオキシェアレン（5) グリセリル 6 0 g、モノステアリン酸ソルビタン 20 g、セタノール 30 g、ステアリン酸 2 5 g、セバシン酸ジェチル 35 gを 80°Cに加温溶解する（混合物 A) 。これとは別にプロピレングリコール 20 g、ジィソプロパノールアミン 20 麵

28

g、カルボキシビュルポリマー 2 g、パラドロキシ安息香酸メチル 0. 5 g及ぴパラヒドロキシ安息香酸プロピル 0. 5 gを 40 Om 1の精製水に加え、 8 2°C以上に加温して溶解させる（混合物 B) 。混合物 Aを 80°Cに保ち、激しく撹拌しながら混合物 Bを少しづつ加えて乳化させる。加え終わったら、加温を停止し、撹拌を続けながら、乳化液の温度が 60〜55 °Cに降下した時点で、あらかじめ 80°Cに加温した精製水を加えて全体を 1 k gとする。全体を放置、脱泡後にクリーム状の軟膏を容器に充填する。この処方において、ミリスチン酸イソプロピルは、パルミチン酸ィソプロピルに置換することができる。実施例 1 3 シクロスポリン 50 g、ミツロウ 30 g、 2 , 6—ジメチルー 4—へプタノール 80 g、ミリスチン酸イソプロピル 40 g、ミリスチン酸ィソトリデシル 20 g、ォリーブ油 30 g、へキサステアリン酸 POE (6) ソルビット 20 g、 POE (60) 硬化ヒマシ油 20 g、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（5) グリセリル 60 g、セトステアリールアルコーノレ 40 g、セバシン酸ジェチノレ 40 gを混合し、 80でに加温溶解する（混合物 A) 。別にプロピレングリコール 30 g、カルボキシビ二ルポリマー 2 g、ジイソプロパノールァミン 20 g、パラヒドロキシ安息香酸メチル 0. 5 g及びパラヒドロキシ安息香酸プロピル 0. 5 gを 5 10m 1の精製水に加え、 82 °C以上に加温'して溶解させる (混合物 B) 。混合物 Aを 80°Cに保ち、激しく撹拌しながら混合物 B を少しづつ加えて乳化させる。加え終わったら、加温を停止し、撹拌を続けながら、乳化液の温度が 60〜55°Cに降下した時点で、あらかじめ 80°Cに加温した精製水を加えて全体を 1 k gとする。全体を放置、脱泡後に容器に充填する。

この処方ではミッ口ゥの代わリにポリォキシエチレンラノリンアルコールあるいはミッロゥ誘導体を、ミリスチン酸ィソトリデシルをシリコン油 0. 2重量⁰ /₀に、ォレイン酸ポリオキシエチレン（20) ソノレビタンを他のポリォキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルに、モノステアリン酸ソルビタンをスクヮラン SKに、精製水を流動パラフィンに置換することができる。

実施例 14

シクロスポリン 50 g、モノカプリル酸プロピレンダリコール 80 g、ミリスチン酸イソプロピル 30 g、モノステアリン酸 PEG ( 25 EO) 30 g、ポリエチレングリコール 30 g、ミリスチン酸イソトリデシル 20 g、セタノール 20 g、オリーブ油 50 g、鯨ロウ 80 g、モノステアリン酸ソルビタン 30 g、モノステアリン酸ポリオキシエチレン (5) グリセリノレ 30 g、ステアリン酸 30 g、ジイソプロパノールァミン 20 g、セバシン酸ジェチル 40 gを混合し、 80°Cに加温溶解する（混合物 A) 。別にプロピレングリコール 30 g、カルボキシビニルポリマ一 2 g、ジィソプロパノールァミン 1 5 g、パラヒドロキシ安息香酸メチル 0. 5 g及びパラヒドロキシ安息香酸プロピル 0. 5 gを 4 00m lの精製水に加え、 82°C以上に加温して溶解させる（混合物 B) 。混合物 Aを 80°Cに保ち、激しく撹拌しながら混合物 Bを少しづつ加えて乳化させる。加え終わったら、加温を停止し、撹拌を続けながら乳化液の温度が 60〜55 °Cに降下した時点で、あらかじめ 80°Cに加温した精製水を加えて全体を 1 k gとする。全体を放置、脱泡後に容器に充填する。

実施例 1 5

シクロスポリン 50 g、 2—ォクチルドデカノール 70 g、イソプレングリコール 30 g、セパシン酸ジェチル 40 g、ミリスチン酸イソプ口ピル 30 g、ミリスチン酸イソトリデシル 30 g、鯨ロウ 60 g、セタノール 30 g、ステアリン酸 40 g、 P OE (5) グリセリルモノステアレート 20 g、モノステアリン酸 PEG (40 EO) 20 g、モノステアリン酸ソルビタン 1 0 g、ォリーブ油 50 g、プロピルパラベン l gを混合し、 80°Cに加温する（混合物 A) 。別に、ブチレングリコール 30 g、ジイソプロパノールァミン 20 g、メチルパラベン l gを精製水 460m lに加え、 82°C以上に加温して溶解させる（混合物 B) 。混合物 Aを 80°Cに保ち、激しく撹拌しながら混合物 Bを少しづつ加えて乳化させる。加え終ったら、加温を停止し、撹拌を続けながら、乳化液の温度が 60〜55 °Cに降下した時点で、あらかじめ 80°Cに加温した精製水を加えて全体を 1 k gとする。全体を放置、脱泡後容器に充填する。

実施例 1 6

シクロスポリン 50 gを 2—ォクチルドデカノール 80 gに溶解し、この溶液を、ミリスチン酸ィソプロピル 40 g、ォリーブ油 3 70 g、 POE (5) グリセリルモノステアレート 378 g、 POE (9) ラウリルエーテル 2 g及びモノステアリン酸ソルビタン 10 gからなる混合物の加温溶液と混合し、得られた混合物に微粉末状シリカ（エアロジル 200) 70 gを混合した。このようにして非ェマルジョンタイプの外用剤を得た。

実施例 1 7

実施例 1 5と同様にして得たシクロスポリン含有クリーム状軟膏の効果を、マウスの皮膚移植によリ確認した。

5週令の雄性 CB A系マウス 1 0匹の皮膚を、同令の雄性 C 3HZH e N系マウスに移植し、移植 3日目から実施例 1 2に従って調製した軟膏約 0. 1 gを一 B 2回移植部とその周辺の皮膚に移植片が脱落するまで塗布した。その結果は表 4に示すとおリである。

表 4

*平均値土 SE * ^Student' s t— test

シクロスポリン無添加のクリームを塗布した対照群では、移植片は平均 1 2. 7日で脱落したが、 5 %シクリスポリン含有クリームを塗布した群は、すべての移植片が 60日以上生育した。また、 1 %シクリスポリン含有クリームを塗布した群では、移植片の生着期間が有意に延長し. 平均生着数は 3 1. 3日であった。

実施例 1 8

体重約 300 gの 8匹のハートレイ系雄性モルモットにシク口フォスファマィド 1 5 Omg/k gを腹腔内に投与し、 3日後に 1 0%ジニト口フルォロベンゼン（DNFB) の溶液 50 1を片側の耳に塗布した。なお使用した DNFBは、アセトンとォリーブ油の（1 ： 1) 混合溶媒に溶解して溶液として用いた。 8日後に両側腹部の毛をバリカンで刈リ取リ、 20 /^ 1の0. 1%DNFB溶液を塗布し、接触性皮膚アレルギ一を惹起させた。その直後に DNFBを塗布した部位に実施例 1 5と同様にして得たシクリスポリン軟膏を 0. l g塗布し、引き続き 8時間後に実施例 1 5と同様にして得たシクリスポリン軟膏を塗布した。対照群にはシクリスポリンを含まない実施例 1 5の基剤を、同様のスケジュ一ルで塗布した。

了レルギ一反応の判定は、抗原塗布の 24時間後、 48時間後及ぴ 7 2時間後に次の基準に従って行った。 4=盛リ上がった発赤、 3 =発赤、 2=皮膚がピンクを呈する炎症、 1 =薄いピンクを呈する炎症、 0=変化なし。その結果は表 5に示すとおリである。表 5

**P<0.001 in Student' s t-test

この実験では DNF B塗布 24時間から 48時間にかけて、最も強いアレルギー反応を惹起された。しかし、 1. 0%のシクリスポリン軟膏は、アレルギー反応を強く抑制し、 0. 1 %の軟膏も反応を有意に抑制した。

Claims

請求の範囲

(1) (a) シクロスポリン、（b) シクロスポリンを溶解させるための有機溶剤、（c) 25。Cで液状を示す全炭素数が 8以上の一価アルコールの脂肪酸エステル及び又は 25 °Cで液状を示すアルカノールァミン、（d) 25°Cで固体状を示す油性物質及び（e) 界面活性剤からなリ、該シクロスポリンの含有量が 0. 1〜10重量％の範囲にぁリ、該一価アルコールの脂肪酸エステル及びノ又はアルカノールァミンの含有量が 1〜15重量⁰ /₀の範囲にあることを特徴とするシクロスポリン含有外用薬剤。

(2) 該有機溶剤が、 25°Cで液状を示す脂肪族アルコールである請求の範囲第 1項の薬剤。

(3) 該脂肪族アルコールが、低級アルコールである請求の範囲第 2 項の薬剤。 .

(4) 該低級アルコールが、エタノールである請求の範囲第 3項の薬剤。

(5) 該脂肪族アルコールが、分枝鎖を有する炭素数 8以-上の高級ァルコールである請求の範囲第 2項の薬剤。

(6) 該高級アルコールが、 2—オタチルドデカノールである請求の範囲第 5項の薬剤。

(7) 該有機溶剤が、常温で液状を示す多価アルコールの脂肪酸モノエステルである請求の範囲第 1項の薬剤。

(8) 該多価アルコールの脂肪酸モノエステルが、プロピレングリコ一ルカプリル酸モノエステル又はプロピレングリコールカプリン酸モノエステルである請求の範囲第 7項の薬剤。

( 9 ) 該有機溶剤が、シクロスポリン 1重量部に対して、 0 . 5〜1 0重量部の割合で存在する請求の範囲第 1項〜第 8項のいずれかの薬剤

(10) 該ー価アルコールの脂肪酸エステルが、炭素数 8以上の一価脂肪酸のエステルである請求の範囲第 1項〜第 9項のいずれかの薬剤。

(11) 該ー価アルコールの脂肪酸エステルが、炭素数が 4以上の 2価脂肪酸のジエステルである請求の範囲第 1項〜第 9項のいずれかの薬剤 _c

(12) 該ー価アルコールの脂肪酸エステルが、ミリスチン酸エステル及び/又はセパシン酸ジエステルである請求の範囲第.1項〜第 9項のいずれかの薬剤。

(13) 該油性物質が融点 2 5 °C以上の脂肪酸、アルコール、エステル及びトリグリセライドの中から選ばれる少なくとも 1種である請求の範囲第 1項〜第 1 2項のいずれかの薬剤。

(14) 該トリグリセライドが植物油である請求の範囲第 1 3項の薬剤 _c

(15) 該界面活性剤が、非イオン性界面活性剤である請求の範囲第 1 項〜第 1 4項のいずれかの薬剤。

(16) 充填剤を含む請求の範囲第 1項〜第 1 5項のいずれかの薬剤。

(17) アルキレングリコール及ぴ Z又はポリアルキレングリコールを含む請求の範囲第 1項〜第 1 6項のいずれかの薬剤。

(18) ( a ) シクロスポリン、（b ) 低級アルコール、（c ) 2 5。Cで液状を示す全炭素数が 8以上の一価アルコールの脂肪酸エステル及び/ 又は 2 5 °Cで液状を示すアルカノールァミン、（d ) 2 5 °Cで固体状を示す油性物質及び（e ) 界面活性剤からなリ、該シクロスポリンの含有量が 0 . 1〜 1 0重量％の範囲にぁリ、低級アルコールの含有量が 2〜 1 5重量％の範囲にぁリ、該ー価アルコールの脂肪酸エステル及び Z又はアル力ノールアミンの含有量が 1〜1 5重量％の範囲にあることを特徵とするシクロスポリン含有外用薬剤。

(19) 該低級アルコールが、エタノール、イソプロパノール、プロパノールおょぴイソブタノールの中から選ばれる少なくとも 1種である請求の範囲第 1 8項の薬剤。

(20) 該ー価アルコールの脂肪酸エステルが、炭素数 8から 2 4までの直鎖状又は分岐状脂肪酸エステルである請求の範囲第 1 8項又は第 1 9項の薬剤。

(21) 該油性物質が、植物油である請求の範囲第 1 8項〜第 2 0項のいずれかの薬剤。

(22) 前記界面活性剤が、非イオン性界面活性剤である請求の範囲第 1 8項〜第 2 1項のいずれかの薬剤。

(23) 充填剤 5〜 1 0重量％含有する請求の範囲第 1 8項〜第 2 2項のいずれかの薬剤。

(24) シクロスポリン 0 . 1〜 1 0重量⁰ /₀、エタノール 2〜 1 5重量 %、イソプロピルミリステート 1〜 1 5重量⁰ /₀、ォリーブ油又は椿油 3 5〜6 0重量％、界面活性剤 2 0〜4 0重量％及びシリカ 5〜1 0重量 %ょリなるシクロスポリン含有外用薬剤。