WO1993001842A1 - Procede de protection des protheses des materiaux implantables provisoires ou definitifs contre la colonisation et l'infection bacterienne - Google Patents

Procede de protection des protheses des materiaux implantables provisoires ou definitifs contre la colonisation et l'infection bacterienne Download PDF

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catheters
prostheses
alkyl
antibiotic
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Hélène ETESSE CARSENTI
Pierre Dellamonica
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Universite De Nice Sophia-Antipolis
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Definitions

  • the present invention relates to a method for protecting prostheses, implants and / or catheters, temporary or permanent implantable materials, against colonization and bacterial infection, as well as the equipment making it possible to obtain this protection.
  • EP-A-0.328.421 relates to a method for fixing known antibacterials using a polymer resin matrix, previously dissolved in an organic solvent. It is this resin which will then be fixed on the polymer. This method of attachment is indirect.
  • Document EP-A-0.207.624 relates to the methods for the preparation of an anti-infective polymer directly, comprising different stages. First, immersion of the polymer in a solution of antimicrobial agents dissolved in an organic solvent, then immersion of the polymer in an organic solvent which may contain metal salts, finally immersion of the polymer in an organic solvent containing antimicrobials. It is dried after each immersion.
  • Document EP-A-0.379.269 relates to the incorporation of chlorhexidine into a polymer during its manufacture. This technique involves heating as well as a quaternary ammonium of the tridodecyl methyl ammonium chloride (TDMAC) type, in order to allow subsequent fixing of the antibiotic. It is therefore an indirect use. On the other hand, the doctor who Wants to use this type of technique must immerse the polymer in the antimicrobial just before using it because there is no possibility of keeping the polymer treated with the antibiotic.
  • Document EP-A-0.141.628 relates to the use of chlorhexidine and therefore of its cationic functions to fix it directly on latex. In this document, there is absolutely no question of fixing an antimicrobial or antibacterial afterwards.
  • GB-A-2.093.348 uses plaster of Paris to fix the antimicrobial or the antibacterial.
  • document O-A-8,904,674 relates to the fixing of an antimicrobial on a biodegradable polymer.
  • Infections caused by implantation of prostheses can in particular be the cause of endocarditis and require difficult, if not impossible, treatments.
  • the failure of these treatments most often leads to the ablation of the material; he there follows a significant social cost and a non-negligible risk for the patient.
  • the present invention overcomes the problems of fixation and toxicity of the antibacterial substance, and thereby leads to improved efficiency.
  • R x represents an alkyl, aminoalkyl or phenyl radical optionally substituted (by a halogen atom or a hydroxy, alkyl, alkyloxy or carboxy radical), naphthyl or cyano
  • R 2 represents a hydrogen atom or an alkyl radical and n represents an integer ranging from 1 to 6, it being understood that the portions and alkyl radicals mentioned above are straight or branched and contain 1 to 4 carbon atoms, then
  • Suitable antibacterial agents are chosen from the class of quinolones, ⁇ -lactams, fusidic acid, fosfomycin, teicoplanin, aztreoname or imipenem.
  • the method according to the invention not only protects against bacterial proliferation, but in addition, by using biguanide as an adhesion agent, makes it possible to solve the double problem of poor adhesion of quinolones and other antibiotics to prostheses. , implants and catheters and the toxicity of biguanides when they themselves serve as an antibacterial substance.
  • the cationic functions carried by the hydrogenated amino functions of biguanide and the anionic functions carried by antibiotics are used; said cationic and anionic functions form an ionic bond allowing the fixation of biguanide antibiotics.
  • This method has the advantage of being able to be applied to any kind of prosthesis usable in medicine and of ensuring diffusion of the antibiotic directly from the implanted material.
  • the catheters, implants and prostheses can be chosen from urinary catheters, probes, vascular and intra-arterial catheters, cardiac valve prostheses, arterial prostheses, pacemakers, orthopedic prostheses, implants ocular or dental, bypass shunts between two segments of the circulatory system, as well as sutures.
  • the method according to the invention applies to various materials of constitution such as plastics, metals or sutures.
  • the biguanide solutions used are advantageously chosen from aqueous or organic solutions in solvents such as alcohols (for example ethanol, methanol), propylene glycol, polyethylene glycols or glycerol.
  • solvents such as alcohols (for example ethanol, methanol), propylene glycol, polyethylene glycols or glycerol.
  • the preferred biguanides are chlorhexidine: hexamethylene bis [(p-chlorophenyl) -5 biguanide] - 1, l ', alexidine: hexamethylene bis [(2-ethyl hexyl) -5 biguanide] -! 'or 1' hexamethylene bis [aminohexylbiguanide] -1, l '. Solutions containing the antibiotic will be adapted to the nature and class of the antibiotic chosen.
  • pevfloxacin pevfloxacin
  • norfloxacin sparfloxacin
  • enoxacin enoxacin
  • ciprofloxacin ofloxacin
  • fleroxacin fleroxacin
  • lomefloxacin enoxacin
  • ciprofloxacin ofloxacin
  • fleroxacin fleroxacin
  • lomefloxacin enoxacin
  • ciprofloxacin ciprofloxacin
  • ofloxacin fleroxacin
  • lomefloxacin enoxacin
  • temafloxacin e.g., frofloxacin
  • amoxicillin ceftria
  • ceacria cefria ceftazidime
  • NUNC polyvinyl
  • DYNATECH polystyrene
  • the effectiveness of the fixing of the antibiotic is achieved by assessing the antibiotic and antiadherential properties of the antibiotic fixed on the cups with respect to sensitive and / or resistant germs.
  • the method used for the study of the adhesion properties is that described by CHRISTENSEN GD et al., J. Clin. Microb ol. , 22, 996-1006 (1985).
  • a bacterial suspension inoculum of 10 6 CFU / ml obtained by diluting an overnight culture) is distributed in the wells of the microplate to be tested.
  • results of the wells which have fixed the antibiotic are expressed as a percentage of adhesion with respect to the control (blank wells) and with respect to the chlorhexydine wells alone.
  • Each experiment is carried out on the same plate in at least four wells and on three different plates.
  • the methods of fixing the antibiotic are studied by varying: the concentrations of chlorhexidine and the concentrations of antibiotics.
  • a study of the stability of the catheters as a function of time is carried out by measuring the antibiotic activity of the catheters stored for two months. Antibiotic activity is assessed in vitro by the KIRBY-BAUER method.
  • the pieces of catheters are implanted vertically in an agar inoculated by flooding with a selected germ (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Micrococcus lutea, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens ”). After incubation, one night at 37oC, the diameters of inhibition are measured, compared to those of uncoated catheters and chlorhexidine control catheters. It has thus been demonstrated by varying the concentrations of antibiotic (for example pefloxacin), that the fixation is dose-dependent.
  • antibiotic for example pefloxacin
  • a catheter impregnated with a solution containing 10% chlorhexidine and with a 2 g / 1 solution of pefloxacin is placed in 1 ml of buffer.
  • the concentration of pefloxacin in the buffer is measured after 1 and 24 hours of incubation at 37oC: 2.4 and 2.6 mg / l respectively.
  • the initial buffer is removed and then an assay is carried out after incubation at 37 ° C. overnight. The residual rate is then 0.3mg / l. This experiment shows that it is possible to release the antibiotic into the medium from the catheter. This release is effective from 1 to 24 hours.
  • the protection method according to the invention is carried out by soaking the prosthesis, the implant or the catheter in a solution containing 20 to 100 g / l of biguanide, optionally washing, soaking in a solution containing 1 to 100g / l of antibiotic, then possibly washing, and drying.
  • the duration of the soaking is not an essential factor for carrying out the invention. However, it is advantageous to soak for 1 to 24 hours in each of the solutions.
  • the prostheses and / or catheters impregnated according to the method of the present invention are capable of gradually releasing the antibacterial substance into the implantation medium for at least 24 to 48 hours, and thus leading to the prevention of bacterial contamination of the materials. used.
  • the present invention also relates to the device for protecting prostheses, implants and / or catheters obtained according to the method described above and capable of progressively releasing the antibacterial substance attached to the surface.
  • the impregnation of prostheses, implants and / or catheters can be carried out indifferently beforehand, for example following the manufacture of the prosthesis or at the time of use.
  • the present invention also relates to equipment making it possible to easily impregnate the catheter, implant or prosthesis.
  • Such equipment consists of: a) a solution containing 20 to 100 g / l of the biguanide of general formula (I) for example called solution No 1 and intended for the first impregnation and b) a solution containing 1 to 100 g / 1 of the antimicrobial substance, for example called solution No 2 and intended for the second impregnation.
  • such equipment may also include, instead of the bottle of ready-to-use solution, a bottle of solvent and the appropriate quantity of the substance which will be dissolved immediately by the user at the time of use.
  • Impregnation with the biguanide solution can also be carried out as soon as the material to be implanted is manufactured, the second impregnation being able to be considered at the time of use, for example in the case of an unstable antibiotic.

Abstract

Procédé de protection de prothèses, des matériaux implantables provisoires ou définitifs contre la colonisation et l'infection bactérienne, caractérisé en ce que l'on imprègne successivement le matériel: (a) par une solution de biguanide de formule générale (I) dans laquelle R1 représente un radical alcoyle, aminoalcoyle, phényle éventuellement substitué, naphtyle ou cyano, R2 est un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle et n est un nombre entier allant de 1 à 6, étant entendu que les portions et radicaux alcoyle sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de carbone, puis (b) par une solution d'un agent antibactérien capable d'être redistribué progressivement en milieu aqueux, puis sèche le matériel ainsi imprégné.

Description

"Procédé de protection des prothèses des matériaux implantables provisoires ou définitifs contre la colonisation et 1'infection bactérienne" .
La présente invention concerne un procédé de protection de prothèses, implants et/ou de cathéters, de matériaux implantables provisoires ou définitifs, contre la colonisation et l'infection bactérienne, ainsi que l'équipement permettant d'obtenir cette protection.
L'imprégnation de cathéters par des quinolones a été décrite dans de nombreux documents .
Le document EP-A-0.328.421 concerne une méthode de fixation d'antibactériens connus grâce à une matrice de résine polymère, préalablement dissolue dans un solvant organique. C'est cette résine qui sera ensuite fixée sur le polymère. Ce mode de fixation est indirect.
Le document EP-A-0.207.624 concerne les méthodes de préparation d'un polymère anti-infectieux de façon directe, comprenant différentes étapes. Tout d'abord, une immersion du polymère dans une solution d'agents antimicrobiens dissolus dans un solvant organique, ensuite, l'immersion du polymère dans un solvant organique pouvant contenir des sels métalliques, enfin 1'immersion du polymère dans un solvant organique contenant des antimicrobiens. On sèche après chaque immersion.
Le document EP-A-0.379.269 concerne l'incorporation de chlorhexidine dans un polymère lors de sa fabrication. Cette technique fait intervenir un chauffage ainsi qu'un ammonium quaternaire du type tridodécyl méthyle ammonium chlorure (TDMAC) ceci afin de permettre une fixation ultérieure de l'antibiotique. C'est donc une utilisation indirecte. D'autre part, le médecin qui veut utiliser ce type de technique doit plonger le polymère dans 1'antimicrobien juste avant de l'utiliser car il n'y a pas de possibilité de conservation du polymère traité avec 1'antibiotique. Le document EP-A-0.141.628 concerne l'utilisation de la chlorhexidine et donc de ses fonctions cationiques pour la ixer directement sur du latex. Dans ce document, il n'est absolument pas question de fixer un antimicrobien ou un antibactérien par la suite. Le document GB-A-2.093.348 utilise, pour fixer 1'antimicrobien ou 1'antibactérien, du plâtre de Paris.
Enfin, le document O-A-8.904.674 concerne la fixation d'un antimicrobien sur un polymère biodégradable.
Contrairement à la plupart de ces documents, la technique développée utilise préalablement un biguanide qui va se fixer sur un polymère tel qu'un cathéter, une prothèse ou un fil de suture, afin de permettre ensuite, et ensuite seulement, la fixation de 1'antimicrobien. Cet effet successif ne se retrouve dans aucun des documents cités ci-dessus.. D'autre part, cette successivité permet de ne pas avoir à utiliser, ni un solvant, ni une résine et d'avoir ensuite une technique beaucoup plus simple qui permet la conservation des objets chirurgicaux qui ont été traités et la stérilisation par oxyde d'éthylène, ce qui est gage de facilité pour le chirurgien qui aura, à sa disposition, un matériel stérile prêt à l'emploi. L'adhésion de ces agents antibactériens sur les matériels médicaux étant difficile, il en résulte une protection insuffisante pour éviter les infections bactériennes consécutives à la mise en place de la prothèse. L'imprégnation de cathéters par des biguanides est également décrite dans la demande de brevet japonais 60.036.064. Ces protections sont néanmoins insuffisantes et peuvent entraîner des problèmes toxicologiques lors du relargage des biguanides.
Malgré les recherches entreprises, les cas d'infections en présence de matériel étranger sont en très forte progression.
Les infections provoquées par 1 'implantation de prothèses peuvent être notamment à 1'origine d'endocardites et font appel à des traitements difficiles, voire impossibles. L'échec de ces traitements conduit le plus souvent à 1'ablation du matériel ; il s'ensuit un coût social important et un risque non négligeable pour le patient.
La présente invention permet de pallier aux problèmes de fixation et de toxicité de la substance antibactérienne, et conduit de ce fait à une efficacité améliorée.
Il a été trouvé un procédé de protection selon lequel la prothèse est imprégnée successivement, ce que ne propose pas les documents cités ci-dessus :
1 ) par une solution d'un biguanide défini par la formule générale :
NH NH NH NH
H il il n
RXR2N-C-NH-C-NH-(CH2)n-NH-C-NH-C-NR1R2
dans laquelle Rx représente un radical alcoyle, aminoalcoyle, phényle éventuellement substitué (par un atome d'halogène ou un radical hydroxy, alcoyle, alcoyloxy ou carboxy) , naphtyle ou cyano, R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle et n représente un nombre entier allant de 1 à 6, étant entendu que les portions et radicaux alcoyle cités ci-dessus sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de carbone, puis
2) par une solution d'un agent antibactérien capable d'être redistribué progressivement en milieu aqueux, puis la prothèse ainsi imprégnée est séchée.
Les agents antibactériens convenables sont choisis parmi la classe des quinolones, des β-lactames, l'acide fusidique, la fosfomycine, la teicoplanine, 1 ' aztréoname ou l'imipenème.
Le procédé selon 1 'invention permet non seulement de protéger contre la prolifération bactérienne, mais de surcroît, en utilisant le biguanide comme agent d'adhésion, permet de résoudre le double problème de la mauvaise adhérence des quinolones et d'autres antibiotiques sur les prothèses, implants et cathéters et de la toxicité des biguanides lorsqu'ils servent eux-mêmes de substance antibactérienne.
Pour arriver à ce résultat, on utilise les fonctions cationiques portées par les fonctions aminés hydrogénées du biguanide et les fonctions anioniques portées par les antibiotiques; lesdites fonctions cationiques er anioniques forment une liaison ionique permettant la fixation des antibiotiques au biguanide.
Ce procédé présente 1'avantage de pouvoir être appliqué à n'importe quelle sorte de prothèses utilisables en médecine et d'assurer une diffusion de l'antibiotique directement à partir du matériel implanté.
A titre d'exemple, les cathéters, implants et prothèses peuvent être choisis parmi les cathéters urinaires, des sondes, des cathéters vasculaires et intra-artériels, des prothèses valvulaires cardiaques, des prothèses artérielles, des stimulateurs cardiaques, des prothèses orthopédiques, des implants oculaires ou dentaires, des shunts de dérivation entre deux segments de l'appareil circulatoire, ainsi que des fils de suture.
Le procédé selon 1'invention s' applique à des matériels de constitution variés comme des matières plastiques, des métaux ou des fils de suture.
Les solutions de biguanide employées sont avantageusement choisies parmi les solutions aqueuses ou organiques dans des solvants tels que les alcools (par exemple éthanol, méthanol), le propylèneglycol, les polyéthylèneglycols ou le glycérol. A titre non limitatif les biguanides préférés sont la chlorhexidine : hexaméthylène bis [(p-chlorophényl)-5 biguanide] - 1, l', 1'alexidine : hexaméthylène bis [(éthyl-2 hexyl)-5 biguanide]-!, l' ou 1 'hexaméthylène bis [aminohexylbiguanide]-1, l' . Les solutions contenant 1'antibiotique seront adaptées à la nature et à la classe de l'antibiotique choisi. A titre d'exemple, dans le cas des quinolones des solutions dans les alcools (éthanol par exemple) ou dans des solvants chlorés, seront particulièrement adaptées, dans le cas des β-lactames, on utilisera plus spécialement les solvants suivants : eau distillée, éthanol, méthanol.
A titre d'exemple, parmi les classes d'antibiotiques citées précédemment, les produits ci-après sont particulièrement préférés: pêfloxacine, norfloxacine, sparfloxacine, énoxacine, ciprofloxacine, ofloxacine, fléroxacine, loméfloxacine, témafloxacine, amoxicilline, oxacilline, ceftriaone, cefsulodine, ceftazidime.
L'efficacité du dispositif selon l'invention a pu être mise en évidence dans les conditions suivantes : MATERIEL ET METHODE
ETUDE DES MODALITES DE FIXATION DE L'ANTIBIOTIQUE
- sur des microplaques de polyvinyl (NUNC) et polystyrène (DYNATECH) - sur des cathéters de polyurétane.
La concentration de biguanides nécessaire ainsi que la nature du solvant est étudiée (eau distillée, alcool éthylique, alcool mét ylique) .
Sur les microplaques, une étude de faisabilité est réalisée, puis une étude sur les conséquences de la fixation de l'antibiotique sur les propriété d'adhésion de différents germes.
Sur les cathéters, une étude de faisabilité est réalisée avec des modalités de fixation faisant varier les concentrations de l'antibiotique. Les cathéters coatés sont testés pour déterminer leur activité résiduelle en chlorhexidine, pour étudier la concentration d'antibiotique fixée, pour étudier la stabilité en fonction du temps de ce coating. MODALITES DU "COATING" a) Fixation sur des plaques de microtitration : Les plaques sont incubées une nuit à température ambiante en_ présence de chlorhexidine à concentration variable (tableau I, colonnes 2 à 11). Les plaques sont ensuite rincées à l'eau distillée ou non et séchées. L'antibiotique est alors distribué dans les cupules de la colonne 7 à la colonne 11 (tableau II). L'incubation est à nouveau réalisée pendant une nuit. Les plaques sont alors vidées, séchées à 1 'étuve et conservées à température ambiante, recouvertes pour éviter toute contamination par des bactéries de l'environnement. Elles sont utilisées dans un délai minimum de 8 à 60 jours après le coating, afin de vérifier la stabilité de la fixation de l'antibiotique.
Ce délai d'utilisation facilite les opérations des chirurgiens qui n'ont plus besoin, comme avec les techniques précédemment utilisées, de plonger les plaques de microtitration, ou d'autres supports, dans un agent antibiotique juste avant leur utilisation. Tableau I
1 2 10 11 32
A
B C
H
Figure imgf000008_0001
Tableau II
7 8 10 11 12
B
D
Figure imgf000008_0002
CH : chlorhexidine P : Pefloxacine
L'efficacité de la fixation de l'antibiotique est réalisée en appréciant les propriétés antibiotiques et antiadhérentielles de 1 'antibiotique fixé sur les cupules vis à vis des germes sensibles er/ou resistanrs. La méthode utilisée pour l'étude des propriétés d'adhérence est celle décrite par CHRISTENSEN G.D. et coll., J. Clin. Microb ol. , 22, 996-1006 (1985). Une suspension bactérienne (inoculum de 106 UFC/ml obtenu par dilution d'une culture d'une nuit) est distribuée dans les cupules de la microplaque à tester.
Après une période d'incubation de six heures à 1'étuve à 37oC, les cupules sont vidées, rincées à trois reprises par du tampon phosphate pH=7 puis les bactéries restées adhérentes sont fixées à l'alcool et révélées par coloration par le cristal violet. Une lecture des densités optiques (DO) est réalisée au spectromètre ( 540nm) .
Les résultats des cupules ayant fixé 1'antibiotique sont exprimés en pourcentage d'adhésion par rapport au témoin (cupules vierges) et par rapport aux cupules chlorhexydine seules. Chaque expérience est réalisée sur la même plaque dans quatre cupules au moins et sur trois plaques différentes.
Les résultats sont exprimés par la moyenne des pourcentages d'adhérence et une étude statistique est réalisée par le test t de STUDENT. b) Fixation sur des cathéters : Etudes in vitro
Les modalités de fixation de 1 'antibiotique sont étudiées en faisant varier : les concentrations en chlorhexidine et les concentrations en antibiotiques. Une étude de stabilité des cathéters en fonction du temps est réalisée par mesure de 1'activité antibiotique des cathéters conservés pendant deux mois. L'activité antibiotique est appréciée in vitro par la méthode de KIRBY-BAUER. Les morceaux de cathéters sont implantés verticalement dans une gélose inoculée par inondation avec un germe choisi (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Micrococcus lutea, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens... ) Après incubation, une nuit à 37oC, les diamètres d'inhibition sont mesurés, comparés à ceux des cathéters non coatés et des cathéters témoins chlorhexidine. II a ainsi été démontré en faisant varier les concentrations en antibiotique (par exemple la péfloxacine) , que la fixation est dose-dépendante.
ETUDE DE RELARGAGE DE L'ANTIBIOTIQUE - Epuisement de 1'antibiotique dans une solution tampon qui est renouvelée pour connaître la libération de 1'antibiotique en cas de renouvellement liquidien.
- Etude in vivo Des morceaux de cathéters coatés avec de la péfloxacine sont implantés en intrapéritonéal selon un modèle d'infection sur cathéter. Après mise en place des cathéters, une infection est provoquée par injection d'un inoculum de Staphylococcus aureus variable selon les expériences. Cet inoculum est injecté soit 24 heures après la mise en place des cathéters, soit juste après cette implantation. Après 24 et 48 heures, les souris sont sacrifiées, les cathéters sont prélevés, traités par sonication, trypsine pour décrocher les bactéries adhérentes et cultivés sur gélose pour numérer leur contamination bactérienne. Des prélèvements concommittants sont réalisés : foie, rate et sang. Ces expériences sont réalisées par rapport à des lots témoins de souris sur lesquelles sont implantés des cathéters non fixés avec 1'antibiotique.
Dans les liquides d'élution des cathéters, sont réalisés les dosages de 1'antibiotique présent ainsi que sur les cathéters prélevés ; 1'antibiotique résiduel est dosé par implantation directe du cathéter dans la gélose. c) Etude de fixation sur des implants métalliques :
Des morceaux métalliques (d'acier ou d'alliage de titane constituant des exemples de matériaux utilisés pour des prothèses métalliques) sont fixés avec la péfloxacine dans les mêmes conditions, puis testés par implantation des échantillons dans la gélose. d) Etudes de la fixation sur des fils de suture : Après fixation selon les mêmes procédés, les fils séchés et conservés pendant 15 jours à 2 mois sont testés pour leur activité antibiotique sur des géloses ensemencées avec des germes divers et ce par rapport à des fils témoins non coatés ou ayant fixé seulement la chlorhexidine.
RESULTATS
I - RESULTATS AVEC LES PLAQUES DE MICROTITRATION Fixation de la péfloxacine Les plaques sont dans un premier temps incubées une nuit à température ambiante avec la chlorhexidine (CH) aux concentrations de 0,2%, 1%, 2%, 10% en eau distillée, alcool éthylique et alcool methylique. Certaines sont lavées et séchées, d'autres simplement lavées avant la distribution sur la moitié de la plaque de la péfloxacine à concentration variable.
Les résultats montrant 1'influence du lavage des plaques après le temps de fixation de CH et avant 1'antibiotique sur l'activité antiadhérentielle vis-à-vis d' acinetobacter montrent que la fixation est plus efficace si un lavage n'est pas effectué avant l'imprégnation par l'antibiotique. Des concentrations variables de chlorhexidine sont étudiées. Les résultats de l'activité antiadhérentielle de la péfloxacine, sur des germes sensibles et sur des germes résistants montrent que 1 'activité la plus importante est obtenue avec une concentration en chlorhexidine de 10%.
II - RELARGAGE DE LA PEFLOXACINE FIXEE SUR CATHETER
Un cathéter imprégné par une solution contenant 10% de chlorhexidine et par une solution à 2 g/1 de péfloxacine est placé dans 1 ml de tampon. On mesure la concentration en péfloxacine dans le tampon après 1 et 24 heures d'incubation à 37oC : 2,4 et 2,6mg/l respectivement. Le tampon initial est enlevé puis un dosage est effectué après incubation à 37oC une nuit. Le taux résiduel est alors de 0.3mg/l. Cette expérience permet de montrer qu'il est possible de relarguer l'antibiotique dans le milieu à partir du cathéter. Ce relargage est effectif dès 1 à 24 heures.
III - ETUDE IN VIVO
Les résultats montrent que si 1 ' inoculum bactérien est injecté 24 heures après mise en place des cathéters coatés, aucune protection significative n'est obtenue. Par contre, si 1 ' inoculum est injecté le même jour que la mise en place des cathéters (ce qui correspond au modèle d'infection en chirurgie humaine), une différence significative est observée sur les moyennes en logarithme UFC/ml sur les cathéters avec un inoculum de 10~ UFC/ml. Cette différence est plus significative si les cathéters sont prélevés au temps 48 heures. De même, avec un inoculum bactérien de 103 UFC/ml, si la protection assurée par les cathéters coatés est non significative après 24 heures, elle est significative après 48 heures. Sur les cathéters péfloxacine infectés, la colonisation bactérienne est également significativement diminuée par rapport aux cathéters témoins contaminés.
IV - ETUDE SUR DES IMPLANTS METALLIQUES
Dans les conditions décrites précédemment une fixation de la péfloxacine est obtenue après traitement par immersion dans une solution de chlorhexidine à 10% d'alliages de titane et de fragments en acier inoxydable. Les résultats montrent un accroissement du diamètre d'inhibition par rapport au témoin non imprégné, pour tous les germes étudiés.
D'une manière générale, le procédé de protection selon l'invention est mis en oeuvre par trempage de la prothèse, de 1'implant ou du cathéter dans une solution contenant de 20 à 100g/l de biguanide, éventuellement lavage, trempage dans une solution contenant 1 à 100g/l d'antibiotique, puis éventuellement lavage, et séchage.
La durée du trempage n'est pas un facteur indispensable à la réalisation de l'invention. Cependant, il est avantageux d'effectuer un trempage pendant 1 à 24 heures dans chacune des solutions.
Les prothèses et/ou les cathéters imprégnés selon le procédé de la présente invention sont capables de relarguer progressivement la substance antibactérienne dans le milieu d'implantation pendant au moins 24 à 48 heures, et ainsi de conduire à la prévention de la contamination bactérienne des matériels utilisés.
La présente invention concerne égalemenr le dispositif de protection des prothèses, implants et/ou cathéters obtenu selon le procédé décrit précédemment et capable de relarguer progressivement la substance antibactérienne fixée à la surface.
L'intérêt de ce dispositif est considérable du fait de son efficacité et de son absence de toxicité puisque le biguanide n'est pas ou très peu relargué dans le milieu d'implantation.
Selon la présente invention, l'imprégnation des prothèses, des implants et/ou des cathéters peur erre effectuée indifféremment au préalable, par exemple consécutivement à la fabrication de la prothèse ou au moment de 1 'emploi.
La présente invention concerne également un équipement permettant de procéder facilement à l'imprégnation du cathéter, de l'implant ou de la prothèse.
Un tel équipement est constitué : a) d'une solution contenant 20 à 100g/l du biguanide de formule générale ( I ) par exemple appelée solution No 1 et destinée à la première imprégnation et b) d'une solution contenant 1 à 100 g/1 de la substance antimicrobienne par exemple appelée solution No 2 et destinée à la seconde imprégnation.
La mise en oeuvre du procédé selon 1 ' invention est ainsi facilitée dans les cas où les prothèses et/ou cathéters sont fournis sans dispositif de protection antibactérienne.
Alternativement, par exemple dans le cas de substances pouvant présenter des problèmes de stabilité en solution pendant un temps prolongé, il est bien entendu qu'un tel équipement peut aussi comprendre, à la place du flacon de solution prête à l'emploi, un flacon de solvant et la quantitié convenable de la substance qui sera dissolue extemporanément par l'utilisateur au moment de son emploi.
L'imprégnation par la solution du biguanide peut également être réalisée dès la fabrication du matériel à implanter, la deuxième imprégnation pouvant être envisagée au moment de l'emploi, par exemple dans le cas d'un antibiotique peu stable.

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé de protection de prothèses, implants et/ou cathéters, de matériaux implantables provisoires ou définitifs, contre la colonisation et l'infection bactérienne, caractérisé en ce que 1'on imprègne successivement le matériel à protéger : a) par une solution d'un biguanide de formule générale :
NH NH NH NH l: Il 11 II
R^N-C-NH-C-NH-(CH2)n-NH-C-NH-C-NR1R,
dans laquelle R, représente un radical alcoyle, aminoalcoyle, phényle éventuellement substitué (par un atome d'halogène ou un radical hydroxy, alcoyle, alcoyloxy ou carboxy), naphtyle ou cyano, R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alocoyle et n est un nombre entier allant de 1 à 6, étant entendu que les portions et radicaux alcoyle sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de carbones, puis b) par une solution d'un agent antibactérien capable d'être redistribué progressivement en milieu aqueux, puis sèche le matériel ainsi imprégné.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le biguanide présente des fonctions cationiques et que 1'antibiotique présente des fonctions anioniques ; lesdites fonctions cationiques et anioniques, coopérant ensemble pour fixer les antibiotiques ou biguanide.
3. Procédé selon l'une quelconque des revendicarions 1 ou 2, caractérisé en ce que le biguanide est la chlorhexidine, 1'alexidine ou 1 'hexaméthylène bis [aminohexyl biguanide] - 1, l'.
4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que 1'agent antibactérien est choisi parmi les quinolones, les -lactames, l'acide fusidique, la fosfomycine, la teicoplanine, 1 'aztréoname ou l'imipenème.
5. Procédé selon l'une des revendications 1, 2 ou 4, caractérisé en ce que l'agent antibactérien est la péfloxacine.
6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que l'on utilise une solution contenant 20 à 100g/l de biguanide.
7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1, 2, 4 ou 5 caractérisé en ce que l'on utilise une solution contenant de 1 à 100 g/1 d'agent antibactérien.
8. Dispositif de protection des prothèses implants et/ou cathéters, capable de redistribuer progressivement en milieu aqueux une substance antibactérienne fixées à sa surface, caractérisé en ce qu'il est obtenu selon le procédé de la revendication 1.
9. Equipement pour l'imprégnation de prothèses, d'implants et/ou de cathéters avant leur emploi, de manière à permettre la redistribution progressive d'une substance antibactérienne dans le milieu d'implantation, caractérisé en ce qu'il est constitué a) d'une solution contenant 20 à 100g/l d'un biguanide selon la revendication 1 et b) d'une solution contenant 1 à 100 g/1 d'une substance antibactérienne telle que définie dans la revendication 1, ou alternativement constitué des doses de produits et de solvants nécessaires à préparer ces solutions au moment de leur emploi.
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